血清高迁移率族蛋白B1、可溶性晚期糖基化终产物受体水平对急性失代偿性心力衰竭预后有评估价值

目的:探讨血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)水平对急性失代偿性心力衰竭(ADHF)患者预后的评估价值。方法:选取190例ADHF患者为研究组,另选取191例健康者为对照组,根据1年随访期是否死亡,将ADHF患者分为预后不良组(58例)和预后良好组(132例);采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清HMGB1、sRAGE水平;采用Pearson法分析血清HMGB1、sRAGE水平与心功能指标及实验室指标的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析HMGB1、sRAGE及血浆N端脑钠肽前体(NT-proBNP)对ADHF患者预后的评估价值;采用多因素Logistic回归分析影响ADHF患者预后的因素。结果:与对照组比较,研究组患者血清HMGB1、sRAGE水平更高(P均<0.05);预后良好组与不良组血清HMGB1、sRAGE水平、纽约心脏病协会(NYHA)分级、左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)、NT-proBNP、血清肌钙蛋白I(cTnI)、住院时间比较,差异有统计学意义(P均<0.05)。经Pearson法分析,ADHF患者血清HMGB1、sRAGE分别与LVEDD、LVESD、NT-proBNP、cTnl呈正相关,与LVEF呈负相关(P均<0.05),血清HMGB1与sRAGE呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析显示,HMGB1、sRAGE、NT-proBNP对ADHF患者预后不良评估价值均较高,AUC分别为0.869、0.852、0.844,最佳截断值分别为32.91 g/L、296.46 ng/L、3809.77 ng/L时,灵敏度分别为79.3%、82.8%、82.8%,特异性分别为83.3%、74.2%、79.5%。多因素logistic回归分析表明,NYHA分级、LVEF、NT-proBNP、HMGB1及sRAGE是ADHF患者预后的独立危险因素(P均<0.05)。结论:血清HMGB1、sRAGE表达与ADHF的发生及预后有关,可作为ADHF患者预后的评估指标。

血清高迁移率族蛋白B1和可溶性晚期糖基化终产物受体与心力衰竭严重程度相关性研究

目的探讨心力衰竭(HF)时血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)的变化及二者与心脏功能和N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)的关联。方法选取2014年8月至2015年1月期间就诊于哈尔滨医科大学附属第一医院心血管内科73例左室射血分数(LVEF)小于45%的HF患者为实验组,体检人群中选择年龄、性别匹配的22例作为对照组。根据纽约心功能分级(NYHA)将HF患者分组:Ⅱ级患者为A组(18例),Ⅲ级患者为B组(22例),Ⅳ级患者为C组(33例)。测定各组血清HMGB1及sRAGE浓度。HF患者行心脏彩超检查并测定NT-proBNP浓度。结果与对照组相比,HF患者各组的血清HMGB1和sRAGE浓度显著升高(P<0.05)。且随着心功能恶化血清HMGB1和sRAGE浓度均显著升高(P<0.05)。相关性分析结果显示,血清HMGB1和sRAGE与LVEF均呈负相关(HMGB1 r=-0.4783,P<0.05;sRAGE r=-0.4071,P<0.05),与NT-proBNP浓度均呈正相关(HMGB1 r=0.4850,P<0.05;sRAGE r=0.4947,P<0.05)。结论HF患者血清HMGB1和sRAGE浓度显著升高,二者与心功能的严重程度及NT-proBNP水平呈正相关。

表面等离子体共振技术研究肝素对高迁移率族蛋白1与晚期糖基化终产物受体亲合力的影响

测定肝素与高迁移率族蛋1(HMGB1),及其与晚期糖基化终产物受体(RAGE)的亲和力,探讨肝素对HMGB1/RAGE亲和力的影响。用表面等离子体共振技术,实时分析肝素与HMGB1,HMGB1与RAGE的亲和常数,利用其binding analysis分析肝素对HMGB1/RAGE配受体结合的影响。肝素与HMGB1的动力学速率常数ka=1.78×105L.(mol.s)-1,kd=8.02×10-4.s-1,亲和常数KA=2.22×108L·mol-1,KD=4.5×10-9mol·L-1;HMGB1与RAGE的动力学常数ka=1.85×103L.(mol.s)-1,kd=1.81×10-4.s-1,亲和常数KA=1.02×107L·mol-1,KD=9.77×10-8mol·L-1。肝素与RAGE的亲和力极低。当浓度分别为50,100,1000,10000U.L-1的肝素与HMGB1混合后,后者与RAGE的亲和力下降。上述不同浓度的肝素对HMGB1/RAGE亲和力的影响没有显著差异。结果表明,肝素可与HMGB1结合并影响后者与RAGE的亲和力,该作用并不与肝素浓度呈正相关。

