基于UPLC-MRM-IDA-EPI法高通量筛查保健食品中60种非法添加的化学药物

目的基于UPLC-MRM-IDA-EPI技术建立60种非法添加化学药物的快速定量和定性分析方法。方法色谱分析采用UPLC-MS/MS法,以Phenomenex kinetex C_(18)(100 mm×3.0 mm,2.6μm)为色谱柱,0.1%甲酸水溶液(A)-甲醇(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温40℃,进样体积5μL。质谱分析采用电喷雾离子源(ESI)同时扫描正负离子,利用多反应监测(MRM)-信息依赖性采集(IDA)-增强子离子扫描(EPI)建立60种非法添加化学药物的EPI信息库;待测样本的分析采用MRM-IDA-EPI扫描监测疑似化合物并对其进行初步定量,同时将EPI碎片信息与EPI信息库进行对比,增加定性结果的可靠性。结果建立了60种化学药物的MS/MS谱库和定量方法,该方法定量分析的线性范围宽,相关性好(r≥0.99);方法精密度RSD为0.70%~7.0%(n=6);低、中、高浓度的回收率在60.1%~115.8%;检测限在2.5~1101 ng·g^(-1),满足检出非法添加的要求。对EPI数据库进行方法学验证,基质加标溶液中化合物与数据库中化合物的“匹配度”值均在68~95。应用该方法对30批样品进行筛查,共检出4批含有非法添加的样品,其添加物为硝西泮、他达拉非、西地那非。结论本研究建立的分析方法操作简单、专属性强,适用于高通量筛查及初步定量分析保健食品中非法添加的60种化学药物。

基于气相色谱-四极杆-飞行时间质谱高通量筛查芝麻油中54种替代型增塑剂

以气相色谱-四极杆-飞行时间质谱(GC-Q-TOF/MS)为检测手段,建立了芝麻油中54种替代型塑化剂(APs)的高通量快速筛查方法。样品经乙腈提取、PSA/Silica固相萃取柱净化后,经GC-Q-TOF/MS的全扫描模式采集质谱信息,利用构建的54种APs高分辨质谱数据库进行检索来实现广谱筛查、定性鉴别,并同时对5种目标物进行定量分析。比较了不同提取溶剂种类、不同净化方式对样品提取与净化的影响,通过优化气相色谱分离条件,优化筛查参数来提高筛查结果的准确性。结果表明,54种APs的筛查限(SDL)为001~002 mg/kg,定量限为002~004 mg/kg。利用该方法对市售的80批次芝麻油样品进行快速筛查分析,有5种化合物得到鉴定,对鉴定到的5种化合物进行基质匹配外标法定量分析。结果显示,5种APs在001~02 mg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于099,芝麻油空白样品加标回收试验结果表明,5种APs的回收率为713%~978%,相对标准偏差(RSD)为04%~61%(n=6)。该方法快速、准确,灵敏度高,检测通量高,实现了芝麻油中54种替代型塑化剂的高效筛查、定性鉴别及阳性样品的定量分析,为食品中其他污染物的监测提供了参考。

高通量筛查和安全评估结合评价乳制品包装安全风险

目的以乳制品包装为研究对象,建立一套科学评价食品接触材料安全风险的方法,全面评价食品接触材料在接触食品过程中带来的食品安全风险。方法采用非靶向高通量筛查检测技术全面筛查食品模拟物中的重金属和有机物,根据权威数据库和物质毒理学资料进行危害评估,参考欧盟和美国膳食暴露量计算方法进行暴露评估,结合评估结果计算风险系数,最终表征食品接触材料的安全风险。结果抽取了市面上的塑料、金属、涂料及复合包装等不同材质的乳制品包装进行检测,检出铜、铬、锰和锡等元素,以及有意添加物(如单体、溶剂、抗氧剂、光引发剂、爽滑剂、增塑剂等)、非有意添加物质(如抗氧剂降解产物、寡聚物等)。采用暴露评估和危害评估方法分别表征检出物的膳食暴露和健康指导值,安全风险评估风险系数分布在0.007%~9.4%之间,安全风险较低。结论建立的食品接触材料安全评价方法是一种有效评价食品接触材料安全风险的方法,该方法具有一定的通用性,企业、行业和政府部门等可用于识别食品接触材料的安全风险,为减少和排除安全风险提供科学依据。

