血清维生素D、糖类抗原125及高迁移率簇蛋白B1水平与子宫内膜异位症患者临床分期的相关性分析

目的探讨血清维生素D(VitD)、糖类抗原125(CA125)及高迁移率簇蛋白B1(HMGB1)水平变化与子宫内膜异位症(EMS)的关系。方法选取2018年12月至2019年12月我院收治的70例EMS患者作为研究对象(观察组),并纳入同期40例健康体检者为对照组。比较两组基线资料及VitD、CA125、HMGB1水平差异,评估不同病理类型、不同R-AFS分期EMS患者血清VitD、CA125、HMGB1表达差异,ROC曲线分析三个检测指标评估EMS患者临床分期的价值。结果观察组VitD低于对照组,CA125、HMGB1高于对照组(P<0.05);腹膜型、混合型VitD、CA125、HMGB1水平比较差异无统计学意义(P>0.05);卵巢型CA125、HMGB1水平高于腹膜型、混合型(P<0.05),VitD水平低于腹膜型、混合型(P<0.05);观察组不同分期VitD水平比较Ⅳ期<Ⅲ期<Ⅰ~Ⅱ期(P<0.05),CA125、HMGB1水平比较Ⅳ期>Ⅲ期>Ⅰ~Ⅱ期(P<0.05);相关分析VitD与R-AFS分期呈负相关(P<0.05),CA125、HMGB1均与R-AFS分期呈正相关(P<0.05);ROC曲线VitD、CA125、HMGB1均是评估EMD临床分期的有效指标(P<0.05),三项指标并联评估具有更高评估效能。结论血清VitD、CA125、HMGB1与EMS发生发展关系密切,监测其水平变化对临床诊治有积极意义。

尼美舒利辅助全膝置换术治疗膝骨关节炎的疗效及对高迁移率簇蛋白B1、钙结合蛋白(S100A12)的短期影响

目的探讨尼美舒利辅助全膝置换术治疗膝骨关节炎的治疗效果及其对病人关节液高迁移率簇蛋白B1(HMGB1)、钙结合蛋白S100A12的影响。方法选取2016年2月至2018年11月在天门市第一人民医院接受治疗的96例膝骨关节炎病人作为研究对象,应用随机数字表法分为对照组48例和联合组48例。两组病人均行人工全膝关节置换术治疗,联合组病人同时给予尼美舒利片口服,0.1克/次,2次/天。评价并比较两组病人的治疗效果和治疗前后的膝关节美国特种外科医院功能评分(HSS)、关节活动度、视觉模拟评分(VAS),检测并比较两组病人治疗前后血清白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素1(IL-6)、C反应蛋白(CRP)及关节液HMGB1、S100A12水平变化情况。结果术后末次随访评价两组病人的疗效,对照组治疗总有效率为79.17%(38/48),联合组为93.75%(45/48),联合组治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05);治疗前两组病人膝关节VAS评分、膝关节HSS评分、膝关节活动度三项指标比较均差异无统计学意义(P>0.05),治疗后相比手术前,两组病人的膝关节HSS评分显著升高,膝关节活动度显著增加,VAS评分显著减小,且治疗后联合组与对照组膝关节三项指标比较均差异有统计学意义[(93.05±7.20)比(82.63±7.96)分,(2.48±0.51)比(4.34±0.85)分,(107.62±8.80)°比(102.82±10.39)°](P<0.05);治疗前两组病人的血清IL-1、IL-6、CRP和关节液HMGB1、S100A12比较均差异有统计学意义(P>0.05),治疗后血清IL-1、IL-6、CRP和关节液HMGB1、S100A12较治疗前均显著降低,且治疗后联合组与对照组血清炎性指标和关节液HMGB1、S100A12比较差异有统计学意义[(73.39±8.95)比(89.74±9.82)ng/L,(109.65±26.33)比(173.40±33.71)ng/L,(8.72±4.46)比(14.50±7.72)mg/L,(3.85±1.16)比(5.33±1.97)ρg/mL,(8.26±4.12)比(11.09±5.88)ng/mL](P<0.05)。结论尼美舒利辅助全膝关节置换术治疗膝骨关节炎可进一步提高手术治疗的疗效,有助于显著改善病人的临床症状和膝关节功能,降低血清炎性因子水平和关节液HMGB1、S100A12水平,关节液HMGB1、S100A12检测可为膝骨关节炎的临床治疗提供参考。

