胰高血糖素样肽1受体激动剂治疗阿尔茨海默病的潜在靶点预测及验证

背景:阿尔茨海默病的机制探究过程中揭示了生物信息学对共同靶点筛选的重要作用,能够利用其筛选结果为基础,探究药物对该疾病的治疗效果。目的:采用生物信息学与分子生物学等方法预测胰高血糖素样肽1受体激动剂利拉鲁肽治疗阿尔茨海默病的作用靶点。方法:利用DisGeNET数据库及SEA数据库获取阿尔茨海默病和利拉鲁肽作用的共同基因;利用DAVID在线数据库对共同靶点进行GO/KEGG富集分析;使用STRING数据库构建蛋白互作网络;使用CCK-8判断利拉鲁肽的最佳使用剂量;使用免疫荧光和免疫印迹技术对关键蛋白的表达情况进行分析。采用小鼠海马神经元HT22细胞系进行体外实验,细胞被随机分为3组:HT22组、HT22+Aβ组和HT22+Aβ+Lir组。HT22组不做特殊处理,HT22+Aβ组使用Aβ1-42干预HT22细胞系24 h构建Aβ损伤细胞模型,HT22+Aβ+Lir组在HT22+Aβ组的基础上添加利拉鲁肽12 h。结果与结论:①从DisGeNET数据库筛选出阿尔茨海默病相关联的基因,共得到3333个关联基因。再从SEA数据库中,得到利拉鲁肽的潜在作用靶点147个。最后使用R包筛选出阿尔茨海默病与利拉鲁肽共同靶点64个。②用DAVID数据库进行共同靶点的GO/KEGG分析,结果提示共同靶点主要富集在:神经活性配体-受体相互作用、肾素-血管紧张素系统、膀胱癌、内肽酶活性、肽受体活性、G蛋白偶联肽受体活性和转运囊泡等生物进程。③将已经得到的64个共同靶点蛋白导入至SRTING在线数据库进行蛋白互作网络构建,得到排名前3位的基因为基质金属蛋白酶2,9和白细胞介素1β。④采用CCK-8试剂盒检测了培养细胞的活性,确定利拉鲁肽拮抗Aβ1-42的最佳浓度为100 nmol/L。⑤在免疫印迹实验与免疫荧光实验中,较HT22组相比,在HT22+Aβ组内基质金属蛋白酶2,9和白细胞介素1β表达量明显上升(P<0.05);HT22+Aβ+Lir组较HT22+Aβ组相比基质金属蛋白酶2,9和白细胞介素1β的表达量显著下降(P<0.05)。⑥结合上述生物信息学数据及在GEO数据库的差异基因二次验证结果提示,基质金属蛋白酶2,9和白细胞介素1β均可作为利拉鲁肽治疗阿尔茨海默病的潜在作用靶点。

胰高血糖素样肽1受体激动剂在药物成瘾中的作用研究进展

药物成瘾是全球性的重大医学生物学和社会问题,目前临床上尚缺乏理想的治疗药物。胰高血糖素样肽1(GLP-1)作为一种关键的肠脑肽,其受体激动剂目前已被批准用于治疗2型糖尿病和肥胖症。近年来,GLP-1受体(GLP-1R)激动剂在对抗药物成瘾中的作用受到越来越多的关注。本文将在概述GLP-1系统及GLP-1R激动剂的基础上,以成瘾性精神活性物质(包括酒精、烟草、可卡因、阿片类和苯丙胺类)为主线,从非临床和临床2个水平对GLP-1R激动剂在药物成瘾中的作用进行综述,同时展望其未来发展方向,以期为药物成瘾机制的阐明和治疗药物的研发提供新的线索。

胰高血糖素样肽1受体激动剂相关的消化系统不良反应综述

胰高血糖素样肽1受体激动剂(GLP-1RAs)近年来广泛应用于糖尿病和肥胖人群,同时也引起了一系列不良反应,其中最重要的是消化系统不良反应。GLP-1RAs相关的消化系统不良反应涉及胃肠道、胰腺和胆道,其中恶心、呕吐、便秘、腹泻发生率较高,是导致患者停药的主要原因。胰腺和胆道系统疾病的发病率较低,但尚无研究证据可排除其与GLP-1RAs的关联。替尔泊肽上市较晚,其安全性尚缺乏足够的真实世界数据。医护人员应对患者采用积极的饮食指导策略,并加强用药教育,以帮助患者积极预防、科学应对GLP-1RAs相关的消化系统不良反应的发生。

