G-蛋白偶联受体的功能测定和高通量药物筛选

G 蛋白偶联受体家族是药物开发中最大的一类药物靶点 ,高通量药物筛选是开发药物早期阶段的最重要工具之一。根据G 蛋白偶联受体与配体结合及激发的信号通路 ,人们设计了各种可行的功能测试方法 ,用于G 蛋白偶联受体为药靶的高通量药物筛选 ,如 :微体积荧光数字图像测定技术 (Fluorometicmicrovolumeassaytechnology ,FMAT)、荧光偏振 (Fluoresencepolarization ,FP)、竞争性ELISA (Com petitiveenzyme linkedimmunosorbent)、闪烁邻近测定法(Scintillation proximityassay ,SPA)、载黑色素细胞测定法(Melanophoreassay)、报告基因测定法 (Reportergeneassay)和钙离子测定法等测定方法。在这些方法中 ,报告基因测定法和钙离子测定法占了主导地位。非放射性、无需底物和辅助剂的报告基因测定方法和荧光钙离子指示剂的钙离子测定方法可能是将来G

高通量药物筛选生物活性分析技术研究进展

A variety of technologies continue to develop for high throughput screening This review summarized recent advances of bioassay techniques used in high throughput screening The principles, applications, characteristics and other parameters of these methods were described such as homogeneous time resolved fluorescence, fluorescence polarization, fluorescence resonance energy transfer, fluorescence correlation spectroscopy and scintillation proximity

细胞水平的高通量药物筛选技术研究进展

目的介绍细胞水平的高通量筛选技术研究进展。方法根据近年来文献,综述细胞水平的高通量技术发展趋势和使用技术进展。结果细胞水平筛选是在活细胞自然条件下,接近体内的生化过程,且可以做到多靶点、多指标检测,满足在药物发现早期对药物的综合评价,缩短药物发现周期。结论细胞水平的高通量筛选技术具有广阔前景。

高通量药物筛选中的荧光微球

简要介绍了邻近闪烁分析技术及由其发展而来的Alphascreen分析技术 ,对其中使用的荧光微球的要求、特点作了介绍 ,并按荧光物质在微球中所处的位置对荧光微球的制备方法作了较为详细的讨论。

维甲酸受体为靶点的高通量药物筛选细胞模型的建立

目的建立绿色荧光蛋白(GFP)标记的以维甲酸受体为靶点的高通量药物筛选细胞模型,用于筛选治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)、银屑病、痤疮以及肿瘤的新型药物。方法用分子生物学的方法,构建含有8个串连维甲酸受体应答元件(RARE)并连接报告基因E-GFP的重组载体。将体外培养的细胞株用该重组载体进行稳定转染,然后进行单克隆培养,最终挑选出敏感、高效、稳定表达的单克隆细胞,用于筛选针对维甲酸受体的小分子有机药物。结果建立了高效的药物筛选细胞模型。此模型筛选方法简便,适用范围广,灵敏度高,结果稳定。结论挑选出的细胞株作为药物筛选模型可用于大规模高通量药物筛选。

高通量药物筛选活性数据的计算机处理

目的 :论述高通量药物筛选生物活性数据处理过程中 ,为完成活性数据的处理所进行的数据采集、加工、存贮及其管理原则与方法。方法 :以光诱导法筛选抗氧化剂为例 ,对中国医学科学院药物研究所国家药物筛选中心的高通量药物筛选的活性数据的处理过程及方法进行论述 ,阐述药物筛选活性数据的处理方法。结果 :明确了处理药物筛选活性数据的着眼点及一般过程 ,为提高数据处理的效率、增加其科学性提供了一条切实可行的措施。结论 :生物活性数据的准确、快速处理是通过高通量药物筛选快速发现药物的需要 ,其正常进行解决了高通量药物筛选大量数据处理的技术问题。

星形胶质细胞形态学观察在高通量药物筛选水通道蛋白4抑制剂中的应用

目的：探讨星形胶质细胞形态学观察在高通量药物筛选水通道蛋白4（AQP4）抑制剂中的应用，为脑水肿和其他水转运障碍疾病的治疗提供理论依据。方法：应用药物库和原代培养的人星形胶质细胞，以AQP4 siRNA转染细胞后的形态学改变和阻抑蛋白表达作参照，观察药物对星形胶质细胞形态学改变的影响，Western blot方法检测能明显改变细胞形态的靶药物对AQP4蛋白表达的影响，并测定靶药物作用剂量下细胞ATP活性。结果：洛伐他汀、胍那苄和米安色林在12～24h内能明显改变人星形胶质细胞形态，减低AQP4蛋白表达，与AQP4的siRNA转染细胞4d后的形态改变和蛋白阻滞效果类似，靶药物作用剂量下对细胞ATP活性无影响。结论：星形胶质细胞的形态学观察可作为大规模药物筛选的初步指标，本研究筛选出的靶药物可能是潜在的AQP4抑制剂。

