手术应激影响患儿血浆高迁移家族蛋白1的表达及临床意义

目的:探讨手术患儿血浆中高迁移家族蛋白1(high-mobility group box 1,HMGB1)与手术应激程度、手术方式及术后并发症的关系,为临床预防和治疗术后感染提供新思路。方法:2013年6月—2014年12月苏州大学附属儿童医院外科病房收治的需经手术治疗的患儿53例,根据其临床表现和实验室结果分为:中度应激组与重度应激组、普外组与心胸外组、术后并发症组与无并发症组。收集术前(PRE)、术后即刻(POD0)、术后1 d(POD1)、术后3 d(POD3)和术后7 d(POD7)的血标本,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunoabsorbent assay,ELISA)检测各组患儿血浆中HMGB1和白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)的表达水平,分析HMGB1变化与手术应激程度、手术方式及手术后并发症之间的关系。结果:与早期炎症因子IL-6相比,炎症因子HMGB1在患儿血浆中的表达区间更为广谱;手术应激程度和手术方式均影响手术患儿血浆中HMGB1的表达水平(P<0.05)。患儿血浆中HMGB1的表达与手术应激程度(尤其是内脏损伤程度)、手术方式、性别相关(P<0.05),但与术后并发症不相关(P>0.05)。结论:手术应激程度和手术方式均是导致HMGB1异常表达的关键因素,为此降低手术应激程度或优化手术方式将有助于适时抑制HMGB1的过度活化,从而减少并发症的发生。

靶向HMGB1治疗中性粒细胞性哮喘的研究进展

高迁移率族蛋白1(HMGB1)是一种高度保守的核蛋白,在细胞核中参与转录、复制、DNA修复和核小体组装。细胞外HMGB1作为报警蛋白参与各种炎症反应和自身免疫。中性粒细胞性哮喘(NA)是由非2型炎症因子驱动所引起的气道中性粒细胞性炎症,目前缺乏有效的治疗方法。研究表明,HMGB1在中性粒细胞性哮喘诊断和治疗中具有一定的临床价值,可能成为潜在的中性粒细胞哮喘的治疗药物。本文综述了HMGB1的结构与功能、其与受体的相互作用以及在中性粒细胞哮喘靶向治疗中的研究进展,为寻找新的有效的中性粒细胞哮喘治疗药物提供帮助。

CircFNDC3B调节miR-107/HMGA1轴对胃癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨环状RNA FNDC3B(CircFNDC3B)调节微小RNA-107/高迁移率家族蛋白A1(miR-107/HMGA1)轴对胃癌(GC)细胞恶性生物学行为的影响。方法体外培养正常胃上皮细胞GES-1和人胃癌细胞系AGS、HCG27、MKN28、BGC-823,RT-qPCR检测CircFNDC3B、miR-107和HMGA1表达,筛选出最佳细胞系。双荧光素酶报告基因实验验证miR-107与CircFNDC3B、HMGA1的靶向关系;选择BGC-823细胞进行转染,将细胞分为si-NC组、si-CircFNDC3B组、si-CircFNDC3B+NC inhibitor、si-CircFNDC3B+miR-107 inhibi-tor组、miR-NC组、miR-107 mimics组、miR-107 mimics+pcDNA、miR-107 mimics+HMGA1组,MTT法检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移和侵袭能力;流式细胞技术检测细胞凋亡;Western blot检测Ki67、Cyclin D1、Bcl-2、cleaved caspase3、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达。结果在胃癌细胞系中CircFNDC3B、HMGA1表达显著增加,miR-107表达显著下降(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-107与CircFNDC3B、HMGA1具有靶向关系;沉默CircFNDC3B表达或过表达miR-107可显著抑制细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,促进细胞凋亡(P<0.05);抑制miR-107表达或过表达HMGA1可逆转沉默CircFNDC3B或过表达miR-107对BGC-823细胞增殖、迁移、侵袭和EMT的抑制作用(P<0.05)。结论CircFNDC3B在胃癌细胞中高表达,沉默CircFNDC3B通过调节miR-107/HMGA1轴抑制胃癌细胞恶性生物学行为。