心力衰竭时高迁移率族蛋白(HMG)B1和可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)的变化

心力衰竭(HF)是多种心脏疾病的终末阶段,也是一种慢性炎症性疾病。高迁移率族蛋白(HMG)B1是机体非特异性炎症反应的敏感标志物,胞外的HMGB1通过与其高亲和力受体晚期糖基化终产物受体(RAGE)结合后参与心血管疾病的发生发展,而可溶性RAGE(sRAGE)可竞争性抑制全长RAGE的生物学效应,竞争结合HMGB1,从而减轻甚至抑制炎症反应,延缓HF的发生和发展,现就近年来研究发现的HMGB1、sRAGE在心血管疾病中所起的作用及其在治疗方面的进展做一综述。

高迁移率族蛋白B1及其糖基化终产物受体在系统性红斑狼疮患者中的变化及其临床意义

目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及其糖基化终产物受体(RAGE)在系统性红斑狼疮(SLE)发病中可能的作用。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测52例SLE女性患者(SLE组)及40例体检健康女性(HC组)血浆HMGB1水平;同时采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测外周血单核细胞(PBMCs)HMGB1及RAGE mRNA表达水平;并分析SLE患者血浆HMGB1及PBMCs HMGB1、RAGE mRNA水平与临床指标的相关性。结果SLE组患者血浆HMGB1及PBMCs HMGB1mRNA水平高于HC组,差异均有统计学意义(P<0.01);而PBMCs RAGE mRNA水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);Spearman相关性分析显示,SLE患者血浆HMGB1水平与抗核抗体滴度、SLE活动性指数(SLEDAI)评分均呈正相关(P<0.05),与其他临床和实验室指标无明显相关性(P>0.05);HMGB1mRNA表达水平与RAGE mRNA表达水平、SLEDAI评分均呈正相关(P<0.01,P<0.05),与其他临床和实验室指标无明显相关性(P>0.05)。结论血浆HMGB1及PBMCs HMGB1mRNA在SLE患者的异常表达提示其可能在SLE的发生、发展中发挥作用,可能参与了SLE的免疫炎症调节。

不同剂量纳布啡对肺癌根治术患者高迁移率族蛋白B1及晚期糖基化终末产物受体表达水平的影响

目的探讨不同剂量纳布啡对肺癌根治术患者高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及晚期糖基化终末产物受体(RAGE)表达水平的影响。方法采用随机、对照、双盲、前瞻性的研究,选取于2017年1月至2018年12月因肺癌在广西柳州市工人医院进行胸腔镜肺癌根治术治疗的患者160例作为研究对象。随机分为A、B、C、D、E5组,每组均32例,其中A组为舒芬太尼2. 0μg/kg,B组为盐酸纳布啡注射液剂量为0. 5 mg/kg+舒芬太尼1. 5μg/kg,C组为盐酸纳布啡注射液剂量为1. 0 mg/kg+舒芬太尼1. 0μg/kg,D组盐酸纳布啡注射液剂量为1. 5 mg/kg+舒芬太尼0. 5μg/kg,E组为盐酸纳布啡注射液剂量为2. 0 mg/kg+舒芬太尼0. 5μg/kg,对比分析各组T0、T1、T2时间点的HMGB1及RAGE含量及术后3 d不良反应情况。结果 A、B、C、D、E五组T1、T2期外周血HMGB1及RAGE含量均高于T0期,差异有统计学意义(P <0. 05)。A、B、C、D、E五组T2期外周血HMGB1及RAGE含量均低于T1期,差异有统计学意义(P <0. 05)。T0期,A、B、C、D、E五组外周HMGB1及RAGE含量对比,差异无统计学意义(P> 0. 05)。T1期及T2期,D、E两组外周血HMGB1及RAGE含量低于A、B、C组,差异有统计学意义(P <0. 05)。其他组间HMGB1及RAGE含量,差异无统计学意义(P> 0. 05),B、C、D、E组的不良反应发生率显著低于A组,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论应用1. 5 mg/kg纳布啡联合0. 5μg/kg舒芬太尼对非小细胞肺癌根治术后镇痛,可有效降低HMGB1及RAGE的表达量,降低炎症反应程度,同时不良反应较少,为临床工作和术后镇痛提供经验及思路。

