垂体瘤转化基因在垂体大腺瘤中的表达及其与肿瘤侵袭性的关系

目的研究垂体瘤转化基因(PTTG)在垂体大腺瘤中的表达,探讨其与肿瘤侵袭性的关系。方法收集手术和病理证实的垂体大腺瘤40例,其中无功能腺瘤22例,生长激素腺瘤8例,泌乳素腺瘤10例。用免疫组化技术检测垂体大腺瘤中PTTG表达。结合影像资料,分析PTTG的表达与大腺瘤侵袭性生物学行为的关系。结果40例垂体大腺瘤中均发现PTTG的表达升高,PTTG在侵袭性垂体大腺瘤中的表达显著高于非侵袭性垂体大腺瘤(P<0.01)。结论PTTG的表达与垂体大腺瘤侵袭性的生物学行为有关,其表达程度可用作垂体大腺瘤预后的评估指标,为大腺瘤术后复发以及相应的辅助治疗提供判断依据。

垂体瘤转化基因表达与肿瘤关系研究进展(文献综述)

垂体瘤转化基因 (PTTG)是新近发现的一种肿瘤转化基因 ,其在多种正常增生性组织中有表达 ,在多种恶性肿瘤组织中呈现高表达。通过体内、体外试验均证实PTTG在促进细胞转化及肿瘤形成中起着重要作用 。

新型HMW-GS基因1Dy12.1^(*t)植物双元表达载体的构建及其遗传转化

为了建立快速研究高分子量谷蛋白亚基(high molecular weightglutenin subunit,HMW-GS)基因功能活性的植物表达体系,以自主克隆的新型HMW-GS基因1Dy12.1*t为目的基因,利用限制性内切酶XhoⅠ和SalⅠ切割后5’端能形成相同粘性末端的特性,成功构建了1Dy12.1*t的植物双元表达载体pBINHP-GluT。该载体选择使用胚乳特异性强启动子,利用已知HMW-GS基因内部均不含有的XbaⅠ和KpnⅠ内切酶位点引入1Dy12.1*t编码区,并将1Dy12.1*t的表达调控置于T-DNA区内,从而奠定了其在不同HMW-GS基因功能活性研究上的便利性。通过根癌农杆菌烟草叶盘转化研究目的基因1Dy12.1*t在植物体的表达特性,SDS-PAGE和western blotting鉴定结果表明,1Dy12.1*t在转基因烟草种子胚乳中得到高效表达,进一步证实了所克隆基因的正确性和所构建载体的有效性。

甘蔗细胞壁转化酶基因(SoCIN1)克隆及其在转基因烟草中的表达特性分析

【目的】克隆甘蔗细胞壁转化酶基因(So CIN1)并分析其在转基因烟草植株中的表达特性,为研究CIN1基因功能提供参考。【方法】克隆So CIN1基因,利用基因重组技术构建植物正义表达载体p BI121-So CIN1,采用叶盘法经农杆菌EHA105介导将其转化烟草品种K346。经抗性筛选和PCR扩增验证后获得转So CIN1基因烟草植株,采用半定量PCR检测叶片So CIN1基因的表达量,并测定叶片可溶性糖含量、CIN活性及株高(以野生型烟草为对照)。【结果】克隆获得的So CIN1基因长度为1731 bp,与Gen Bank已公布的So CIN1基因(JQ312298)核苷酸序列同源性达100%,并通过构建其植物正义表达载体转化烟草。PCR扩增鉴定结果表明,So CIN1基因已整合至烟草基因组DNA。对F0和F1代进行转基因烟草连续筛选,获得4个转So CIN1基因烟草株系(T-1、T-2、T-3和T-4)。在4个株系的叶片中均检测到So CIN1基因的表达,其中以在T-1株系叶片中So CIN1基因表达量最高,其次是T-3株系,最低的是T-4株系。4个株系叶片的可溶性糖含量、CIN活性及株高均高于野生型烟草,其中CIN活性显著高于野生型烟草(P<0.05,下同),且T-1株系CIN活性高于其他3株系;T-1、T-2和T-3株系叶片可溶性糖含量分别显著高于野生型烟草39.68%、19.95%和31.15%;T-1、T-2、T-3和T-4株系的株高较野生型烟草分别提高了15.57%、2.90%、5.74%和5.22%,但仅T-1株系与野生型烟草存在极显著差异(P<0.01)。【结论】转So CIN1基因烟草叶片过表达So CIN1基因,能提高烟草的CIN活性和可溶性糖含量,促进植株生长,由此推测该基因在甘蔗生长发育和蔗糖积累过程发挥作用。

