高致病性H5N1禽流感暴发对食品安全的影响

·传统烹调食物各部分温度达到或超过70℃将可灭活H5N1病毒。因此,适当煮熟的禽肉可安全食用。·H5N1病毒如在禽肉中存在,不能通过冷藏或冷冻杀死。·家庭屠宰和食用病禽或死禽是有害的:这种做法必须制止。·禽蛋的外表(蛋壳)和内部(蛋白和蛋黄)均可含有H5N1病毒。来自家禽中H5N1暴发地区的禽蛋不应生食或部分煮熟(流淌的蛋黄);在不烧煮、烘烤或以其它方法加热处理的食物中不应使用未煮熟的禽蛋。·尚无流行病学证据表明人已在食用适当煮熟的家禽或禽蛋后感染H5N1病毒。·暴露于该病毒的最大危险在于通过处理和屠宰受感染活禽。在屠宰及屠宰后处理期间良好卫生规范至关重要,以便防止通过生禽肉暴露或从家禽到其它食物、食具表面或食物烹调设备的交叉污染。

高致病性H5N1禽流感病毒研究进展

H5N1禽流感病毒是一种高致病性病毒,是禽流感病毒的一种亚型。自1997年以来,该病毒每年都给大型家禽养殖者造成了重大经济损失,近几年在中国和越南还出现了变种病毒。本文对高致病性H5N1禽流感病毒的基本特征、致病力、检测及疫苗等方面的研究情况进行总结,为高致病性H5N1禽流感的有效防控提供科学依据。

2024年美国奶牛H5N1亚型高致病性禽流感疫情分析

2024年3月以来,美国报告了多例奶牛H5N1亚型高致病性禽流感病例,引发全球广泛关注。本文对本次疫情进行了系统梳理,分析了疫情流行情况和分布规律,提出了风险防范建议。现有数据表明,引发奶牛感染的H5N1亚型高致病性禽流感病毒属于2.3.4.4b分支,与美国同期在家禽和野禽中流行的毒株高度同源。初步分析表明,感染奶牛的病毒可能来源于野生候鸟。疫情发生后,美国采取了限制移动、调运检测等综合防控措施。本次疫情可能对美国奶牛产业造成一定程度的负面影响,但从目前来看对我国影响较小。建议持续进行国外疫情监视,国内加强野禽风险监测,强化家禽强制免疫,积极宣传引导,做好应急储备等,降低本次疫情对我国的影响。

2020-2022年我国H5亚型高致病性禽流感的流行特点分析

2020年以来,H5亚型高致病性禽流感(包括H5N1、H5N6、H5N8亚型)疫情在我国持续发生,威胁着禽类养殖业的健康发展和人类公共卫生安全。本文总结了2020年1月~2022年7月我国H5亚型高致病性禽流感在禽类中的流行情况,分析了其流行特点,并提出了其防控措施,以期为禽流感的科学防控提供理论参考。

2020—2022年全球H5亚型高致病性禽流感疫情简况及分析

为了解近年全球H5亚型高致病性禽流感(HPAI)疫情具体情况,本文通过对农业农村部畜牧兽医局发布的“一周国际动物疫情动态”和“疫情发布”中的HPAI疫情信息进行统计和分析,对2020—2022年全球H5亚型HPAI疫情的发生和流行情况,空间、时间和群间分布,以及给养禽业造成的危害进行较为全面的了解。结果显示,2020年全球H5亚型HPAI疫情以H5N8亚型为主;自2021年5月份,呈现H5N1亚型疫情逐渐增多、H5N8亚型疫情逐渐减少的趋势,至11月份,形成以H5N1亚型疫情为主、H5N8亚型疫情零星发生的局面。H5N1亚型HPAI疫情逐渐演变为全球大流行,在欧洲形成“重灾区”,非洲和亚洲疫情也较为严重。2022年存在2次明显的H5亚型HPAI跨洲际传播,分别是2月份从欧洲传播到北美洲和10月份从北美洲传播到南美洲,经分析认为这2次跨洲际传播与候鸟迁徙有密切联系。结果表明,本轮H5N1亚型HPAI疫情全球大流行持续时间长、传播范围广,给世界养禽业造成巨大危害和深远影响。