胰高血糖素样肽1受体激动剂治疗合并超重或肥胖的2型糖尿病的疗效和安全性的Meta分析

目的系统评价胰高血糖素样肽1受体激动剂(GLP-1RA)治疗合并超重或肥胖2型糖尿病(T2DM)患者的有效性与安全性。方法计算机检索PubMed、Embase、Cochrane Library、Ovid、ClinicalTrial.gov、SinoMed、CNKI、WanFang Data和VIP数据库,搜集有关GLP-1RA治疗T2DM合并超重或肥胖患者的随机对照试验(RCT),检索时限均从2005年1月1日至2023年11月1日。由2位研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,采用R软件进行Meta分析,并采用GRADE系统进行证据质量评价。结果共纳入71个RCT,包括29476例患者。Meta分析结果显示,相比于其他降糖药,GLP-1RA在改善糖化血红蛋白[WMD=-0.55,95%CI(-0.65,-0.45),P<0.001]、减重[WMD=-2.61,95%CI(-3.25,-1.97),P<0.001]方面均具有优势;GLP-1RA对空腹血糖的改善效果呈时间依赖性[16周以内:WMD=0.25,95%CI(-0.17,0.66),P=0.250;16~52周:WMD=-0.06,95%CI(-0.32,0.20),P=0.650;>52~104周:WMD=-1.67,95%CI(-1.91,-1.43),P<0.001];安全性方面,GLP-1RA的总体不良反应发生率较高[RR=1.11,95%CI(1.07,1.15),P<0.001];但低血糖发生率低于胰岛素[RR=0.58,95%CI(0.48,0.71),P<0.001],而与口服降糖药的差异无统计学意义[RR=0.83,95%CI(0.58,1.19),P=0.310]。GRADE系统评价显示,仅低血糖发生率的证据等级为中等,其余结局指标的证据水平均为低级。结论当前证据显示,对于T2DM合并肥胖或超重患者,GLP-1RA尤其是司美格鲁肽相比于安慰剂、胰岛素或口服降糖药,能更有效兼顾降糖和减重,虽总体不良反应较多,但可减少低血糖发生。

基于Markov模型的胰高血糖素样肽1受体激动剂联合二甲双胍治疗2型糖尿病药物经济学评价

目的 对胰高血糖素样肽1受体激动剂(GLP-1RA)联合二甲双胍治疗2型糖尿病(T2DM)进行经济学评价。方法 从我国卫生体系角度出发,基于7项GLP-1RA联合二甲双胍治疗T2DM的随机对照试验(RCT),构建二甲双胍单药或联合GLP-1RA治疗T2DM的Markov模型,模拟治疗期间T2DM无并发症、T2DM伴并发症以及死亡3种状态的动态变化。模型以质量调整生命年(QALYs)为健康产出指标、以3倍我国2023年人均国内生产总值(GDP)为意愿支付(WTP)阈值。模型循环周期设定为1年,共计模拟20年,采用Markov模型进行队列模拟,以增量成本-效用比(ICUR)为评价指标,从而获得每种治疗策略的长期成本、效用及其经济性。通过对成本、效用及贴现的敏感性分析,检验研究结果的稳定性。结果 与二甲双胍单药治疗相比,5种GLP-1RA类药物(利拉鲁肽、度拉糖肽、艾塞那肽、聚乙二醇洛塞那肽、司美格鲁肽)联合二甲双胍治疗方案的ICUR均小于3倍我国2023年人均GDP,增加的成本可接受。敏感性分析中各参数在设定的范围内变化,或将模拟时间延长至30年或50年,对研究结论无显著影响;概率敏感性分析结果表明,WTP阈值为3倍我国2023年人均GDP值(268 074元)时,二甲双胍联合司美格鲁肽0.5 mg方案具有成本-效用优势的概率最高,约为99.7%。结论 对于T2DM患者,相比于二甲双胍单药治疗,利拉鲁肽、度拉糖肽、艾塞那肽、聚乙二醇洛塞那肽、司美格鲁肽以说明书推荐剂量联合二甲双胍治疗方案均属于优势方案,具有经济性。