QuEChERS-同位素稀释-液相色谱-高分辨飞行时间质谱法高通量筛查化妆品中86种糖皮质激素

建立了QuEChERS-同位素稀释-液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱同时快速筛查化妆品中86种糖皮质激素(Glucocorticoids,GCs)的高通量方法。样品经乙腈提取,改进的QuEChERS法净化,待测物选用具有多重色谱保留机理的新型色谱柱Poroshell 120 PFP(100 mm×2.1 mm,2.7μm),以0.2%(V/V)乙酸和乙腈为流动相进行梯度洗脱分离,在电喷雾离子源的正离子模式下建立了一级精确质量数及二级碎片离子质谱图数据库,无需标准品即可完成化妆品中86种GCs的全面筛查与确证。所有待测物在2~200μg/L浓度范围内线性良好,相关系数均大于0.99,3个添加水平的平均回收率为66.2%~112.8%,相对标准偏差(RSD)为4.6%~13.9%,检出限(LOD,S/N≥3)为0.006~0.015 mg/kg,定量限(LOQ,S/N≥10)为0.02~0.05 mg/kg。本方法简便高效、定性可靠、定量准确,适用于化妆品中非法添加GCs的高通量筛查。

超高效液相色谱-飞行时间质谱法高通量筛查乳制品中20种镇静剂

利用超高效液相色谱/高分辨飞行时间质谱,结合数据库,建立了乳制品中20种镇静剂的高通量筛查方法。样品以乙腈和酸化乙腈沉淀蛋白质和脂肪,冷冻离心浓缩,经超高效液相色谱分离,采用电喷雾离子源,正离子模式,基质匹配法进行定量分析,可在9 min内对20种镇静剂进行高通量筛查和定量分析。镇静剂的质量浓度在1～500μg/L或5～1000μg/L范围内具有较好的线性关系,检出限为0.3～1.5μg/L,定量限为1～5μg/L。在5和50μg/L添加水平时,平均回收率为76.1%～108.2%,相对标准偏差为2.5%～9.0%。利用TargetAnalysis软件建立镇静剂数据库,并应用于加标样品的筛查分析。通过数据库比对,样品中添加的镇静剂被全部筛查出来,鉴定准确度达到了100%,保留时间偏差小于0.1 min,质量偏差小于3mDa,同位素峰形匹配度大于89.5%。利用本方法对购自超市的8个不同品牌的50余份乳制品进行了筛查分析,均未检出阳性样品。

环境中有机污染物的高通量筛查技术研究进展

环境中污染物种类繁多,新型污染物层出不穷,对人类健康构成巨大的威胁,而现有标准往往没有考虑到这些新型污染物,如何从复杂的环境介质中识别出污染物是当前亟待解决的问题.采用传统的靶向分析检测工作量大,工作效率低,因此高通量筛查技术逐渐成为环境分析的热点.本文介绍了高通量筛查技术及其在不同领域的应用.

Orbitrap高分辨质谱法高通量筛查生化药品、中成药与保健品中非法添加的13种消化类化学药物

建立了生化药品、中成药和保健品中非法添加的13种消化类化学药的超高效液相色谱-Orbitrap高分辨质谱(UHPLC-HRMS)高通量筛查方法。供试品以甲醇-水(50∶50)为提取溶剂,经Hypersil Gold C18(2.1 mm×100 mm,3μm)色谱柱分离,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,单次分析仅需10min。采用正离子检测,Full MS/dd-MS2扫描模式。通过比较供试品与对照品的色谱保留时间、高分辨一级和二级质谱,判断供试品中是否非法添加消化类药物,并对阳性样品进行定量分析。13种化合物的线性范围均为8.0~800μg/L,相关系数(r)均不低于0.998 5,回收率为94.6%~106.2%,相对标准偏差为1.2%~2.9%。该法快速简便、通量高、选择性好、灵敏度高,并已用于生化药品、中成药及保健品非法添加消化类化学药的高通量筛查和测定,在38批中成药中发现5批阳性样品,在43批保健品中发现3批阳性样品。

