电针对高脂血症合并脑缺血损伤大鼠海马区钙结合蛋白D28K蛋白表达的影响

目的:观察针刺对高脂血症合并脑缺血损伤大鼠大脑海马区细胞凋亡及钙结合蛋白(Calbindin)D28 K(CB)表达的影响。方法:SD雄性大鼠,随机分为正常对照组、模型组、治疗Ⅰ组和治疗Ⅱ组,每组10只。采用经典高脂配方饲料喂养并结合FeCl3化学刺激诱导血栓性闭塞大脑中动脉,造成大鼠高脂血症合并脑缺血模型。其中治疗Ⅰ组先电针"三阴交""丰隆",每日1次,治疗10 d后再造脑缺血模型;治疗Ⅱ组在造模成功后再开始治疗。两治疗组造模完成后均电针"三阴交""丰隆",手针"百会""水沟",每日1次,治疗7 d。应用免疫组化方法观察大鼠海马区CB蛋白表达的变化,原位末端标记染色法观察海马区神经细胞的凋亡情况。结果:高脂血症大鼠局灶性脑缺血后细胞凋亡率较正常组明显增高,CB阳性细胞较正常组明显减少,阳性强度也减弱(P<0.05);针刺后各治疗组CB阳性细胞的表达明显增加,其中治疗Ⅰ组较治疗Ⅱ组增加显著(P<0.05),同时各治疗组神经细胞凋亡亦明显减少,以治疗Ⅰ组较为明显(P<0.05)。结论:针刺可减少高脂血症大鼠海马区神经细胞的凋亡,增加CB的表达,减轻脑缺血损伤程度。

电针对高脂血症合并脑缺血大鼠侧脑室室管膜下区神经干细胞增殖的影响

目的:探讨电针促进神经细胞再生的作用机制。方法:雄性SD大鼠72只,随机分为正常对照组、高脂血症模型组、高脂血症治疗组、脑缺血模型组、脑缺血治疗组、高脂血症合并脑缺血模型组、高脂血症合并脑缺血治疗Ⅰ组和Ⅱ组,每组9只。采用经典高脂饲料喂养,FeCl3化学诱导大脑中动脉血栓闭塞制造高脂血症合并脑缺血模型。高脂血症治疗组电针"三阴交""丰隆"穴;脑缺血治疗组针刺"百会""水沟"穴;治疗Ⅰ组先造成高脂血症模型,电针"三阴交""丰隆",每日1次,治疗10d后,造成脑缺血模型,再针刺"百会""水沟"穴;治疗Ⅱ组在联合模型造成后针刺"百会""水沟"和电针"三阴交""丰隆"穴,每日1次,治疗7d。治疗结束后,通过免疫组织化学方法检测大鼠缺血侧侧脑室室管膜下区(SPZ)背外侧伸展、外侧壁神经巢蛋白(Nestin)和增殖细胞核抗原(PCNA)的阳性细胞数。结果:Nestin、PCNA在正常和高脂血症大鼠脑组织表达较少;脑缺血后缺血侧SPZ中Nestin、PCNA的表达增强(P<0.01);给予针刺干预后,脑缺血治疗组Nestin、PCNA的阳性细胞和反应强度较模型组明显增强(P<0.01);合并模型组Nestin、PCNA表达远远弱于脑缺血模型组(P<0.01);给予针刺干预后,合并模型治疗组Nestin、PCNA的阳性细胞表达高于合并模型组(P<0.01),治疗Ⅰ组比Ⅱ组各部位Nestin、PCNA的表达要强(P<0.01)。结论:高脂血症降低了脑缺血缺血侧SPZ神经干细胞的增殖,针刺具有促进高脂血症合并脑缺血后缺血侧SPZ神经干细胞增殖的作用。针刺治疗高脂血症可有效地预防和减轻脑缺血后脑组织损伤程度。

电针对高脂血症合并脑缺血大鼠室管膜下区神经干细胞分化的影响

目的:观察电针后高脂血症合并脑缺血模型大鼠缺血侧脑室室管膜下区(SVZ)波形蛋白、β-微管蛋白(Tuj-1)表达的变化,研究针刺对神经干细胞的分化作用。方法:雄性SD大鼠72只,随机分为正常对照组、高脂血症模型组、高脂血症治疗组、脑缺血模型组、脑缺血治疗组、高脂血症合并脑缺血模型组、高脂血症合并脑缺血治疗Ⅰ组、高脂血症合并脑缺血治疗Ⅱ组,每组9只。采用经典高脂饲料喂养及FeCl3化学诱导大脑中动脉血栓闭塞制造高脂血症合并脑缺血模型。高脂血症治疗组电针"三阴交""丰隆"穴;脑缺血治疗组针刺"百会""水沟"穴;合并模型治疗Ⅰ组先电针"三阴交""丰隆",每日1次,治疗10 d后,造成脑缺血模型,再针刺"百会""水沟"穴;合并模型治疗Ⅱ组,脑缺血后针刺"百会""水沟"和电针"三阴交""丰隆"穴,每日1次,治疗7 d。治疗结束后,应用免疫组化方法检测大鼠前脑缺血侧SVZ波形蛋白、Tuj-1的表达变化。结果:波形蛋白、Tuj-1在正常和高脂血症脑组织表达较少,脑缺血后缺血侧SVZ中波形蛋白、Tuj-1的表达增强(P<0.01),脑缺血治疗组波形蛋白、Tuj-1表达增强(P<0.01),合并模型组表达远远弱于脑缺血组(P<0.01),合并模型治疗组表达高于合并模型组(P<0.01),治疗Ⅰ组各部位波形蛋白、Tuj-1的表达比治疗Ⅱ组要强(P<0.01)。结论:高脂血症降低了脑缺血缺血侧SVZ神经干细胞的分化,针刺可促进高脂血症合并脑缺血后缺血侧SVZ神经干细胞的分化。在高脂血症阶段介入治疗,可通过促进脑缺血后缺血侧神经干细胞的分化,从而促进神经元的修复和再生。

基于HMGB1/TLR4/NF-κB通路探讨丹红注射液对高脂血症合并脑缺血损伤大鼠神经保护作用

目的:观察丹红注射液对高脂血症合并脑缺血损伤大鼠的神经保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法:SD大鼠高脂饲料喂养6周,建立高脂血症模型,将造模成功的高脂血症大鼠随机分假手术组,模型组,丹红注射液低、中、高(0.5、1.0、2.0mL/kg)剂量组,然后采用Zea Longa线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型。24h后进行神经功能评分,尼氏染色观察脑皮层神经元病理变化,RT-PCR法检测大鼠缺血侧脑皮层中高迁移率族蛋白1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子κB(NF-κB) p65 mRNA的表达,免疫组化法检测BDNF和NF-κB p65的蛋白表达,ELISA法检测肝组织匀浆中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量。结果:与模型组比较,丹红注射液各剂量组能不同程度降低脑缺血大鼠的神经功能评分(P<0.05,P<0.01),使大鼠缺血侧脑皮层中HMGB1、TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA表达水平降低(P<0.05,P<0.01),升高BDNF阳性细胞表达(除丹红注射液低剂量组外)(P<0.01),抑制NF-κB p65蛋白表达(P<0.05,P<0.01),降低肝组织匀浆中TC、TG含量(P<0.01)。结论:丹红注射液能减轻高脂血症合并脑缺血大鼠的脑组织损伤,降低肝组织匀浆中TC和TG含量,其机制可能与上调BDNF的表达及抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路激活有关。