HMGA1基因小分子RNAi对卵巢癌转移抑制的实验研究

目的:探讨高迁移率蛋白家族A1(high mobility group A1,HMGA1)基因小分子干扰RNA对卵巢癌转移抑制的机理。方法:RT-PCR一步法检测3种不同的卵巢癌细胞株中HMGA1、E钙黏蛋白mRNA的表达水平;设计并合成HMGA1 siRNA,转染HO8910PM细胞:半定量RT-PCR分析法观察HMGA1siRNA转染对E钙黏蛋白mRNA表达的逆转作用,及对卵巢癌细胞株体外侵袭、运动的抑制作用。结果:RT-PCR半定量分析结果显示:OVCAR-3细胞中HMGA1 mRNA表达量相对较低(0.64±0.13),而E-钙黏蛋白mRNA仅在OVCAR-3细胞中有表达;HO8910PM细胞稳定转染HMGA1 siRNA后,转染组、对照组HMGA1 mRNA表达水平分别为0.16±0.08、0.47±0.11(P<0.01),E钙黏蛋白mRNA表达水平分别为0.38±0.07、0.09±0.05(P<0.01);体外运动实验显示,跨膜细胞数转染组明显低于对照组(P<0.05);重组细胞基底膜侵袭实验显示,穿透基底膜细胞数转染组明显低于对照组(P<0.01)。结论:HMGA1基因与卵巢癌转移密切相关,HMGA1基因siRNA可上调卵巢癌细胞中E钙黏蛋白的表达,抑制卵巢癌细胞的运动和侵袭,为卵巢癌转移的基因治疗提供新的靶点。

基于HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路研究木兰脂素对急性鼻窦炎大鼠的治疗作用及机制

目的:观察木兰脂素对急性鼻窦炎(ARS)大鼠的治疗作用,并探讨其通过高迁移率家族蛋白1/Toll样受体4/核因子-κB(HMGB1/TLR4/NF-κB)信号通路的调控机制。方法:49只大鼠,随机取9只作为正常组,40只用鼻窦腔内接种金黄色葡萄球菌法制备ARS模型,36只建模成功大鼠随机分为模型组、木兰脂素低剂量组、木兰脂素高剂量组、阳性组,各9只。木兰脂素低剂量组、木兰脂素高剂量组分别灌胃20、80 mg·kg^(-1)体质量的木兰脂素,模型组和正常组灌胃等体质量溶媒,阳性组灌胃40 mg·kg^(-1)体质量左氧氟沙星,连续7 d。给药前、末次给药后1 h评估各组鼻窦炎症状评分;测定给药后各组血白细胞(WBC)计数及中性粒细胞占比,观察鼻窦黏膜病理组织学变化,检测鼻腔灌洗液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-6水平及鼻黏膜中HMGB1、TLR4、NF-κB mRNA和蛋白表达情况。结果:给药后,木兰脂素低剂量组、高剂量组、阳性组的急性鼻窦炎症状评分及血WBC计数均低于模型组,但仍高于正常组,且木兰脂素高剂量组及阳性组均低于木兰脂素低剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05),而木兰脂素高剂量组与阳性组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与给药前比较,给药后木兰脂素低剂量组、高剂量组及阳性组急性鼻窦炎症状评分均降低(P<0.05),正常组及模型组给药前后无明显差异(P>0.05)。与模型组比较,木兰脂素低剂量组、木兰脂素高剂量组、阳性组中性粒细胞占比均降低,且木兰脂素高剂量组低于木兰脂素低剂量组,阳性组低于木兰脂素高剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05),而阳性组与正常组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色显示,模型组大鼠纤毛脱落、缺失、排列紊乱,黏膜上皮破损、变性,黏膜内及黏膜下可见大量炎症细胞浸润;木兰脂素低剂量组、木兰脂素高剂量组及阳性组上述病理变化均减轻,且木兰脂素高剂量组和阳性组炎症反应减轻更为明显。与模型组比较,木兰脂素低剂量组、木兰脂素高剂量组、阳性组鼻腔灌洗液中TNF-α、IL-6水平及鼻黏膜中HMGB1、TLR4、NF-κB mRNA和蛋白相对表达量均降低,但仍高于正常组,且木兰脂素高剂量组及阳性组均低于木兰脂素低剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05),而木兰脂素高剂量组及阳性组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:木兰脂素治疗ARS效果显著,可能通过HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路抑制鼻黏膜炎症反应。