己酮可可碱对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏基因表达谱的影响

背景:己酮可可碱(PTX)可减轻高脂饮食大鼠脂肪性肝炎和肝纤维化的程度,但其作用机制尚未明确。目的:探讨PTX对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝脏基因表达谱的影响。方法:24只Sprague-Dawley大鼠在高脂饮食4周后随机分为模型组(n=12)和PTX干预组(n=12,PTX每天100mg/kg),并继续予高脂饮食;6只普通饮食饲养大鼠作为对照组。于实验第24周处死大鼠,应用含15650条基因的大鼠U230A芯片检测肝脏基因表达的改变。结果:与模型组相比,PTX干预组共出现370条差异表达基因,其中模型组较对照组上调而PTX干预后下调的基因57条,主要包括炎症/免疫反应相关基因、细胞信号转导相关基因、细胞外基质和细胞黏附分子基因、代谢酶和生物转化相关基因、离子通道/运输蛋白基因等;模型组较对照组下调而PTX干预后上调的基因25条,其功能涉及细胞信号转导、脂质代谢、生物转化等。结论:PTX可能通过影响NASH大鼠肝脏多种结构和功能基因的表达而有助于NASH和肝纤维化的防治。

PTTG1基因上调表达对A549细胞增殖和凋亡的影响

目的研究人垂体瘤转化基因1(hum an p itu itary tumor transform ing gene 1,PTTG1)上调表达对肺腺癌细胞株(A549)增殖和凋亡的影响。方法构建含PTTG1基因的真核表达载体,脂质体法转染A549细胞并用G418筛选出高表达的阳性克隆株,实时荧光定量PCR(real-tim e fluorescent quantitation PCR)和免疫细胞化学(immunocytochem ical assay,ICA)分别检测PTTG1 mRNA及蛋白表达的改变,3H胸腺嘧啶核甙(3H-TdR)掺入法检测细胞增殖活性,AnnexinⅤ异硫氢酸荧光素(FITC)试剂盒检测凋亡情况。结果成功构建含PTTG1基因的真核表达载体,获得上调表达PTTG1的A549细胞,转染含PTTG1基因重组质粒的A549细胞增殖活性较未转染组细胞及转染空白质粒组细胞均显著增强(P<0.05);3组细胞间的凋亡率无显著差异。结论PTTG1基因能显著促进A549细胞的增殖,而对细胞凋亡没有影响。

PTTG基因在非霍奇金淋巴瘤患者中表达的研究

目的研究垂体瘤转化基因(pituitary tumor-transforming gene,PTTG)在淋巴瘤患者中的表达,探讨其与淋巴瘤发生的关系及临床意义。方法采用RT-PCR方法检测32例非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's Lymphoma,NHL)及10例慢性淋巴结炎患者骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cell,BMMNC)中PTTG基因的表达。结果 32例NHL患者有18例(56.3%)存在PTTG基因的表达,其中外周T细胞淋巴瘤有55.6%(5/9例)、弥漫大B细胞淋巴瘤有56.5%(13/23例)。NHL患者PTTG基因的表达水平明显高于慢性淋巴结炎患者(P<0.05),外周T细胞淋巴瘤和弥漫大B细胞淋巴瘤患者PTTG基因的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PTTG基因的过度表达可能和淋巴瘤的发生发展有关。