目标温度管理抑制猪心肺复苏后高迁移率族蛋白B1、晚期糖基化终产物受体表达

目的探讨目标温度管理(TTM)对猪心肺复苏后高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、晚期糖基化终产物受体(RAGE)表达的影响。方法将24头猪按照随机数字表法分为假手术组(n=4)、常温组(n=10)和TTM组(n=10)。通过程控刺激法制作心脏骤停模型,室颤8 min后开始心肺复苏。TTM组动物在自主循环恢复(ROSC)后给予血管内降温,将核心体温以最快速度降至33℃,维持12 h,然后被动复温(0.5℃/h)至37℃。复苏后24 h采用神经功能缺损评分(NDS)评价神经功能,动物实施安乐死后,留取脑皮质,采用脑皮质含水量评价脑水肿。采用酶联免疫吸附方法检测基线、ROSC 0.5、6、12、24 h血清HMGB1、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的含量;采用RT-PCR法检测ROSC后24 h脑皮质HMGB1、RAGE及MCP-1 mRNA表达水平。结果TTM组ROSC后24 h时的NDS评分显著优于常温组[150.0(70.0,177.5)分vs.237.5(190.0,371.3)分],脑皮质水含量显著低于常温组[(81.2±1.1)%vs.(83.3±1.3)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。与假手术组自同时间点比较,常温组ROSC后6、12、24 h的血清HMGB1、MCP-1及IL-6蛋白含量显著升高,ROSC后0.5、6、12、24 h的TNF-α蛋白含量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与常温组各自同时间点相比较,TTM组ROSC后6、12、24 h的血清HMGB1、MCP-1及IL-6蛋白含量明显降低,ROSC后0.5、6、12、24 h血清TNF-α蛋白含量显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与假手术组比较,常温组ROSC后24 h的脑皮质HMGB1、RAGE及MCP-1 mRNA均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与常温组相比较,TTM组ROSC后24 h的脑皮质HMGB1、RAGE及MCP-1 mRNA均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论TTM可减轻复苏后脑水肿,改善神经功能,其保护机制可能部分与早期抑制HMGB1、RAGE表达有关。

晚期糖基化终末产物受体及配体高迁移率族蛋白-1在矽肺肺纤维化中的作用

本实验通过测量小鼠矽肺模型肺灌洗液中高迁移率族蛋白（HMGB）-1、TNF-α和肺组织中晚期糖基化终末产物受体（RAGE）的表达改变,进而探讨RAGE及HMGB-1在矽肺肺纤维化中的作用,现报告如下。

高迁移率族蛋白-1、糖基化终产物受体及Toll样受体-4通路对爆震伤致大鼠急性肺损伤影响研究

目的探讨高迁移率族蛋白(HMGB)-1、糖基化终产物受体(RAGE)及Toll样受体(TLR)-4通路对爆震伤致大鼠急性肺损伤的调控机制。方法选取40只SD大鼠,10只纳入对照组;其余30只在建立爆震伤致大鼠急性肺损伤模型后,分别纳入6 h组、12 h组、24 h组。ELISA检测大鼠血清炎症因子HMGB-1、白细胞介素(IL)-1α、IL-8;Real Time PCR、Western Blot及免疫荧光检测大鼠肺组织炎症因子HMGB-1、IL-1α、IL-8及通路相关蛋白RAGE、TLR-4、p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、两面神激酶(JAK)-2、信号传导及转录激活因子(STAT)-3。结果 ELISA结果显示,与对照组比较,12 h组、24 h组HMGB-1与IL-1α表达增高,12 h组表达量最高;6 h组、12 h组IL-8表达增高,12 h组表达量最高(P<0.05)。Real Time PCR、Western Blot及免疫荧光结果显示,与对照组比较,12 h组、24 h组HMGB-1与IL-1α表达增高,12 h组表达量最高;6 h组、12 h组IL-8表达增高,12 h组表达量最高;12 h组RAGE表达增高;12 h组、24 h组TLR-4、p38 MAPK表达增高,12 h组表达量最高;6 h组、12 h组、24 h组JAK-2、STAT-3表达增高,12 h组表达量最高(P<0.05)。结论爆震伤致大鼠急性肺损伤诱导HMGB-1释放,结合RAGE与TLR-4受体,激活p38 MAPK与JAK/STAT通路,促进炎症因子IL-1α、IL-8的作用,调节炎症反应。