胰高血糖素样肽1受体激动剂治疗代谢功能障碍相关脂肪性肝病研究进展

代谢功能障碍相关脂肪性肝病(metabolic dysfunction associated steatotic liver disease,MASLD)与胰岛素抵抗等代谢功能障碍相关,已成为全球最常见的肝脏疾病。在过去40年中,未有任何药物获得美国食品药品监督管理局批准,但近期瑞美替罗正式获批上市,打破了这一领域的空白。MASLD发病机制复杂,包括糖脂代谢紊乱、胰岛素抵抗、炎症反应、肠道菌群、遗传易感等各方面。胰高血糖素样肽-1 (glucagon-like peptide-1,GLP-1)类药物在临床中主要用于治疗糖尿病,大量研究证明,GLP-1受体激动剂(glucagon-like peptide-1 receptor agonists,GLP-1RA)能促进脂肪酸氧化、改善胰岛素抵抗并且抑制炎症发生,因此该类药物在治疗MASLD中也具有极大潜力。本文主要就MASLD发病机制,GLP-1RA改善MASLD的机制和药物研究进展进行综述。

胰高血糖素样肽1受体激动剂作用机制及其临床应用进展

胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂是一种新型的降糖药物,既可在不引起低血糖的情况下,有效控制血糖水平;又可通过增加饱腹感、延缓胃排空、抑制食欲及减少脂肪堆积等,有效减轻体质量,达到减肥的目的。目前,以GLP-1受体激动剂为基础的药物利拉鲁肽、艾塞那肽等已经应用于肥胖的2型糖尿病患者以及单纯肥胖或超重患者,均显示出明显地减轻体质量作用;但常伴有恶心、呕吐等胃肠道不良反应,随着用药时间的延长,症状逐渐减轻,患者能耐受。

胰高血糖素样肽1类药物在2型糖尿病治疗中的应用

2型糖尿病(T2DM)的治疗目标是良好控制血糖,同时尽最大努力减少其相关的大血管和微血管并发症。新近出现的胰高血糖素样肽1(GLP-1)类药物主要有两大类,即GLP-1类似物和二肽基肽酶4(DPP-4)抑制剂。作为新型降糖药,此类药物集多效于一身,不仅保留了GLP-1的降糖、β细胞保护等多种生理作用,而且具备低血糖风险低,安全性好等特点,还能全面干预减轻体质量、降血压、调血脂等,较胰岛素、双胍类、磺酰脲类等常规治疗药物有明显优势。

胰高血糖素样肽1受体激动剂对糖尿病以外疾病的临床应用

胰高血糖素样肽1(GLP-1)是由肠L细胞分泌的一种具有葡萄糖依赖性促胰岛素分泌功能的肠促胰素,近年来因其通过促进β细胞增殖与分化、抑制β细胞凋亡、抑制胰高血糖素分泌、抑制胃肠蠕动等方式实现血糖调节效应而成为2型糖尿病发病机制及药物治疗的研究热点。GLP-1受体不仅表达于胰腺,也广泛表达于胰腺外组织,包括胃肠道、心血管系统、中枢神经系统、肺、肾、骨骼、皮肤等,故GLP-1受体激动剂作为基于GLP-1的治疗方法对糖尿病以外疾病的治疗也有越来越多的研究。