垂体瘤转化基因的表达及其与肿瘤侵袭性的关系

目的 拟对垂体瘤转化基因 (pituitarytumor transforminggenePTTG)及与之密切相关的碱性成纤维生长因子 (bFGF)在垂体瘤中的表达进行研究 ,并探讨其可能的临床意义。方法 取垂体腺瘤组织 30例 ,4例正常垂体。从组织中提取总RNA ,经RT PCR方法扩增PTTGmRNA ,采用免疫组化方法测定bFGF、增殖细胞核抗原 (PCNA)及微血管密度 (MVD) ,分析各指标和临床特征的关系。结果 侵袭和非侵袭组的PTTGmRNA、PCNA、bFGF及MVD相比均有显著差异性。bFGF和MVD、PC NA、PTTGmRNA之间存在显著正相关。结论 PTTG参与垂体瘤的早期发生。bFGF则对血管形成 ,肿瘤增殖有明显作用 ,二者均和肿瘤的侵袭性密切相关。PTTG→bFGF→肿瘤增殖可能为垂体瘤发生、发展的重要机理。

垂体瘤转化基因、FGF-2在垂体大腺瘤中的表达及其临床意义

目的:探讨垂体大腺瘤中PTTG和FGF 2的表达与肿瘤生物学行为的关系。方法:用免疫组化技术(LSAB法)分别检测垂体大腺瘤(4 0例)和垂体微腺瘤(11例)中PTTG和FGF 2的表达。结合临床影像分级资料,分析PTTG和FGF 2的表达与大腺瘤生物学行为的关系及临床意义。结果:40例垂体大腺瘤中均发现PTTG和FGF 2的表达增高,两者的表达水平均高于其在垂体微腺瘤中的表达(t=3 .845 ,P <0 .0 1;t =4.3 81,P <0 .0 1)。PTTG和FGF 2在垂体大腺瘤中的表达水平显著相关(r =0 .64 0 ,P <0 .0 1)。PTTG的表达与大腺瘤侵袭性生长的程度显著相关(P <0 .0 5 )。结论:PTTG上调FGF 2的表达机制在促进垂体大腺瘤的生长过程中发挥了重要的作用,并有可能为临床预后的评估提供可靠的依据。

垂体瘤转化基因和p53在骨肉瘤中的表达及其意义

为观察垂体瘤转化基因（PTTG）和p53在骨肉瘤中的表达情况，笔者对42例骨肉瘤和15例骨软骨瘤组织中PTTG和p53蛋白的表达进行检测，现将结果报告如下。

垂体瘤转化基因和结肠癌转移相关因子1在视网膜母细胞瘤中的表达及意义

目的分析垂体瘤转化基因(PTTG)和结肠癌转移相关因子1(MACC1)在视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)中的表达与RB临床病理特征的关系。方法采用免疫组化方法检测PTTG和MACC1在42例RB肿瘤组织和正常视网膜组织中的表达,分析二者在不同临床特征和高危病理特征RB中的表达特征与关系。结果 PTTG在RB组织中表达丰富,但在正常视网膜中几乎不表达,二者差异有统计意义(χ~2=27.68,P<0.05);MACC1在RB组织和正常视网膜中都有表达,二者在表达程度上差异有统计意义(χ~2=9.62,P<0.05);PTTG在未分化型和分化型、脉络膜受侵和未受侵、视神经受侵和未受侵RB组织中的表达差异均有统计意义(χ~2=6.17,χ~2=6.99,χ~2=9.70,P<0.05);MACC1在未分化型和分化型、脉络膜受侵和未受侵RB组织中的表达差异无统计意义(χ~2=0.48,χ~2=2.10,P>0.05),但在视神经受侵和未受侵RB组织中的表达差异有统计意义(χ~2=8.52,P<0.05);PTTG和MACC1在不同性别、年龄之间的表达差异无统计意义(P>0.05);PTTG和MACC1在RB组织内的表达无显著相关性。结论 PTTG和MACC1在RB组织中高表达,而且表达水平与RB分化程度、扩散转移等高危病理特征密切相关,提示PTTG和MACC1在RB的发生、发展中具有一定作用,对于预测RB浸润和转移有重要价值。