电离辐射对不同放射敏感性细胞中高迁移率簇蛋白B1的诱导表达作用

目的 探讨电离辐射对已建立的宫颈癌放射抗拒细胞对比模型中高迁移率簇蛋白B1（HMGB1）和mRNA诱导表达的差异性，分析HMGB1对宫颈癌放射敏感性调控的可能性。方法人宫颈癌细胞系HeLa重复照射12次后，传代培养调整细胞状态至细胞增殖稳定，筛选得抗拒细胞系HeLaR。以2、5、10 Gy X射线分别照射亲代HeLa和HeLaR细胞，于照射后0、0.5、2、4、6、12、18、24、36、48 h收集细胞，提取蛋白质和RNA，采用Western blot和实时荧光定量PCR法分别检测样本中HMGB1蛋白和mRNA的表达情况。结果 在蛋白水平，2、5、10 Gy X射线照射后，HeLaR细胞在48 h内均表现为HMGB1表达量下降，在48 h达到未照射水平，后有增加趋势，与照射后0 h比较，2、5、10 Gy照射后6-36 h各时间点，差异具有统计学意义（t=3.574-9.754，P 〈 0.05）；相反，HeLa细胞在照射后6 h，其HMGB1表达逐渐增多，尤其在5和10 Gy表现明显，与照射后0 h比较，2 Gy照射后6、12、48 h（t=3.945-4.864，P 〈 0.05）、5 Gy照射后6、36、48 h（t=-2.875-3.295，P 〈 0.05）及10 Gy照射后36、48 h（t=-4.480、-4.517，P 〈 0.05），差异具有统计学意义。在mRNA水平其趋势与蛋白水平基本一致。结论 不同剂量X射线照射后可诱导人宫颈癌细胞中HMGB1的表达变化，且其变化在人宫颈癌放射敏感细胞及放射抗拒细胞中不同。HMGB1可能参与人宫颈癌放射抗拒机制。

阻断细胞外高迁移率簇蛋白B1抑制阿霉素诱导的小鼠心肌损伤

探讨阻断细胞外高迁移率簇蛋白B1(HMGB1)功能对阿霉素诱导型心肌损伤的预防作用及其机制。HMGB1阻断剂甘草甜素于阿霉素造模前1 h及造模后每天按10 mg/只的剂量腹腔注射,第14天结束实验。利用超声心动和血流动力学检测心脏功能,免疫组化和天狼猩红染色观察心脏局部炎症及胶原沉积情况,免疫共沉淀和免疫共聚焦显微镜分析HMGB1与TLR2相互作用,Immunoblot检测HMGB1、MyD88、p65NF-κB及phospho-p65NF-κB蛋白含量。结果表明,与正常对照组相比,阿霉素处理引起HMGB1表达明显增加。阻断HMGB1抑制阿霉素引起的心功能失调、炎症反应及心肌纤维化。甘草甜素抑制HMGB1与TLR2相互作用以及TLR2下游信号激活。以上结果提示,阻断HMGB1通过抑制TLR2信号通路,可以改善阿霉素诱导的心肌损伤。