乳杆菌对肠内分泌细胞胰高血糖素样肽1分泌的影响

胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide 1,GLP-1)是一种由肠道内分泌细胞产生的具有血糖调节作用的肠促胰岛素激素,肠道内乳杆菌(Lactobacillus)可能影响其分泌。该研究采用简单易操作的体细胞(有氧)-黏液层-细菌(微需氧)共培养体系分析3种乳杆菌[鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)、植物乳杆菌(L.plantarum)和约翰氏乳杆菌(L.johnsonii)]对肠道内分泌细胞GLP-1分泌的影响。同时研究了菌株的剂量效应以及O 2和黏液层对共培养系统的影响。结果显示,1×10^(9)、1×10^(8)、1×10^(7)CFU/1000 mL的L.rhamnosus可增加细胞GLP-1的分泌。低浓度的L.plantarum和L.johnsonii(<1×10^(7)CFU/1000 mL)不影响细胞GLP-1产生,但在浓度高于1×10^(8)CFU/1000 mL时则会显著降低(P<0.05)GLP-1的分泌。黏液层是存在于肠道细胞与微生物间的重要屏障,黏液层缺失会显著降低(P<0.05)共培养体系中细胞GLP-1分泌。但O 2对不同细菌的共培养体系的影响存在差异,当与L.rhamnosus和L.plantarum共培养时,有限的O 2条件对细胞的GLP-1分泌没有影响,但当与L.johnsonii共培养时则会显著降低(P<0.05)GLP-1的分泌。该研究采用设备要求低、操作简单的共培养体系模拟体内环境,确定了黏液层在共培养体系中的重要性;证实了L.rhamnosus可促进肠道内分泌细胞GLP-1的分泌;同时发现不同乳杆菌菌株对GLP-1的影响不同,并存在剂量效应。研究将为阐释益生菌与体细胞互作提供新的方法参考,为乳杆菌调节GLP-1代谢提供科学依据。

维格列汀通过上调胰高血糖素样肽1发挥抗癫痫作用

目的探讨维格列汀对戊四氮(PTZ)诱导的癫痫模型中胰高血糖素样肽1(GLP-1)及胰高血糖素样肽1受体(GLP-1R)的影响而发挥抗癫痫作用。方法脑外伤患者切除的皮质为对照组(control;n=14),颞叶癫痫(TLE)患者行癫痫灶切除的皮质为颞叶癫痫组(n=23)。90只SD雄性大鼠随机分为对照组(A组,control)、PTZ单纯致痫组(B组,PTZ-induced epilepsy)、生理盐水2 m L/kg干预组(C组,PTZ+2 m L/kg saline)、维格列汀2.5 mg/kg干预组(D组,PTZ+2.5 mg/kg vildagliptin)、维格列汀5 mg/kg干预组(E组,PTZ+5 mg/kg vildagliptin)、维格列汀10 mg/kg干预组(F组,PTZ+10 mg/kg vildagliptin)。连续腹腔注射PTZ(35 mg/kg)3周建立慢性癫痫模型,观察大鼠行为学。运用Western blotting、免疫组织化学染色检测各组GLP-1R的表达变化,运用酶联免疫吸附检测各组血清中GLP-1的表达变化,采用免疫荧光染色和ELISA对GLP-1R进行定位。结果免疫荧光染色结果显示,GLP-1R主要表达于人体脑组织以及大鼠脑组织的神经元;免疫组织化学染色和Western blotting结果显示GLP-1R在癫痫患者以及癫痫模型中表达降低(P<0.05);在大鼠中,维格列汀可以有效的延长癫痫发作的潜伏期和降低癫痫发作次数;维格列汀干预后,GLP-1R的表达升高(P<0.05)。ELISA结果显示GLP-1与GLP-1R的表达变化一致(P<0.05)。结论维格列汀通过上调GLP-1和GLP-1R发挥抗癫痫作用。

胰高血糖素样肽1影响动脉粥样硬化的研究进展

胰高血糖素样肽1(GLP-1)是一种新型治疗2型糖尿病肠促胰液素,它可以在进食后血糖升高而刺激肠道分泌进而控制血糖。越来越多的研究表明,GLP-1可直接作用于心血管系统,例如可以影响内皮功能、炎症反应、血压、血脂代谢等。本文将对GLP-1类药物包括GLP-1类似物和二肽激肽酶4抑制剂影响动脉粥样硬化以及其潜在的机制进行综述。