高致病性H5N1禽流感全球分布地理信息系统时空分析

目的了解高致病性H5N1禽流感疫情的时间与空间分布，为研究病毒的传播途径与机制提供假设和间接证据，为疾病的预防和预警提供技术支持。方法收集2003年3月一2012年3月世界卫生组织和世界动物卫生组织报告中官方确认的5963起暴发事件，运用多距离空间聚类分析、空间自相关等基于地理信息系统（GIS）的分析手段对高致病性H5N1禽流感的全球分布进行时间和空间尺度分析。结果2003-2012年共标记5963个高致病性H5N1禽流感暴发点，亚洲、欧洲、非洲暴发点分别为3647、1309、1007个，分别占61．16％、21．95％、16．89％；业洲国家越南暴发点数（1055个）和暴发率（2．22/百万头）最高，欧洲国家暴发点数最多的为德国（407个），暴发率最高的为罗马尼亚（1．09/百万头），非洲国家埃及暴发点数（758个）和暴发率（1．35/百万头）最高；窄问自相关函数（Moran’s，）和多距离空间聚类分析结果表明，2003年3月-2006年3月实际K值在0～5000km尺度范围内大十期望K值（Moran’s，=0．19，P〈0．05），2006年4月-2009年7月实际K值在0～4500km尺度范围内大于期望K值（Moran’s，=0．02，P〉0．05），2009年8月一2012年3月实际K值在0～6000km尺度范围内大于期望K值（Moran’s，=0．10，P〈0．01），其分布特征随着时间和空间尺度的变化而改变。结论高致病性H5N1禽流感的时空分布存在显著异质性，其空间分布模式对疫情预警有重要意义，人类活动、候鸟迁徙可能是禽流感传播的主要途径。

2013—2020年中国家禽H5亚型高致病性禽流感监测数据分析

为评价我国家禽H5亚型高致病性禽流感(HPAI)的免疫效果和分布,整理分析2013—2020年《兽医公报》公布的家禽H5亚型HPAI监测数据。结果显示:时间上,2013-2020年家禽H5亚型HPAI血清免疫合格率呈上升趋势,ARIMA模型预测2021年家禽血清免疫合格率将上升至94.89%(95CI,94.06%~95.73%)。家禽H5亚型HPAI病原阳性率在2014年和2019年出现2个高峰,12月和3月的病原阳性率最高。空间上,病原学监测阳性疫区主要分布在中国南方。种间上,血清免疫合格率鸡最高,鸭其次,鹅最低;病原阳性率鸭最高,鹅次之,鸡最低(P<0.05)。研究结果提示,我国家禽免疫效果逐年增强,但要及时更新与流行毒株匹配的疫苗,完善水禽的免疫接种,重点加强我国南方地区冬春交替季节禽流感的监测工作和防控措施。

一株野鸟源H5N8高致病性禽流感病毒的遗传演化分析及生物学特性研究

2021年本实验室从发病野鸟组织样品中分离到一株H5N8亚型禽流感病毒(AIV),命名为A/black-headed gull/Tibet/1-2/2021(H5N8),简称为BH Gull/TB/1-2/2021(H5N8)。为进一步了解该病毒的生物学特性,本研究对其基因组测序并经遗传演化分析,结果显示,该病毒HA蛋白的裂解位点为PLREKRRKR↓GLF,符合高致病性AIV(HPAIV)的分子特征。在遗传进化上HA基因属于2.3.4.4b分支,外部基因与部分内部基因(PB1、PA、NP、NS)均与2020年~2021年分离到的H5N8亚型AIV相应基因的同源性最高,且处于同一分支;PB2基因与一株H9N2亚型AIV PB2基因同源性最高,为99.25%;M基因与近两年流行的2.3.4.4b分支H5N1亚型AIV同源性最高,且处于同一分支,推测该病毒为一株重组病毒。抗原性分析结果显示,该病毒与2.3.4.4分支H5-Re8、2.3.4.4b分支H5-Re14疫苗株抗原性相近。不同哺乳动物细胞系生长曲线结果显示,该病毒可在哺乳动物细胞系中有效复制,但其在A549中的复制效率高于其在MDCK及293T细胞中的复制效率。BALB/c小鼠感染实验结果显示,该病毒不经提前适应即可在小鼠的多脏器中有效复制,对小鼠的半数致死量(MLD50)为0.98log10EID50,对小鼠呈高致病性。本研究结果对H5亚型HPAI的综合防控和公共安全预警具有借鉴意义。