非霍奇金淋巴瘤患者骨髓垂体瘤转化基因、c-myc基因表达的研究

目的 探讨非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者骨髓垂体瘤转化基因（PTTG）与c-myc基因的表达及其临床意义.方法 采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测38例NHL患者骨髓及10例慢性淋巴结炎患者骨髓单个核细胞（BMMNC）中PTTG及c-myc基因的表达.结果 NHL患者骨髓中PTTG和c-myc基因的表达水平均明显高于慢性淋巴结炎组,差异有统计学意义（PTTG：0.567 7±0.270 7比0.071 2±0.020 1,t=4.706,P＜0.05; c-myc：0.352 6±0.185 4比0.107 3±0.043 5,t=3.303,P=0.002）.外周T细胞淋巴瘤和弥漫大B细胞淋巴瘤患者PTTG及c-myc基因表达水平差异均无统计学意义（PTTG：0.556 8±0.211 3比0.602 8±0.244 6,t=0.640,P=0.527;c-myc：0.350 1±0.177 6比0.361 0±0.190 2,t=0.302,P=0.765）.PTTG基因的表达与NHL骨髓浸润、国际预后指数（IPI）评分呈正相关（r=0.422,r=0.387;均P＜0.05）.c-myc基因的表达与NHL骨髓浸润、IPI评分呈正相关（r=0.431,r=0.344,均P＜0.05）.NHL患者骨髓PTTG基因和c-myc基因的表达呈正相关（r=0.490,P＜0.05）.结论 NHL中PTTG、c-myc呈高表达状态,PTTG可能通过直接或间接途径促进c-myc的高表达.

一种获取巴斯德毕赤酵母高拷贝重组子的新方法

目的 :探讨一种简化的高效获取用于表达重组蛋白的巴斯德毕赤酵母高拷贝重组子的新方法 ,即多重转化筛选法。方法 :按经典方法转化宿主菌和利用G4 18多拷贝筛选法从转化子中筛选出含目的基因表达盒拷贝数最高的菌株 ,然后以之作为新一轮的转化宿主菌。如此重复进行数轮上述转化筛选过程 ,直到获得含有尽可能多拷贝目的基因表达盒的重组子 ;同时将此方法 ,即多重转化筛选法与经典方法进行比较。结果 :与经典方法相比 ,多重转化筛选法通过筛选较少量转化子即可轻而易举地获得较多的高拷贝重组子 ,工作量更小 ,效率更高。结论 :多重转化筛选法是一种更高效地获取毕赤酵母高拷贝重组子的新方法。

高生物活性复合人工骨修复骨缺损的实验研究

目的 :探讨载有转化生长因子 β1(TGF- β1) ,具有高生物活性复合人工骨修复骨缺损的价值。方法 :建立SD大鼠下颌骨缺损模型。采用组织学和分子生物学 Slot Blot杂交法 ,检测羟基磷灰石复合 TGF- β1实验组 ,单纯羟基磷灰石对照组 ,无材料修复的空白对照组在骨缺损愈合过程中的组织学及 型胶原 m RNA的表达状况。结果 :实验组的新骨形成及 型胶原 m RNA的表达水平最高。结论 :提示载有 TGF-