早期2型糖尿病患者血浆生长抑素、胰高血糖素样肽1和胰升糖素水平的变化

目的观察早期2型糖尿病患者血浆生长抑素、胰高血糖素样肽1(GLP-1)和胰升糖素的动态变化。方法以早期糖尿病患者(糖尿病组,n=49)和健康对照者(对照组,n=21)作为研究对象。采用口服葡萄糖耐量试验(OGTT),分别于空腹和糖负荷后2 h,测定血浆生长抑素、GLP-1和胰升糖素水平,计算上升率并分析相关性。结果糖尿病组空腹和糖负荷后2 h的血浆生长抑素和GLP-1水平及空腹胰升糖素水平均显著低于对照组(P<0.05),且两组糖负荷后2 h的测定值均高于空腹值;糖尿病组血浆胰升糖素水平和生长抑素的上升率显著高于对照组(P<0.05),两组间血浆GLP-1水平的上升率比较差异无统计学意义(P>0.05)。糖尿病组血浆生长抑素水平的上升率与血浆GLP-1水平的上升率呈正相关(r=0.367,P=0.015)。结论生长抑素对GLP-1抑制减少可能是早期2型糖尿病患者的一种代偿反应;在2型糖尿病早期胰升糖素已有不适当的分泌增多,相比GLP-1,血糖和胰岛素在其中的作用更为重要。

基因多态性与胰高血糖素样肽1受体激动剂疗效的相关性研究进展

目的:了解基因多态性与胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂疗效的相关性,为GLP-1受体激动剂疗效相关基因多态性的研究和临床个体化用药提供参考。方法:以"胰高血糖素样肽1受体激动剂""基因多态性""艾塞那肽""利拉鲁肽""液泡蛋白分选受体1""大麻素受体1""GLP-1受体""Glucagon-like peptide-1 receptor agonist""Exenatide""Liraglutide""SORCS1""Cannabinoid type 1 receptor""GLP-1 receptor""Genetic polymorphism""Type 2 diabetes""Insulin resistance"等为中英文关键词,在中国知网、万方、维普、Pub Med、Springer Link等数据库中组合查询1991年1月-2019年3月发表的相关文献,对GLP-1受体激动剂相关的遗传因素和基因多态性的研究进展进行总结。结果与结论:共检索到相关文献307篇,其中有效文献33篇。GLP-1受体激动剂与液泡蛋白分选受体1(SORCS1)基因、GLP-1受体(GLP-1R)基因和大麻素受体1(CNR1)基因相关。目前研究表明,基因多态性与GLP-1受体激动剂改善胰岛功能、改善胰岛素抵抗和控制体质量效果相关。但此类研究多为小样本研究,需要更大的样本来确认SORCS1、GLP-1R、CNR1基因多态性与GLP-1受体激动剂疗效的关系,且其他GLP-1受体激动剂(如利司那肽、阿必鲁泰、度拉鲁肽和索玛鲁肽等)和已发现的基因位点多态性的相关性还未知,而与GLP-1受体激动剂疗效相关的新的基因位点还未发现,这可为今后开展相关研究提供方向。

胰高血糖素样肽1受体激动剂类降糖药致2型糖尿病患者鼻咽炎和上呼吸道感染的网状meta分析

目的：使用网状meta分析系统评价胰高血糖素样肽1受体激动剂（glucagon-like peptide-1 receptor agonists,GLP-1 RAs）类降糖药对两种常见的呼吸系统不良事件（respiratory system adverse event,RSAE,包括鼻咽炎和上呼吸道感染）的影响。方法：系统检索Medline、Embase、Clinical trials和Cochrane数据库中（截止2015年5月）比较GLP-1 RAs与传统降糖药或安慰剂对鼻咽炎和上呼吸道感染发生风险影响的随机对照研究,采用网状meta分析方法对纳入的研究结果进行加权合并。结果：共纳入50个研究,包括13种干预措施：7种GLP-1 RAs类药（艾塞那肽、艾塞那肽缓释剂、利拉鲁肽、利西拉来、他司鲁肽、阿必鲁肽、杜拉鲁肽）、5种传统降糖药（胰岛素、二甲双胍、磺脲类、西格列汀、噻唑烷二酮类）和安慰剂。网状meta分析结果显示,与胰岛素相比,他司鲁肽显著降低了鼻咽炎（OR=0.67,95%CI：0.46-0.96）和上呼吸道感染（OR=0.39,95%CI：0.23-0.73）的发生风险;与安慰剂相比,他司鲁肽显著降低了上呼吸道感染（OR=0.57,95%CI：0.34-0.99）的发生风险。此外,基于贝叶斯理论的网状meta分析显示,鼻咽炎和上呼吸道感染发生风险排最末位的均为他司鲁肽。结论：他司鲁肽显著降低了鼻咽炎和上呼吸道感染的发生风险,但仍有待专门针对RSAE设计的大型前瞻性研究加以验证。