高通量药物筛选在新药研究中的应用

The techniques used in the field of drug discovery have been quickly developed during the past decades High throughput screening (HTS) is a new technique in drug discovery with the characteristics of efficiency, huge scale and automatically operation The assay methods used in HTS are based on the molecular targets and cells Screening results obtained from these methods indicate not only the bioactivities of compounds (samples) but also the mechanisms of actions of the compounds (samples) HTS has altered the strategy of drug

高通量药物筛选技术的研究现状及光学编码技术在其中的应用

高通量药物筛选是创新药物研究的重要内容,本文综合介绍了高通量药物筛选的研究现状及发展趋势,及目前遇到的一些问题,如随着样品的体积达到微升量级时,目前所采用的孔板筛选遇到了一些难以克服的障碍,使化合物和药物靶点的相互作用难以进行等。针对这些问题,本文介绍了一种新的以自编码光谱识别微球为基础的新型高通量药物筛选技术在高通量药物筛选中的应用,同时简要介绍了我们目前所做的一些工作。

高通量药物筛选模型

介绍了可用于药物筛选的 3种新的快速高通量筛选方法 ,包括基于反酵母双杂交的筛选系统 ;细胞平台伤的高通量筛选系统以及动物水平的筛选系统。并对其应用原理 。

高通量药物筛选中靶分子固定化数学物理模型的建立

通过对高能量药物筛选基本过程的分析 ,探索了靶分子固定化可能对筛选质量构成的影响 .从分子相互作用看 ,实际的过程远较理想的情况复杂 .分子间存在的静电力、疏水作用力及氢键力能对固定化的机理构成较大影响 ,甚至可能诱发多层吸附的固定化模式 .基于固定化过程中可能存在的靶分子与靶分子、靶分子与微球、体相与表面相之间的相互作用 ,构筑了相应的数学物理模型 ,为实际的筛选工作提供了可参考的理论依据 .

流式细胞仪高通量药物筛选技术的建立和应用

目的建立流式细胞仪高通量药物筛选技术,并用于筛选逆转肿瘤细胞多药耐药性的药物。方法使用流式细胞仪高通量附件,建立高通量药物筛选技术;以罗丹明123作为荧光指示剂,利用耐药HR-20活细胞筛选逆转耐药性的药物。结果通过阳性药物,确定了逆转耐药性药物筛选模型的Z′因子为0.88。应用此模型筛选8 000多种化合物。结论流式细胞仪高通量药物筛选技术是一种精确度较高、稳定性较好、有效的高通量药物筛选方法。

高通量药物筛选技术进展及新药开发策略

新药研发过程中．通过筛选而获得具有生物活性的先导化合物．是创新药物研究的关键．目前药物筛选模型已经从传统的整体动物、器官和组织水平发展到细胞和分子水平。创新药物的发现都离不开采用适当的药物作用靶点对大量化合物样品进行筛选．而且筛选规模越大，发现新药的机会就越多。随着计算机技术、生物芯片、蛋白质组学、组合化学等的发展．高通量药物筛选技术应运而生。高通量筛选体系在创新药物筛选中的应用是新药开发研究的一个重要领域。

基于JAK/STAT信号通路的高通量药物筛选细胞模型的建立

目的 建立基于JAK STAT信号通路的高通量药物筛选细胞模型 ,筛选调节免疫系统、造血系统和抗肿瘤药物。方法 构建以串连的多个STAT的DNA结合序列为调控序列 ,以荧光酶基因作为报告基因的表达载体。通过将该载体分别转入体外培养的不同细胞系中使之稳定表达 ,建立具有激活STAT活性的药物筛选模型 ,并利用多个抗过敏和抗肿瘤药物样品进行检测。结果 建立多株药物筛选细胞模型 ,筛选方法简便 ,操作容易 ,灵敏度高 ,结果稳定。

基于流感病毒PA_N蛋白的高通量药物筛选

流感病毒的PA N蛋白高度保守,并且具有核酸内切酶活性,是抗流感药物研发的潜在靶点。通过高通量药物筛选体系,从372种化合物中筛选出3种对流感病毒H5N1的PA N蛋白抑制作用较好的化合物。将这3种化合物分别与PA N蛋白进行分子对接模拟,结果显示它们均可以与PA N蛋白活性位点的二价金属离子和氨基酸残基相互作用,从而为抗流感病毒药物的发现提供了先导化合物。

高通量药物筛选在新药研发中的应用

本文介绍了高通量药物筛选的原理,体外筛选模型及常用的检测方法和技术,并结合药物研究过程论述了高通量药物筛选在新药研发中的过程,分析了其对药物开发策略的转变和影响。

基于酵母水平的高通量药物筛选

随着后基因组时代的到来,越来越多的药物靶标蛋白将会被发现,基于靶标蛋白设计出的化合物也将大量涌现,高通量药物筛选日趋重要。酵母基因组的易操作性及其简单稳定的培养条件,使得该真核微生物成为一种理想的药物筛选工程细胞。本文讨论了选择酵母系统进行细胞水平筛选的优缺点,并从基于靶点和表型两种筛选模式对酵母水平的高通量药物筛选做一总结。