高迁移率族蛋白B1对大鼠局灶脑缺血/再灌注后大脑皮质梗死周围区神经干细胞增殖的影响

目的:探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对局灶脑缺血/再灌注大脑皮质梗死周围区神经干细胞增殖的影响。方法:选取雄性SD大鼠48只,分为假手术组、模型组、RNA干扰组和阴性干扰组。采用线栓法制备大鼠局灶脑缺血/再灌注模型,缺血1 h再灌注7 d时观测。用携带大鼠HMGB1 shRNA的慢病毒载体介导RNA干扰抑制脑内HMGB1的表达,通过免疫荧光双标记HMGB1/GFAP和Western blotting法检测RNA干扰效果。通过免疫荧光双标记5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)/神经巢蛋白(nestin)检测大脑皮质梗死周围区神经干细胞的增殖。结果:与假手术比较,再灌注7 d时,模型组大脑皮质梗死周围区HMGB1蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,RNA干扰有效抑制HMGB1蛋白的表达(P<0.05)。与假手术组比较,模型组的BrdU/nestin双标记细胞明显增多(P<0.05);与模型组比较,RNA干扰组的BrdU/nestin双标记细胞明显减少(P<0.05)。结论:局灶脑缺血/再灌注后大脑皮质梗死周围区HMGB1蛋白表达水平升高可促进该部位的神经干细胞增殖。

卵巢癌组织中HMGB1和E-cadherin的表达及其意义

目的:探讨高迁移率簇蛋白B1(High mobility group box-1,HMGB1)和上皮型钙黏素(E-cadherin)在卵巢癌组织中的表达及临床意义。方法:选取我院妇产科2008年5月至2011年1月75例确诊为卵巢癌的患者为研究对象,采用免疫组化SP法染色,比较HMGB1和E-cadherin在卵巢癌组织及正常卵巢组织的表达差异,并分析不同临床病理参数下卵巢癌组织中HMGB1和E-cadherin的表达意义。结果:卵巢癌组织E-cadherin表达阳性率低于正常卵巢组织(χ2=12.62,P<0.01);卵巢癌组中HMGB1阳性表达率为(58/75)高于正常卵巢组织中表达(4/40)(χ2=47.60,P<0.01)。HMGB1和E-cadherin的表达与卵巢癌病理类型和病理分级无关(P>0.05),与临床分期和有无淋巴结转移有关(P<0.05)。卵巢癌组织中HMGB1和E-cadherin的异常表达呈显著负相关(r=-0.299,P<0.01)。结论:HMGB1和E-cadherin在卵巢癌发生、浸润、转移过程中起重要作用。

子宫内膜异位症患者血清及腹腔液HMGB1的表达及意义

目的探讨子宫内膜异位症(内异症)患者血清及腹腔液中高迁移率簇蛋白B1(HMGB1)的表达及其在内异症发病中的作用。方法选择2010年3月至2011年9月在我院经妇科腹腔镜手术及术后病理诊断为内异症的40例患者并进行分期,其中早期(I、II期)18例,晚期(III、IV)22例;并选择同期间在我院行妇科腹腔镜手术的非内异症患者(输卵管性不孕、卵巢畸胎瘤)25例。所有患者均在术前采集上肢静脉血,术中采集腹腔液,采用ELISA方法测定血液和腹腔液中HMGB1的表达,并对内异症患者血清和腹腔液中HMGB1表达做相关性分析。结果①内异症组血清、腹腔液中HMGB1水平均比对照组明显增高(P<0.05);②内异症晚期组组血清、腹腔液中HMGB1水平均比内异症早期组明显增高(P<0.05);③内异症组血清HMGB1与内异症组腹腔液HMGB1水平之间呈明显正相关(r=0.026,P<0 05)。结论内异症患者血清及腹腔液中HMGB1水平明显增高,尤其是内异症晚期患者,HMGB1可作为评判内异症严重程度的一个指标。