利用转基因烟草表达人胰高血糖素样肽1的研究

人胰高血糖素样肽1(hGLP1)是一种短肽激素,是近年来备受关注的治疗糖尿病最有前景的候选药物。在设计合成hGLP1基因并构建植物表达载体的基础上,通过农杆菌介导将hGLP1基因导入烟草基因组中,获得转化再生植株,经过PCR扩增和Southern blot分析,证实hGLP1基因已整合进入6个株系的烟草基因组中。GUS组织化学染色表明,与目的基因融合的报告基因在转基因烟草中获得表达。Western blot检测表明,其中2个株系转基因烟草叶片中能够检测到hGLP1融合蛋白的表达。初步的动物试验表明该融合蛋白具有一定的降血糖生物活性。

胰高血糖素样肽1类似物对伴超重或肥胖初发2型糖尿病患者的疗效

目的 评价胰高血糖素样肽1（GLP-1）类似物利拉鲁肽对于伴超重或肥胖初发2型糖尿病患者的疗效。方法 选取2011年12月至2016年10月解放军第三〇五医院的初发2型糖尿病患者60例（体重指数≥23 kg/m2），完全随机分为对照组和观察组，各30例。对照组服用二甲双胍，观察组在对照组基础上加用利拉鲁肽注射液，连续治疗24周。比较2组治疗前及治疗24周后的体重指数、空腹血糖、糖化血红蛋白、总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇以及胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。结果 治疗24周后，对照组体重指数、空腹血糖、糖化血红蛋白、三酰甘油、HOMA-IR均较治疗前明显下降［（25.4±2.3）kg/m2比（27.3±3.2）kg/m^2、（9.3±2.8）mmol/L比（10.4±3.7）mmol/L、（7.3±0.6）%比（8.1±0.9）%、（2.0±0.6）mmol/L比（2.6±0.7）mmol/L、（10±4）比（12±5）］（均P＜0.05）；观察组体重指数、空腹血糖、糖化血红蛋白、总胆固醇、三酰甘油、LDL-C、HOMA-IR均较治疗前明显下降［（23.3±2.1）kg/m^2比（26.9±3.7）kg/m^2、（7.1±0.9）mmol/L比（10.1±1.2）mmol/L、（6.5±0.6）%比（8.3±1.3）%、（4.21±0.22）mmol/L比（5.60±0.55）mmol/L、（1.9±0.3）mmol/L比（2.5±0.5）mmol/L、（2.5±0.7）mmol/L比（3.0±0.8）mmol/L、（8±3）比（11±5）］（P＜0.05）；观察组体重指数、空腹血糖、糖化血红蛋白、总胆固醇、HOMA-IR明显低于对照组（均P＜0.05）。结论 利拉鲁肽联合二甲双胍治疗伴肥胖初发2型糖尿病能更好地控制血糖和血脂水平，改善胰岛素敏感度，减轻体质量。

胰高血糖素样肽1受体激动的高通量筛选及作用机制研究

目的筛选胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂,并进行初步的作用机制研究。方法建立稳定的GLP-1受体激动剂高通量筛选模型,从天然药物中筛选活性成分;在PC12细胞中验证GLP-1受体激动剂的功能及作用机制。结果经过筛选、鉴定,京尼平苷是一种新的GLP-1受体激动剂,能够通过MAPK信号通路诱导PC12细胞分化,对抗过氧化氢诱导的PC12细胞氧化损伤,提高神经细胞活力。结论京尼平苷具有与GLP-1受体激动剂类似的神经营养和神经保护功能。