贲门腺癌中转化生长因子βⅡ型受体基因启动子区高甲基化及其与TGF-β1表达的相关性分析

目的:探讨贲门腺癌中转化生长因子-βⅡ型受体(transforming growth factor-beta receptor type 2,TGFBR2)基因启动子区的甲基化状态及其与TGF-β1蛋白表达之间的相关性。方法:分别应用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)、RT-PCR和免疫组织化学法检测贲门腺癌组织及相应癌旁组织中TGFBR2基因启动子区甲基化情况、TGFBR2 mRNA和蛋白表达情况,并应用免疫组织化学法检测相应组织中TGF-β1的蛋白表达情况。结果:TGFBR2基因在贲门腺癌组织中甲基化率为47.3%(52/110),显著高于癌旁正常组织(P<0.01);Ⅲ期和Ⅳ期贲门癌患者中TGFBR2基因发生甲基化的比率显著高于Ⅰ期和Ⅱ期患者(P<0.05);TGFBR2基因在高、中、低分化的贲门癌组织中甲基化率差异亦有统计学意义(P<0.05)。贲门癌组织中TGFBR2 mRNA及蛋白表达显著低于癌旁正常组织(P<0.05)且与其甲基化状态之间有明显的相关性(P<0.01)。TGF-β1在贲门癌组织中的表达(65.5%)明显升高,与相应癌旁正常组织相比差异有统计学意义(P<0.01),且随着肿瘤分期的增高和肿瘤分化程度的降低,TGF-β1的阳性表达率明显升高(P<0.05)。TGFBR2和TGF-β1蛋白在贲门腺癌中的表达呈明显的负相关(P<0.05)。结论:TGFBR2受体基因启动子区的高甲基化及其TGF-β1的过表达可能均参与了贲门腺癌的发生发展过程。TGFBR2基因启动子区发生甲基化导致的基因沉默可能是贲门腺癌发生的机制之一。

口腔肿瘤中转化生长因子β对纤维连接蛋白可变剪切区的调节作用

纤维连接蛋白(FN)广泛存在于细胞外基质中,其基因可在三个区域进行可变剪切。纤维连接蛋白可 变剪切区中的EDA和EDB在胚胎发育、创伤修复、尤其在肿瘤发生发展的过程中出现特异性高表达,与肿瘤的侵 袭和转移关系密切。目前发现转移生长因子(TGF-β)对上述可变剪切区具有一定调节作用。本文就纤维连接蛋 白可变剪切区在口腔肿瘤中的表达及TGF-β对FN可变剪切区的剪切调节情况做一综述。

内皮素-1对人腹膜间皮细胞合成细胞外基质及转化生长因子β_1的影响

目的:研究内皮素1(ET1)及非特异性内皮素受体拮抗剂即ETA/ETB拮抗剂PD142893对人腹膜间皮细胞(HPMC)分泌细胞外基质(ECM)及转化生长因子β1(TGFβ1)产生的影响。方法:以人腹膜间皮细胞株(HMrSV5)为研究对象,采用放免法、半定量逆转录多聚酶链反应(RTPCR)观察不同浓度的葡萄糖及PD142893对HPMCET1、Ⅳ型胶原(ColⅣ)、纤连蛋白(Fn)分泌和基因表达的影响,及TGFβ1蛋白水平(ELISA),基质金属蛋白酶2(MMP2)基因表达(RTPCR)。结果:①葡萄糖对ET1的影响:高浓度葡萄糖增加HPMCET1的分泌及基因表达,葡萄糖浓度为50、100、150mmol/LET1分泌分别为(2.57±0.18)、(2.82±0.89)、(4.12±0.83)pg/ml·105cell,呈剂量依赖。②ET1促进HPMC分泌ColⅣ,增强ColⅣ、MMP2mRNA的表达。PD142893可下调高糖诱导的ColⅣ、Fn和MMP2。③ET1刺激HPMC分泌TGFβ1呈剂量依赖,ET1浓度为0、10、50、100nmol/L时分泌TGFβ1分别为(2141.74±45.16)、(2181.6±95.13)、(4360.58±139.74)、(6966.88±444.93)pg/ml·105cell,PD142893可明显抑制高糖诱导TGFβ1的分泌。结论:ET1促进HPMC分泌ECM,高糖诱导间皮细胞ECM合成与ET1及TGFβ1途径有关。