高致病性H5N1禽流感区域分布的时空分析

目的应用地理信息系统(GIS)分析高致病性H5N1禽流感疫情在区域范围内的时空分布,研究疾病的发生和发展规律。方法收集2003年3月—2012年3月世界卫生组织和世界动物卫生组织报告中确认的2 069起高致病性H5N1禽流感暴发事件,运用热点分析等基于GIS的空间分析方法对疫情进行时间和空间尺度的分析。结果 2003—2012年在越南、孟加拉和印度尼西亚3个地区共标记2 069起高致病性H5N1禽流感暴发事件,其中越南1 055起,孟加拉528起,印度尼西亚209起。疫情暴发的热点主要分布在越南的恒河三角洲、湄公河三角洲,孟加拉的达卡以及印度尼西亚的西爪哇省。疫情在三地的发生、发展及其空间分布的演变分别呈现不同的特征,疫情在越南地区呈现由两极向中部转移的演变过程,在孟加拉地区呈现辐射状发散的特征,在印度尼西亚则呈现逐步缩小的趋势。结论禽流感病毒从城市地区输入,主要通过家禽贸易运输发展扩散,并在农业发达、家禽密集的地区流行。热点识别技术在禽流感的监测、预警方面具有重要作用。

HA和NA匹配度对H5亚型高致病性禽流感假病毒影响的研究

为研究不同H5亚型高致病性禽流感病毒(H5 HPAIV)的HA和NA匹配度对流感假病毒组装和功能的影响,本研究将5株H5 HPAIV的HA和NA基因节段分别克隆于pCMV/R载体,构建3个HA和5个NA重组质粒,两两随机组合后将HA、NA质粒与pCMV/RΔ8.9质粒、p HR-CMV-Luc质粒构成4质粒系统,利用磷酸钙法将4个质粒转染HEK293T细胞,检测各细胞培养上清液血凝效价,结果显示:有3个上清液无血凝效价,其余12个上清液的血凝效价在100 HAU/m L~400 HAU/m L,表明获得12株具有血凝效价的流感假病毒。超速离心后获得浓缩假病毒,通过western blot检测假病毒HA蛋白的表达,结果显示各假病毒均在75 ku、50 ku和25 ku有特异性条带。利用各假病毒分别感染MDCK.1细胞60 h后裂解细胞,采用荧光素酶试验检测假病毒的相对荧光素酶活性(RLA),结果显示各假病毒RLA在5.0×10~1~4.5×10~5不等。上述结果首次表明不同H5 HPAIV的HA和NA相互匹配会对假病毒的血凝效价和相对荧光酶活性(RLA)造成影响。本研究为后续流感病毒灭活疫苗制备及抗病毒药物的研发奠定基础。

鸽H9N2亚型禽流感病毒的分离鉴定及致病性试验

H9N2亚型禽流感病毒属于A型流感病毒,目前H9N2亚型禽流感病毒不仅可以感染家禽,而且可以感染猪、猫等哺乳动物,甚至出现人类感染现象。因此,H9N2亚型流感病毒不仅影响畜禽的健康养殖,同时也具有一定的公共卫生学意义。近年来鸽群感染流感病毒时有报道,这其中包括H5N1、H7N9以及H9N2亚型禽流感病毒。虽然H9N2亚型禽流感毒株的致病性相对于H5和H7亚型较低,但是该亚型病毒在我国家禽中存在较为普遍,且目前从鸽子已分离到重组的H9N2毒株,该毒株不仅引起鸽子感染而且具有优先与人类呼吸道表面受体结合的能力,因此加强流感病毒在鸽群中流行情况具有重要的现实意义。