胰高血糖素样肽1对内皮祖细胞增殖分化能力的影响及其机制

目的:探讨胰高血糖素样肽1(GLP-1)对体外培养的人外周血内皮祖细胞(EPCs)增殖分化能力的影响及可能的作用机制。方法:采用密度梯度离心法分离获得人外周血单个核细胞,培养7d后,收集贴壁细胞。贴壁细胞用不含FBS的M199培养液培养24h后,分成4组:对照组和GLP-1各浓度组(1,10,20nmol/L GLP-1共3组),分别用含0.2%BSA,1,10,20nmol/L GLP-1的M199培养液培养72h。倒置相差显微镜下观察EPCs生长情况,MTT法检测EPCs的增殖能力;RT-PCR技术检测EPCs中KDR,Flt-1,VE-cadherin,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达,ELISA法测定细胞上清液内皮细胞生长因子(VEGF)浓度,SP法检测细胞VEGF蛋白表达。同时用100ng/m LVEGF mAb对10nmol/LGLP-1培养的EPCs进行干预。结果:与对照组比较,GLP-1各浓度组EPCs增殖明显(P<0.05或P<0.01),EPCs中KDR,Flt-1,VE-cadherin,eNOS mRNA表达增强,细胞上清液中VEGF浓度显著升高、细胞VEGF蛋白表达增强(P<0.05或P<0.01)。VEGF mAb(100ng/mL)下调GLP-1培养的EPCs增殖能力,细胞KDR,Flt-1,VE-cadherin,eNOS mRNA表达下降。结论:GLP-1对体外培养的人外周血EPCs的增殖和分化能力具有一定的促进作用,上调VEGF自分泌是其可能的作用机制之一。

胰高血糖素样肽1对2型糖尿病合并阿尔茨海默病大鼠学习记忆功能的影响

目的观察胰高血糖素样肽1(GLP-1)对2型糖尿病(T_2DM)合并阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆功能的影响。方法 60只SD大鼠完全随机分为正常对照组、T_2DM组、AD组、T_2DM+AD组,各15只。T_2DM组、AD组和T_2DM+AD组分别制备T_2DM模型、AD模型和T_2DM+AD模型,模型制备成功后皮下注射GLP-1类似物利拉鲁肽注射液300μg/(kg·d),连用4周;正常对照组给予等体积0.9%氯化钠注射液皮下注射4周。比较干预前后大鼠体质量、空腹血糖及Morris水迷宫实验评价状况。结果干预前,与正常对照组比较,T_2DM组和T_2DM+AD组空腹血糖明显高,且T_2DM+AD组高于T_2DM组,差异均有统计学意义(均P <0. 05);干预后,T_2DM组和T_2DM+AD组空腹血糖较干预前明显下降,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。干预前,与正常对照组比较,AD组和T_2DM+AD组逃避潜伏期明显延长[(105±12)、(114±14)s比(53±5)s],且T_2DM+AD组长于AD组,差异均有统计学意义(均P <0.05);干预后,AD组和T_2DM+AD组逃避潜伏期[(67±7)、(69±8)s]较干预前缩短,差异均有统计学意义(均P<0. 05)。干预前,与正常对照组比较,AD组和T_2DM+AD组第四象限游泳路程缩短,且T_2DM+AD组短于AD组,差异均有统计学意义(均P <0. 05);干预后,AD组和T_2DM+AD组第四象限游泳路程较干预前延长,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。干预前,与正常对照组比较,AD组和T_2DM+AD组穿越平台次数减少,且T_2DM+AD组少于AD组,差异均有统计学意义(均P <0. 05);干预后,AD组和T_2DM+AD组穿越平台次数较干预前增多,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 GLP-1对降低T_2DM鼠的血糖水平及改善AD鼠的学习记忆能力均有作用,在T_2DM合并AD的治疗领域可能有较大潜力。