高迁移率族蛋白B1结合高级糖基化终产物受体可增加人支气管上皮细胞肿瘤坏死因子α的表达

目的:探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对人支气管上皮细胞(16HBE)肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响及相关机制。方法:(1)设置HMGB1不同浓度(0、100、500、2 000 ng/m L)组;(2)设置高级糖基化终产物受体(RAGE)拮抗组:对照,HMGB1 2 000 ng/m L,anti-RAGE,anti-RAGE+HMGB1。用实时荧光定量PCR检测16HBETNF-α mRNA的表达,双抗体夹心酶联免疫吸附实验法(ELISA)检测细胞培养上清TNF-α的浓度,蛋白质印迹法(Western blotting)检测RAGE蛋白表达。结果:(1)16HBETNF-α的表达随HMGB1浓度的增大而增加;(2)16HBE的RAGE蛋白表达随HMGB1浓度的增大而增加;(3)相对于HMGB1 2 000ng/m L刺激组,anti-RAGE+HMGB1组TNF-α表达明显减少。结论 :HMGB1通过结合RAGE受体可以浓度依赖形式增加16HBETNF-α的表达。

高迁徙率族蛋白B1和糖基化终产物受体与肝癌发生发展的关系

高迁徙率族蛋白B1（hign mobility group protein box1,HMGB1）属于高迁移率族蛋白（HMG）家族中的一员,在真核细胞核内表达十分丰富。长期研究认为,HMGB1是典型的非组蛋白染色体蛋白,通过与DNA结合,

高迁移率族蛋白1及其受体促进人主动脉血管平滑肌细胞增殖及迁移的作用研究

目的研究高迁移率族蛋白1（HMGB1）及其受体对体外人主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）增殖及迁移的影响。方法体外培养人VSMC株,50、100、200μg/L HMGB1作用细胞24 h后,CCK法检测VSMC的增殖情况;细胞划痕修复及Transwell小室实验检测VSMC迁移情况;Real-time PCR及Western blot检测细胞晚期糖基化终产物受体（RAGE）干扰效率;CCK法及Transwell小室实验检测沉默RAGE后HMGB1对细胞增殖及迁移的影响;Western blot检测核因子（NF-κB）蛋白表达水平。结果 HMGB1作用VSMC后可明显促进细胞增殖及迁移（P〈0.05）;转染si RNA-RAGE后,RAGE的m RNA及蛋白表达水平明显下降（P〈0.05）;与HMGB1组相比,si RNA-RAGE可抑制HMGB1诱导的细胞增殖、迁移及NF-κB蛋白表达（P〈0.05）。结论 HMGB1可促进VSMC增殖及迁移,机制可能与HMGB1和RAGE结合后激活NF-κB表达有关。

高迁移率族蛋白1——新的“晚期”促炎性细胞因子

高迁移率族蛋白1(HMGB1)是一种高度保守的核蛋白,普遍存在于哺乳动物细胞。最近发现可由激活的单核/巨噬细胞等主动分泌或由坏死细胞被动释放到细胞外,在感染及炎症时血浆HMGB1水平显著升高,起到重要的促炎效应,包括激活单核/巨噬细胞产生多种细胞因子,诱导内皮黏附分子的表达及损伤上皮细胞屏障功能等;可引起发热和厌食,参与多种疾病尤其是脓毒症、关节炎、结肠炎等发病过程。在“早期”炎症介质释放后,给予抗HMGB1抗体,仍可对致命性内毒素血症、脓毒症及急性肺损伤动物发挥保护作用,为临床提供了更加宽广的治疗时机与新的干预途径。

高迁移率族蛋白1在非酒精性脂肪性肝病中的作用研究进展

高迁移率族蛋白1(HMGB1)是一个非组蛋白染色质相关蛋白。其可释放到细胞外与相应受体结合引发炎症和免疫反应。近年来关于HMGB1在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发生、发展、治疗等方面的作用逐渐引起重视。本文就HMGB1在NAFLD中炎症反应、自噬、纤维化和脂质代谢等方面的作用研究进展作一综述。