QuEChERS-气相色谱-串联质谱法高通量筛查植物源中药材中460种农药残留

结合QuEChERS样品前处理技术,建立了460种农药残留的气相色谱-串联质谱(GCMS/MS)方法数据库,用于植物源中药材中农药多残留的快速高通量筛查检测。样品采用0.1%乙酸-乙腈提取,经氯化钠盐析分层、PSA+C_(18)分散固相萃取净化后,GC-MS/MS测定。结果表明:根茎类、花叶类、籽实类、全草类和皮类5种类型中药材基质中421种农药的定量限(LOQ)在0.006~221μg/kg之间,其中80%以上农药的LOQ低于50μg/kg。在100μg/kg添加水平下,72%以上农药的回收率在60%~120%之间,77%以上农药的相对标准偏差在20%以内。该方法具有简便、快速和高通量的优势,一次进样可同时检测400多种农药残留。采用本研究方法对市售215批样品进行筛查检测,结果共检出72种农药残留,其中毒死蜱和氟氯氰菊酯的检出率和检出浓度均较高,其潜在质量安全风险需引起关注。

牛肉中禁用药物高通量筛查技术研究与应用

文章结合液相色谱高分辨飞行时间质谱建立高效快速检测牛肉中17种禁用药物高通量筛查检测技术。样品用0.2%甲酸(80:20)的乙腈水溶液提取,KNORTH~?Clean-up LPAS(Lipid and protein adsorbent)净化柱净化。Phenomenex Kinetex F5色谱柱分离,以0.1%甲酸水和0.1%甲酸乙腈作为正离子扫描流动相,水和乙腈作为负离子扫描流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,柱温为40℃,质谱采用电喷雾离子源,分为正离子和负离子2种扫描模式进行扫描。结果显示,17种禁用药物在牛肉中的检出限和定量限分别为0.04~0.28μg/kg和0.12~0.95μg/kg,回收率为71.9%~115.2%。17种禁用药物在5~200μg/mL范围内线性关系良好,相关系数(R2)大于0.98。该研究所建立的高通量筛查技术适用于牛肉中17种禁用药物的检测。该方法快捷简单,能够有效检测出牛肉中的禁用药物成分,具有较高的准确性和可靠性。

LC-MS/MS高通量快速筛查中成药和保健品中未知非法添加药物

目的建立LC-MS/MS的筛查方法,高通量快速筛查中成药和保健品中的非法添加药物。方法色谱条件采用ZORBAX XDB-C18柱,乙腈:1 mM甲酸铵(含0.1%甲酸)梯度洗脱;质谱条件采用电喷雾离子化源正离子化筛查方式(ESI+),通过相关信息扫描模式(IDA),最终在已建立的谱库中自动搜索出中成药和保健品中未知的非法添加物。结果对于怀疑有未知的非法添加物样本,经18min的快速筛查,可以同时筛查到包括降糖、镇静催眠、解热镇痛、非甾体抗炎、抗生素、抗癫痫等多种类的非法添加药物。结论本文建立的LC-MS/MS方法简单、快速、准确、高通量,可用于筛查中成药和保健品中未知的非法添加物。

高效液相色谱-质谱联用法高通量筛查药物中毒224例回顾性分析

目的：对我院高效液相色谱-质谱联用（LC-MS／MS）法高通量筛查药物中毒224例回顾性分析。为临床中毒急救提供参考。方法：分别对224例病例的中毒发生年度、患者基本情况（性别、年龄），病例来源，中毒药物检出等情况进行统计分析。结果：3，5～7，11～12月为中毒高发期，中毒筛查患者以女性为主，比例约为男性的2倍，主要以药物中毒、药物自杀性中毒和食物中毒为主，栓出药物以艾司唑仑、地西泮、咖啡因、替马西泮等镇静催眠药为主。结论：通过对我院中毒急救中心224例患者中毒性况回顾性分析，我们得到了多项具有临床指导意义和社会指导意义的结论。

