花生茎叶中黄酮类化合物的高速逆流色谱分离与助睡眠活性分析

开展花生茎叶中黄酮类化合物的高效分离与活性分析研究。采用高速逆流色谱技术进行分离纯化,并结合分子对接技术评价其助睡眠活性。筛选最佳溶剂体系为正己烷/乙酸乙酯/甲醇/水(5∶5∶2∶8,5∶5∶3∶7,5∶5∶5∶5,v/v),通过梯度洗脱分离得到两种化合物,经质谱和核磁结构鉴定为大豆苷元和芒柄花黄素。采用分子对接分析大豆苷元和芒柄花黄素对失眠相关的两种蛋白受体(GABRA1和FOS)均有较好的亲和力,相互作用力主要为氢键,两种化合物具有助睡眠的潜在活性。建立了花生茎叶中大豆苷元和芒柄花黄素的高速逆流色谱分离方法,采用分子对接证实两种化合物具有助睡眠的潜在活性,为花生茎叶中化学成分的分离及进一步开发助睡眠活性化合物提供了参考。

高速逆流色谱(HSCCC)在食品色素制备中的应用

综述了高速逆流色谱在食品色素制备中的应用情况,包括溶剂选择、色素种类等。

活性引导结合高速逆流色谱分离蓝莓活性成分及其与α-葡萄糖苷酶的相互作用

基于活性引导结合高速逆流色谱(HSCCC)技术,分离蓝莓中具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的组分。首先,经不同溶剂提取后,活性成分在水中得到富集;其次,通过HSCCC分离水提物,得到6种组分,其中F4对α-葡萄糖苷酶的抑制率显著高于其它几种;再次将F4采用Sephadex LH-20葡聚糖凝胶纯化,得到高纯的组分Ⅰ;最后通过紫外光谱、傅里叶红外光谱、高效液相色谱-质谱联用及核磁技术鉴定组分Ⅰ为矢车菊-3-O-葡萄糖苷(C3G),纯度为95.06%。此外,采用多光谱扫描和分子对接技术对C3G与α-葡萄糖苷酶的相互作用进行表征。研究发现C3G与α-葡萄糖苷酶通过氢键自发结合形成复合物。与C3G复合后,α-葡萄糖苷酶的二级结构发生不同程度的变化,其中α-螺旋和β-转角降低,β-折叠和不规则卷曲增加。分子对接模拟发现C3G与残基Leu 313、Ser 157、Tyr 158、Phe 314、Arg 315和Asp 307以氢键结合,并与周围4个疏水残基存在疏水作用,共同维持复合物结构。本研究结果对开发2型糖尿病功能性食品具有重要意义。

高速逆流色谱(HSCCC)在丝瓜苷类化合物提取中的应用

丝瓜正丁醇相采用AB-8大孔树脂,利用水和30%、50%、70%和95%的乙醇溶液洗脱提纯得总糖苷。30%洗脱部分以氯仿-甲醇-异丙醇-水(5:6:1:4)为溶剂系统采用高速逆流色谱分离得到4个酯苷类化合物和一个酸,分别为:阿魏酰-β-D-葡萄糖(Ⅰ);1-O-p-香豆酰-β-D-葡萄糖(Ⅱ);对羟基苯甲酰葡萄糖(Ⅲ);咖啡酰-β-D-葡萄糖(Ⅳ);香豆酸(Ⅴ)。50%洗脱部分以氯仿-甲醇-水(13:7:8)为溶剂系统采用高速逆流色谱分离得到2个黄酮苷类化合物,分别为:香叶木素-7-O-β-D-葡萄醛酸苷甲酯(Ⅵ);芹菜素-7-O-β-D-葡萄醛酸苷甲酯(Ⅶ)。70%洗脱部分以氯仿-甲醇-水(13:7:8)为溶剂系统采用高速逆流色谱分离得到1个皂苷化合物丝瓜皂苷H(Ⅷ)。化合物Ⅰ-Ⅶ都是首次从该植物中分离得出。

高速逆流色谱分离制备高纯度牛蒡多酚及其抗氧化研究

以牛蒡为原料来建立高纯度牛蒡多酚高速逆流色谱的制备分离方法。利用乙醇提取和超声波提取结合的方法,旋蒸浓缩后得到牛蒡多酚粗提物;以乙酸乙酯-正丁醇-水(3:4:5,v/v)为高速逆流色谱(High-speed Countercurrent Chromatography,HSCCC)分离的最佳溶剂体系,在流速2 m L/min、转速800 r/min下制备分离多酚单元组分。通过2次HSCCC分离即可从牛蒡粗提物中分离得到绿原酸、咖啡酸和对香豆酸,其纯度分别为80.5%、82.7%和85.6%;按照1,1-二苯基-2-三硝基苯肼和2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸自由基去除率由大至小分别为:组分I(绿原酸)、组分II(咖啡酸)、组分III(对香豆酸)。该方法简便、快速、高效,可用于牛蒡子苷元的快速分离制备,为牛蒡子的开发利用提供了一些参考依据。

高速逆流色谱(HSCCC)技术与色谱指纹谱

介绍了高速逆流色谱 (HSCCC)技术与色谱指纹谱的研究近况 ,HSCCC的工作原理 ,技术特点。HSCCC技术在中草药分离分析方面尚属起步阶段 ,随着中药产业的迅猛发展 ,HSCCC技术在中草药分离、分析方面的应用前景广阔。