高迁移率族蛋白B1对人支气管上皮细胞的炎症因子和受体表达的影响

目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对人支气管上皮细胞(16-HBE)的炎症因子和受体表达的影响。方法将16-HBE按照随机数表法分为对照组a(不含HMGB1的培养基)、HMGB1-100 ng/ml组、HMGB1-500 ng/ml组、HMGB1-2000 ng/ml组a,上述分组细胞皆培养48 h。使用酶联免疫吸附实验法(ELISA)检测16-HBE的白介素-8(IL-8)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、胸腺基质淋巴生成素(TSLP)、血管内皮生长因子(VEGF)释放水平;使用蛋白质印迹法(Western blot)检测16-HBE的糖基化终产物受体(RAGE)、Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)蛋白水平。将16-HBE按照随机数表法分为对照组b(不含HMGB1的培养基)、HMGB1-2000 ng/ml组b、RAGE拮抗组(anti-RAGE组)、anti-RAGE+HMGB1-2000 ng/ml组,上述分组细胞皆培养48 h,用ELISA检测16-HBE的IL-8、MMP-9、TSLP、VEGF释放水平。结果与对照组a比较,HMGB1-500 ng/ml组和HMGB1-2000 ng/ml组a明显增加16-HBE的IL-8、MMP-9、TSLP、VEGF释放和RAGE蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05);与HMGB1-2000 ng/ml组b比较,anti-RAGE+HMGB1-2000 ng/ml组中IL-8、MMP-9、TSLP、VEGF的释放明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论HMGB1可依赖RAGE受体增加16-HBE的IL-8、MMP-9、TSLP、VEGF的释放,可能以此来调控支气管哮喘的气道炎症反应。

重型颅脑外伤术后颅内感染患者脑脊液高迁移率族蛋白-1和RAGE水平的变化及意义

目的：观察重型颅脑外伤（sever traumatic brain injury,s TBI）术后发生颅内感染的患者高迁移率族蛋白-1（High mobility group box 1,HMGB-1）和晚期糖基化终产物受体（receptor for advanced glycosylation end products,RAGE）的脑脊液（cerebrospinal fluid,CSF）水平,探讨其对诊断颅内感染的价值。方法：54例s TBI术后拟诊发生颅内感染的患者根据最后诊断分为颅内感染组（n=12）和非颅内感染组（n=42）。酶联免疫法吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测拟诊颅内感染时CSF中的HMGB-1和RAGE蛋白水平。受试者工作曲线（receiver operating characteristic,ROC）分析其对颅内感染的诊断意义。结果：脑脊液的HMGB-1和RAGE水平在颅内染组和非颅内感染组之间比较差异具有统计学意义（t=6.711,P=0.000;t=2.683,P=0.008）。脑脊液HMGB-1和RAGE水平诊断颅内感染的ROC的曲线下面积分别为：0.899（95%CI：0.822~0.975）、0.682（95%CI：0.555~0.809）。HMGB-1的cut-off值分别为209.50 ng/m L（敏感度：0.75,特异性：0.93）;RAGE的cut-off值为108.50 ng/m L（敏感度：1.00,特异性：0.43）。结论：联合检测脑脊液HMGB-1和RAGE水平对s TBI术后是否发生颅内感染具有重要的诊断价值。

高迁移率族蛋白B1的研究进展

高迁移率族蛋白B1（high mobility group box-1 protein，HMGB1，NP_002119）是35年前发现的存在于真核细胞核内的非组蛋白染色体结合蛋白，因其在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）中迁移速度快而得名。HMGB1是一个含有215个氨基酸残基的单链多肽，高度保守，N端富含带正电荷的赖氨酸，