武进港流域地表水中新污染物的高通量筛查与源解析

新污染物长期存在于水环境中,其对生态、人类健康存在的潜在危害和风险是不可忽视,而研究其在地表水中的分布特征及其来源可对新污染物的源头治理与管控提供帮助.武进港是太湖西北部的主要入湖河流之一,为了解武进港流域新污染物的分布,采用液相色谱-高分辨率质谱仪(LC-HRMS)对19处地表水样(包括主河道12个水样、支流7个水样)和污水处理厂出水水样中的新污染物进行高通量筛查.共识别出294种新污染物,其中药物类和农药类新污染物占比较大,分别为35.4%和32.3%.主成分分析表明,污水处理厂出水受新污染物污染的情况与地表水具有显著差异,同时19个地表水点位中,新污染物的分布在武进港流域存在南北地区差异.通过Mann-Whitney U检验,并绘制火山图,北部筛选出70种特征新污染物,其中药物类新污染物占比最大,为48.6%,包括咖啡因、金刚烷胺、缬沙坦等.南部筛选出17种特征新污染物,农药类占比最大,为52.9%,包括2-甲基-4-氯苯氧乙酸(MCPA)、灭草松等.相关性分析结果显示,农药类特征新污染物与农田占比呈正相关.

人类心房组织转录因子新一代蛋白质组学高通量筛查TFRE实验方法的建立

目的探究利用人类心房组织建立高通量高效筛查转录因子的实验技术,即转录因子反应元件(transcription factor response elements,TFRE)的方法。方法本研究纳入2例术后患者的右心房组织(1例术前无房颤,1例术前有房颤)。提取人类心房组织细胞核蛋白质,测定其蛋白质浓度,制备磁珠-串联双拷贝转录因子反应元件序列(beadscatTFRE)复合体,利用beads-catTFRE复合体在核蛋白提取液中富集转录因子,高温高盐使核蛋白与beads-catTFRE复合体去结合后进行蛋白凝胶电泳,切胶、褪色后利用胰酶溶液进行胶内酶解,利用乙腈收缩凝胶条挤出其中的肽段并得到肽段溶液,干燥、溶解后上样进行质谱检测。利用Firmiana进行一站式数据分析和处理。结果本次实验在正常右心房组织和房颤患者右心房组织两个实验组中分别鉴定到了220种、181种转录因子,两组一共鉴定到了241种转录因子,其中正常右心房组织中表达量高于中位数的转录因子前10%的有12个;房颤右心房组织中表达量高于中位数的转录因子前10%的有12个。结论本研究建立高通量筛查方法覆盖度高,其检出数据可以用于支持进一步的实验验证研究。

海河流域典型水库水体有色可溶性有机物筛查分析

为研究海河流域水体中有色可溶性有机物,采集海河流域典型水库水体中表层样品,利用高通量筛查技术,基于与CDOM(440)检测值相关分析和理化性质分析,识别研究区与水色特征相关的有色可溶性有机物。经实验室内验证筛选出避蚊胺、十四烷酸、十八烷酸及叔丁基苯醌4类化合物与CDOM的关联关系;再经实际样品验证,判别避蚊胺或是该研究区域影响水色遥感的一种重要可溶性有机物。

中兽药口服液中非法添加化学药物高分辨质谱筛查

建立了适用于中兽药口服液中167种非法添加化学药物的超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱高通量筛查方法。样品采用0.5%甲酸乙腈-水进行振荡超声提取,电喷雾电离源(ESI)、正负离子同时扫描方式进行数据采集。通过与自建的167种化合物的基本信息及色谱-质谱信息数据库进行比对,对色谱-质谱条件、提取溶剂的种类和净化条件进行优化。将经前处理后的口服液样品上机测试后,采用Trace Finder筛查软件对数据结果进行分析。结果显示,50 ng/mL非法添加药物(头孢类和内酰胺类药物为100~200 ng/mL)上机时可定性检出。不同药物配方因基质影响,其非法添加药物的检出率略有差异。该方法可基本实现中兽药口服液中非法添加化学药物的高通量快速筛查,具备操作简便、快速高效的特点,为其他兽药剂型中非法添加药物的筛查奠定了基础。

QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法快速筛查食疗膳食中40种非法添加药物

本研究建立了QuEChERS前处理结合超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)快速筛查食疗膳食中40种非法添加药物组分的方法。样品以甲醇作为萃取溶剂,萃取液经分散固相净化后,经Zorbax-Eclipse Plus C 18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.8μm)分离,以甲醇水溶液(含0.1%甲酸和5 mmol/L乙酸铵)作为洗脱流动相。药物组份采用电喷雾离子化,正离子扫描,空白基质配制曲线外标法定量。40种非法添加药物组分均具有较好线性关系,定量限为3~20μg/kg,回收率范围为76.5%~106.8%,相对标准偏差均小于15%。本研究方法简单、快速,筛查范围涵盖种类广,方法灵敏度高,适用于批量食疗膳食样本中多种非法添加药物组分的快速筛查检测。

高分辨质谱法对坚果类食品中55种真菌毒素的快速筛查和确证

旨在建立QuEChERS-超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱快速筛查和确证坚果类食品中55种真菌毒素的方法。试样用1%乙酸乙腈提取,改进的QuEChERS法净化,经Accucore RP-MS色谱柱分离,通过高分辨质谱一级全扫描(Full-MS)和二级扫描(dd-MS^(2))进行定性、定量分析。检测的55种真菌毒素方法检出限为0.05~7.5μg/kg,定量限为0.1~15μg/kg;在最低点与最高点相差20倍浓度范围内有良好的线性关系,r^(2)≥0.990;55种真菌毒素在不同基质和不同浓度水平的加标回收率为70.3%~120.0%,相对标准偏差为0.3%~18.4%(n=6)。本方法灵敏度高、重现性和稳定性良好,可满足坚果类食品中多种真菌毒素的高通量快速筛查和定量检测。

超高效液相色谱-高分辨质谱法筛查婴幼儿配方奶粉中17种头孢菌素类药物残留

建立了一种快速筛查婴幼儿配方奶粉中17种头孢菌素类药物残留的超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q-Orbitrap HRMS)分析方法。奶粉样品经水溶解后,使用乙腈提取除去蛋白质等杂质,经低温高速离心后可达到净化样品的目的。选用C8色谱柱对待测物进行分离,在Q Exactive高分辨质谱Full MS/ddMS2(data-dependent MS2)扫描模式下采集数据进行定性定量分析。17种目标物在5~200μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r^2)均大于0.99,检出限0.006 0~0.040μg/L,定量限0.71~4.6μg/kg,平均回收率69.6%~101.4%,相对标准偏差(RSDs)均小于10%。该法操作简单,重现性好,分辨率高,适用于婴幼儿配方奶粉中17种头孢菌素类药物残留的定性、定量筛查。

超高效液相色谱-高分辨质谱法快速筛查水产品中邻苯二甲酸酯和酚类环境雌激素

目的建立超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱法同时快速筛查和分析水产品中14种邻苯二甲酸酯以及3种酚类(壬基酚、辛基酚和双酚A)环境雌激素的分析方法。方法样品经乙腈提取后,经Silica/PSA固相萃取小柱净化,用ACQUITY UPLC@BENC_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm)分离,以甲醇和0.01%氨水为流动相进行梯度洗脱,采用静电场轨道阱高分辨质谱正负子切换FullMS/ddMS^2扫描方式同时测定17种环境雌激素。以保留时间和全扫描获得的化合物的精确质量数,实现对目标物的快速筛查;以自动触发采集的二级质谱图进行定性确证。结果 17种化合物的精确质量数相对质量偏差小于5×10^(-6);线性良好,相关系数(r^2)大于0.99;该方法的检出限≤5μg/kg,回收率为70.6%~114.3%,相对标准偏差(relative standard deviations,RSDs)为5.5%~14.3%。结论该方法适用于水产品中多种环境雌激素的高通量快速筛查和定量分析。

食品安全未知化学性风险快速筛查确证技术研究进展

食品安全未知化学性风险,指食品安全标准规定之外的、尚未被认知的化学性风险隐患,是当前影响食品安全的重要问题,也是食品安全监管的重点。本文从通用型前处理技术、高通量仪器筛查确证技术以及筛查确证数据库三方面,系统阐述食品安全未知化学性风险快速筛查确证技术的现状和成果,并对该领域未来的研究趋势作出展望。