高致病性H5N1亚型人禽流感病毒性肺炎的影像学表现特点

目的探讨高致病性H5N1亚型人禽流感病毒性肺炎的影像学检查方法及胸部X线与CT影像表现特点。方法回顾性分析2006年6月深圳接诊的首例由卫生部确诊,并经过抢救治疗痊愈的高致病性H5N1亚型人禽流感病毒性肺炎患者的相关临床及影像学资料。结果胸部影像学特点是:①磨玻璃样影、大小片状影及肺实变影是人禽流感病毒性肺炎较早出现的影像表现;②病灶侵犯肺组织广泛,表现为多叶多段的两肺广泛受累;③病灶蔓延变化迅速;④肺实质、肺间质及胸膜受累可同时存在;⑤病灶吸收慢、迁延时间长,恢复期有肺纤维化的影像表现。结论影像学检查与诊断仍然是人禽流感病毒性肺炎的临床诊断、鉴别诊断、疗效评价及预后分析的重要手段。动态观察人禽流感病毒性肺炎的影像学变化及影像学表现特点,监测ARDS和肺部继发感染等并发症的发生,利于指导临床及时有效地进行治疗。

H5N1亚型高致病性禽流感病毒A/goose/Guangdong/1/96株反向基因操作系统的建立

A/goose/Guangdong/1/96(GSGD/1/96)是中国分离的第1株H5N1亚型禽流感病毒,它不仅是97香港感染并致人死亡的H5N1亚型流感病毒HA基因供体株,而且是中国目前已报到的H5亚型流感病毒分离株的共同祖先。本研究建立了该病毒的8质粒反向基因操作系统,并通过细胞转染成功拯救了该病毒(R-GSGD/1/96)。R-GSGD/1/96在对SPF鸡和Balb/c小鼠的致病性方面保持了与亲本野毒(W-GSGD/1/96)一致的生物学特性,即对鸡都是高致病性毒株,R-GSGD/1/96与W-GSGD/1/96的静脉致病指数分别为2.01和2.10;救获病毒与野生病毒一样,尽管106EID50经鼻腔感染小鼠后1～2d内能从肺脏检测到低滴度的病毒,但不能在小鼠体内成功复制。GSGD/1/96反向基因操作系统的成功建立为进一步开展中国高致病性禽流感病毒分离株的生物学特性、遗传衍化及结构与其功能关系研究奠定了基础。

一例人感染高致病性禽流感病毒(H5N1)的流行病学调查

目的通过对1例人感染高致病性禽流感病毒(H5N1)的调查分析,为制定人禽流感预防控制措施提供科学依据。方法采用流行病学调查、临床检查、血清学检查和 RT-PCR、 Real-time PCR 法进行分析和诊断。结果发现1例人感染高致病性禽流感病毒(H5N1),经救治无效因呼吸衰竭死亡。患者有明确的病、死禽接触史。采用隔离治疗、个人防护、医学观察、消毒等措施,疫情得到控制,未出现二代病例。结论需加强禽流感疫情监测,采取综合防控措施,预防疫情再次发生。

鸭H5N1型高致病性禽流感的病理组织学观察

对发生H5N1型高致病性禽流感鸭场的鸭进行了病理组织学观察。结果显示 ,该养鸭场患鸭禽流感病鸭的剖检变化以眼结膜潮红出血 ,心肌白色条纹状坏死、条带样出血 ,胰腺有白色或透明坏死点 ,胃肠出血等为特征。组织学以非化脓性脑炎、胰腺坏死、心肌坏死、坏死性脾炎的病理变化为主。