急性颅脑损伤患者血清及脑脊液HMGB1的表达及临床意义

目的探讨颅脑损伤患者血清及脑脊液中高迁移率簇蛋白B1(HMGB1)的表达及预后的关系。方法选择2009年1月至2011年6月在我院就诊的急性颅脑损伤患者80例,入院后并根据Glasgow昏迷评分(GCS)分成三组:轻度组25例(GCS12～15分);中度组31例(GCS9～11分),重度组24例(GCS3～8分)。另外选择同期在我院因退行性椎间盘病变行骨科手术患者25例作为对照组(N组)。颅脑损伤患者出院后3个月,根据格拉斯哥治疗结果分级(GOS)分级评定,分为三组:死亡及植物状态组(GOS1～2级);残废组(GOS3～4级);恢复良好组(GOS5级)。所有患者均采集上肢静脉血及脑脊液,并采用ELISA方法测定其中HMGB1的表达。结果①急性颅脑损伤患者血清、脑脊液中HMGB1水平均比对照组明显增高(P<0.05);血清、脑脊液中HMGB1水平随颅脑损伤GCS评分增加而逐渐增高;②预后不良患者(死亡及植物状态、残废组)血清、脑脊液中HMGB1水平较预后良好者明显增高(P<0.05)。结论急性颅脑损伤患者早期监测血清及脑脊液中HMGB1水平可判断病情的轻重,并且可作为了解病情与转归的参考指标。

SOX2在食管小细胞癌中的表达及预后价值

目的 探讨食管小细胞癌(small cell esophageal carcinoma,SCEC)手术切除患者SRY相关高迁移率族盒蛋白2(SRY related high-mobility-group box protein 2,SOX2)的表达及其预后价值。方法 通过免疫组织化学方法检测SCEC患者癌组织中SOX2的表达,同时检测癌周正常食管黏膜中SOX2的表达,采用Spearman相关性分析SOX2表达水平与临床病理参数的关系,Kaplan-Meier生存分析和COX比例风险模型分析影响SCEC预后的危险因素。结果 118例SCEC患者中SOX2的阳性率为46.6%(55/118),其中高表达组27.1%(32/118),低表达组19.5%(23/118),SOX2的表达与局部浸润深度、TNM分期、淋巴结转移、远处转移相关;SOX2高表达组更多见于TNMⅢ~Ⅳ期、局部浸润纤维膜、有淋巴结转移和远处转移的患者;SOX2低表达组更多见于肿瘤直径<2 cm和2~4 cm、局部浸润黏膜下层和肌层的患者。Kaplan-Meier生存分析结果显示肿瘤直径、TNM分期、局部浸润深度、淋巴结转移、远处转移、SOX2高表达与患者预后有关(P<0.05),COX比例风险模型分析结果显示,TNM分期、SOX2高表达、远处转移是患者预后的独立影响因素。结论 SOX2高表达可作为SCEC患者术后预后不良的指标,SOX2有望成为SCEC的预后生物标志物。

MMP3与Sox9基因对人椎间盘退变髓核细胞调控作用

目的探讨基质金属蛋白酶3(MMP3)基因与性别决定相关高迁移率簇蛋白盒基因9(Sox9)调控在人椎间盘退变髓核细胞中的作用。方法构建MMP3与Sox9慢病毒表达载体,感染人退变髓核细胞,按照处理方式不同分为4组,分别为空白对照组(A组)、MMP3沉默转染组(B组)、Sox9过表达组(C组)以及MMP3沉默+Sox9过表达共转组(D组),各组髓核细胞置于恒温培养箱中培养,定期换液。72h后,通过荧光定量PCR方法检测转染人退变髓核细胞Ⅱ型胶原、蛋白多糖mRNA的表达,通过Western Blot方法检测转染人退变髓核细胞Ⅱ型胶原、蛋白多糖蛋白的表达。结果 B、C、D组蛋白多糖、Ⅱ型胶原蛋白及mRNA表达水平与A组比较明显增高,差异具有显著性(F=84.50~413.09,q=4.57~49.13,P<0.01);D组蛋白多糖、Ⅱ型胶原蛋白及mRNA表达水平与B、C组比较,差异具有显著性(q=13.72~30.24,P<0.01)。结论 MMP3基因沉默、Sox9基因过表达可以促进人退变髓核细胞蛋白多糖、Ⅱ型胶原的分泌,延缓椎间盘退变,且二者之间具有协同作用。