高迁移率族蛋白B1对内皮细胞通透性的影响

目的研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对内皮细胞通透性的影响,以及HMGB1受体(RAGE)和p38 MAPK通路在此病理过程中的作用。方法 HMGB1(200 ng/m L)与人脐静脉内皮细胞株分别在体外共同培养0、3、6、12和24 h,以0 h为对照检测HMGB1诱导单层内皮细胞通透性Pd改变的时间效应;用电阻法分别在0、3、6、12和24 h测量正常空白对照组(单纯培养基)和HMGB1组(200 ng/m L)的单层内皮细胞电阻值TER,比较两组间在相同时间点电阻值的差别;p38 MAPK抑制剂SB203580(25μmol/L)预先作用1 h,继以HMGB1(200 ng/m L)作用12h,比较不同组间细胞通透性的变化;以HMGB1(200 ng/m L)分别作用0、10、20、30、60 min后观察细胞内p38蛋白表达及磷酸化p38表达的时间效应;转染siRNA下调RAGE表达,或以原代培养野生型和RAGE(-/-)小鼠肺微血管内皮细胞培并继以HMGB1刺激,比较各组细胞内磷酸化p38蛋白表达的变化。通透性检测采用FITC荧光标记右旋糖酐漏出法及跨内皮电阻(TER)测定法,蛋白表达用免疫印迹法检测。结果 HMGB1以时间依赖的方式引起单层内皮细胞通透性Pd的升高,12 h与0 h相比,差异有统计学意义(P<0.05);且可使跨细胞电阻TER降低,在12 h与空白对照组相应时间点相比,差异有统计学意义(P<0.05);也可引发p38蛋白磷酸化水平的升高,与0 min相比,差异有统计学意义(P<0.05);SB203580预处理再以HMGB1刺激后细胞通透性明显降低,与HMGB1单纯刺激组相比,差异有统计学意义(P<0.05);RAGE siRNA转染后以HMGB1刺激细胞p38磷酸化水平显著下调,与HMGB1组相比,差异有统计学意义(P<0.05);HMGB1刺激野生型小鼠PMVECs可诱导p38磷酸化,而RAGE(-/-)小鼠PMVECs则无此效应(P<0.05)。结论 HMGB1通过结合RAGE来激活p38诱导血管内皮细胞通透性的增高。

雷公藤甲素对高迁移率族蛋白1诱导的破骨细胞分化的影响

目的:观察雷公藤甲素(TP)对高迁移率族蛋白1(HMGB1)诱导的破骨细胞(OC)分化及晚期糖基化终末产物受体(RAGE)mRNA表达的影响。方法:取C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,经RANKL、M-CSF及不同浓度HMGB1刺激后,采用TRAP染色及活性检测,观察OC分化及其功能。再给予TP干预,观察其对HMGB1诱导的OC分化情况及RAGE m RNA表达的影响。结果:与HMGB1浓度为0ng/ml组比较,HMGB1浓度500ng/ml及1000ng/ml组TRAP阳性OC数目显著增加,TRAP活性显著增强(P<0.01)。与RANKL+HMGB1诱导组比较,TP组TRAP染色阳性OC数目显著减少、TRAP活性显著降低(P<0.01),OC RAGE mRNA表达明显降低(P<0.05)。结论 :HMGB1能够促进OC分化,TP对HMGB1刺激的OC分化及功能起抑制作用,其机制可能与下调OC RAGE基因表达有关。

高迁移率族蛋白B1对人脐血CD34^+细胞迁移的影响

本研究探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1,HMGB1)对人脐血CD34+细胞迁移的影响及其机制。用流式细胞仪检测脐血CD34+细胞表面HMGB1受体:晚期糖基化终产物受体(receptor for advancedglycation end products,RAGE)、Toll样受体2(Toll-like receptors2,TLR2)及TLR4的表达。用磁珠分选法富集的新鲜人脐血CD34+细胞,经不同浓度的HMGB1(10、50、100、1000ng/ml)刺激后,应用transwell小室趋化装置观察HMGB1对人脐血CD34+细胞的迁移活性,显微镜下计数,计算趋化指数,即试验孔与对照孔细胞数的比值。以未加HMGB1的培养细胞为对照组。结果表明:人脐血CD34+细胞经免疫磁珠分选富集的纯度达98%以上。HMGB1在一定的浓度范围内随浓度递增对人脐血CD34+细胞的迁移作用逐渐增强,当HMGB1浓度为100ng/ml时迁移活性最强,与对照组比较差异显著(p<0.01)。抗-RAGE抗体可部分抑制HMGB1对脐血CD34+细胞的迁移作用。结论:一定浓度的HMGB1加强人脐血CD34+细胞迁移功能,此作用有可能通过RAGE介导。