高致病性人禽流感H5N1疫苗滴鼻免疫应答效果的初步研究

目的通过高致病性人禽流感H5N1全病毒-MF59佐剂疫苗滴鼻免疫Balb/c小鼠,评价该疫苗所诱导的系统免疫与黏膜免疫应答效果。方法以不同剂量抗原按比例与MF59佐剂配伍制成粘膜疫苗,滴鼻免疫Balb/c小鼠,二免2周采血检测血清IgG、IgM效价及血清中HAI(HAinhibitor)的中和抗体效价,同时收集鼻、肺灌洗液,检测其IgG和sIgA抗体效价。结果H5N1+MF59组血清抗体效价较H5N1组有显著升高(P<0.01);在各剂量组中,随着剂量的增加抗体效价呈上升趋势,12μg后抗体效价呈下降趋势,以H5N1+MF59(12μg)组效价最高;肺鼻灌洗液中,均可检测到特异性分泌型IgA、IgG,其中特异性分泌型IgA效价略高于IgG;抗体亚型的分布以IgG1、IgG2b为主。结论灭活高致病性禽流感全病毒H5N1在佐剂MF59作用下可诱导机体产生体液免疫应答,同时还可以在黏膜局部产生特异性分泌型IgA、IgG,为高致病人禽流感病毒H5N1黏膜疫苗的研制奠定了基础。

高致病性禽流感病毒H5N1亚型核蛋白NP真核表达载体的构建、表达与鉴定

目的构建高致病性禽流感病毒H5N1亚型核蛋白(NP)的真核表达载体,并在哺乳动物细胞中表达、鉴定其编码重组蛋白NP。方法采用RT-PCR法扩增NP基因,T-A克隆到pMD18-T载体中构建pMD18-T-NP质粒。经PCR、双酶切鉴定后,双酶切阳性质粒与pXJ40-HA载体,电泳后胶回收,连接目的片段,构建pXJ40-HA-NP质粒,经PCR、双酶切、测序分析鉴定为阳性的质粒即为NP蛋白的真核表达载体。转染293T细胞后,采用免疫印迹法(Western blot)鉴定重组NP蛋白的表达。结果成功构建了高致病性禽流感病毒H5N1亚型NP基因的真核表达载体,并在293T细胞中成功表达出分子量为56kD的重组蛋白。结论成功构建的NP蛋白真核表达载体为进一步研究其功能,研发高致病性禽流感病毒H5N1亚型的诊断、治疗方法和疫苗奠定了基础。

应对高致病性禽流感病毒H5N1抗原漂移的通用疫苗策略

高致病性禽流感病毒(HPAIV)H5N1不仅能造成严重的病理损伤,而且能够跨越种间隔离从禽类直接传播给人类,对人类健康造成巨大的威胁。疫苗免疫是应对HPAIV H5N1最常用的防控手段。但由于流感病毒具有抗原漂移和抗原转变的能力,只针对特定流行株的常规疫苗不能够有效的应对毒株的不断变异。研制能够激发广泛保护作用的通用疫苗是应对HPAIV H5N1抗原漂移的一种有力措施,该类疫苗以流感病毒中高度保守的蛋白结构域,如M2蛋白胞外域(M2e)、HA蛋白的茎部结构域以及其他的保守抗原表位为免疫原,激发机体产生广泛的保护以应对不断变异的流感病毒。论文主要对现阶段通用疫苗的研究思路及进展做一梳理,以期能够为禽流感疫苗的研制提供有益的帮助。

H5N1高致病性禽流感病毒HA基因在昆虫细胞中的表达及免疫原性

用昆虫杆状病毒表达系统表达了高致病性禽流感H5N1 HA蛋白,经SDS-PAGE和Western blot检测,HA蛋白表达分子量约为70 ku;将HA蛋白制成油乳液,免疫BALB/c小鼠,免疫3次后,收集血清,以血凝抑制试验(HI)和血清IgG抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)评估体液免疫,酶联免疫斑点试验(ELISPOT)评估细胞免疫。试验结果表明:重组HA蛋白组和全病毒灭活疫苗组免疫小鼠后,血清中和抗体效价及ELISA IgG效价均显著高于PBS组,重组HA蛋白组和全病毒灭活疫苗组之间差异不显著。ELISPOT试验数据显示,重组HA蛋白组和全病毒灭活疫苗组小鼠脾单个核细胞分泌IFN-γ和IL-4细胞数量显著高于PBS组,而重组HA蛋白组和全病毒灭活疫苗组之间差异不显著。用昆虫杆状病毒表达系统表达H5N1 HA蛋白制成油乳液能诱导体液免疫和细胞免疫,能为预防高致病性禽流感H5N1候选疫苗的筛选提供依据。