血清E-cadherin、HMGB1水平在卵巢癌中的价值及其与化疗疗效的关系

目的探讨血清上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、高迁移率簇蛋白B1(HMGB1)在卵巢癌中的价值及其与化疗疗效的关系。方法选取2012年10月至2014年10月应用ELISA法测定80例初治卵巢癌患者行NAC化疗方案前后血清E-cadherin、HMGB1水平,并与60例健康体检者进行比,化疗后对患者随访36~60个月,分析血清E-cadherin、HMGB1水平与卵巢癌近远期疗效的关系。结果卵巢癌化疗前血清Ecadherin、HMGB1水平高于卵巢良性肿瘤及对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而化疗后血清E-cadherin、HMGB1水平低于化疗前,但仍高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。化疗后CR+PR组血清E-cadherin、HMGB1水平低于化疗前,差异有统计学意义(P<0.05),且与对照组相当;而SD+PD组患者血清E-cadherin、HMGB1水平明显高于对照组及CR+PR组,差异有统计学意义(P<0.05)。患者化疗后E-cadherin、HMGB1水平与临床分期、肿瘤大小及淋巴结转移有关(P<0.05),经Cox风险模型分析可知,肿瘤临床分期、淋巴转移、化疗后E-cadherin>2.10mg/L、化疗后HMGB1>115μg/mL是卵巢癌无进展生存期的独立危险因素(P<0.05)。结论化疗前后动态监测血清E-cadherin、HMGB1水平将有助于评价卵巢癌预后情况及复发情况,为下一步治疗提供指导。

蓝萼甲素通过HMGB1信号通路调节滋养细胞炎症反应

目的:研究蓝萼甲素(GLA)对JAR细胞HMGB1炎症信号通路的调节作用,探讨GLA与HMGB1相互作用的机制。方法:不同浓度GLA(0. 01、0. 1、1、10μg/ml)刺激培养JAR细胞48 h后,qRT-PCR与Western blot分别检测HMGB1RNA与蛋白水平的表达;荧光素酶报告基因检测NF-κB表达活性;激光共聚焦检测HMGB1在细胞中的分布情况; ELISA检测培养液HMGB1的含量。结果:0. 1μg/ml GLA刺激培养JAR细胞,HMGB1表达与NF-κB活性升高最显著,随着GLA浓度的增加,两者表达水平反而下降; GLA刺激培养JAR细胞可引起HMGB1从胞核转移入胞浆,进而分泌到胞外。结论:GLA通过HMGB1信号通路调节JAR细胞炎症反应,且作用效果与剂量密切相关。

小肠缺血时间与HMGB1水平的相关性研究及意义探讨

目的:探讨大鼠小肠缺血时间与大鼠高迁移率簇蛋白1(HMGB1)水平的相关性,并分析其意义。方法:选用成年雄性SD大鼠,建立小肠缺血动物模型,随机分为假手术组(n=6)、缺血15、30、45、60、75min组(各组n=12)。检测各组复灌6h时血清及小肠组织内HMGB1水平,检测小肠上皮损伤程度,记录1周存活情况。结果:大鼠缺血前有少量HMGB1表达,随着小肠缺血时间的延长,小肠组织和血清中HMGB1水平明显升高,并且与小肠损伤程度相关。缺血时间≤45min,大鼠1周存活率为100%,缺血时间达到60min时,大鼠1周存活率为67%。结论:大鼠小肠缺血再灌注损伤能致大鼠HMGB1水平显著增高,HMGB1水平与缺血时间及肠损伤程度密切相关。