富含蛋氨酸玉米醇溶蛋白在大肠杆菌中的表达

目的:克隆玉米中富含蛋氨酸的10kD玉米醇溶蛋白,证明植物源目的基因在大肠杆菌中能够表达。方法:从玉米胚乳中克隆高蛋氨酸基因zein,通过PCR扩增zein片段,连接pGEX-4T-1原核表达载体,转入大肠杆菌中,IPTG诱导后,HPLC测定蛋氨酸含量。结果:经PCR扩增出467bp条带,Blast分析同源性99%,经IPTG诱导进行SDS-PAGE检测,发现在36kD处出现一条明显的条带。诱导后菌体总蛋氨酸含量比正常菌体提高了9.6%。结论:证实了植物源10kD玉米醇溶蛋白在大肠杆菌中能够表达。