应用高速逆流色谱(HSCCC)分离纯化山茱萸中的没食子酸

应用高速逆流色谱 ( HSCCC)分离山茱萸中的没食子酸并结合波谱技术进行结构鉴定。经过一次逆流色谱分离 ,可以得到纯度在 70 %以上的没食子酸 ,第二次分离即可使其纯度达到 97%以上。

高速逆流色谱(HSCCC)技术在中药分离分析中的应用研究

应用HSCCC技术开展中药化学成分的分离、分析研究,制备中药化学成分标准品,制备筛选活性成分样品及探索"中药饮片的标准化研究"等,为中药质量标准研究,拟提供一种性能可靠、分析成本低、易于操作的实用色谱技术。

高速逆流色谱分离制备茶粕中茶皂素单体

目的:建立一种高效、快速的分离制备茶皂素单体的高速逆流色谱方法。方法:微波辅助提取茶皂素后,用D-101大孔树脂初步纯化,所得粗品经高速逆流色谱分离纯化,乙酸乙酯-正丁醇-水(1:4:4,V/V,含体积分数3%的乙酸)为两相溶剂系统,转速800r/min、流速1.5mL/min、检测波长267nm、进样量100mg,所得分离收集液经高效液相色谱法检测。结果:从茶皂素粗提物中分离得到纯度分别为99.1%和94.5%的两种茶皂素单体,经干燥称得其质量分别为11mg和15mg。结论:该方法制备茶皂素单体简便、快速,所得产物的纯度高,为茶皂素的分离纯化提供了一种新途径。

百合磷茎中Regaloside A、Acetylregaloside C与Regaloside B高速逆流色谱分离及生物活性研究

建立了高速逆流色谱分离制备药食同源植物百合磷茎中3个酚酸甘油酯苷的方法,同时测定了化合物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除作用、脂质的过氧化抑制作用及对α-淀粉酶活性的促进作用。以乙酸乙酯-正丁醇-水(0. 5%乙酸,3∶1. 5∶5,体积比)为溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,从250 mg百合磷茎提取物中分离得到4. 2 mg纯度为96. 2%的化合物1,2. 3 mg纯度为95. 1%的化合物2,5. 8 mg纯度为98. 8%的化合物3。经质谱及核磁共振鉴定化合物1~3分别为王百合苷A(Regaloside A)、乙酰化王百合苷C(Acetylregaloside C)、王百合苷B(Regaloside B);活性研究表明,Acetylregaloside C对DPPH自由基清除作用及脂质过氧化抑制作用均最强,Regaloside A与Regaloside B对DPPH自由基清除作用很弱,对脂质过氧化有一定的抑制作用且相近,化合物抗氧化作用强弱为:化合物2> 1≈3。化合物在不同浓度下对α-淀粉酶活性的促进作用具有一定差异,但化合物间无显著差异。

高速逆流色谱技术制备石杉碱甲单体

目的从千层塔植物提取物中分离制备石杉碱甲单体。方法利用高速逆流色谱技术,通过寻找合适的两相溶剂体系及工艺参数,研究及讨论石杉碱甲分离制备的新方法。结果以n-Hexane/n-BuOH/H2O(4∶1∶5,V/V/V)为两相溶剂体系,在优化的工艺参数条件下,利用高速逆流色谱技术,获得了单体纯度为98.6%(HPLC)的石杉碱甲单体。结论利用高速逆流色谱技术成功地从千层塔植物提取物中分离制备了纯度高于98%的石杉碱甲单体。

高速逆流色谱制备分离紫甘薯花色苷

采用高速逆流色谱法分离纯化紫甘薯花色苷。以正丁醇-乙酸乙酯-0.5%乙酸(3∶1∶4,V/V)为溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,流速2 mL/min,进样量300 mg,分离得到两种花色苷的混合物;混合物再以0.2%三氟乙酸-正丁醇-甲基叔丁基醚-乙腈(6∶5∶2∶1,V/V)为溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,流速1.5 mL/min,进样量100 mg,分离得到纯度分别为98.5%和96.7%的两个花色苷单体组分。通过紫外-可见光谱、质谱、核磁等技术进行结构鉴定,确定组分1为3-O-{6-O-(E)-咖啡酰-2-O-[6-O-(E)-对羟基苯甲酰-β-D-吡喃葡糖基]-β-D-吡喃葡糖苷}-[5-O-(β-D-吡喃葡糖苷)]芍药素,组分2为3-O-{6-O-(E)-咖啡酰-2-O-[6-O-(E)-阿魏酰-β-D-吡喃葡糖基]-β-D-吡喃葡糖苷}-[5-O-(β-D-吡喃葡糖苷)]芍药素。实验从450 g紫甘薯中获得63 mg组分1和48 mg组分2,为紫甘薯花色苷分离提供了高效、稳定、可靠的方法。

高速逆流色谱研究进展

综述了近年来高速逆流色谱 (HSCCC)在分析、半制备和制备分离天然产物、蛋白质、抗生素、无机物等领域的研究和应用进展 ,总结了适用于HSCCC的溶剂体系 ,并展望了HSCCC与质谱联用。

白花败酱草中异牡荆苷和异荭草苷的高速逆流色谱分离和制备

应用高速逆流色谱分离制备白花败酱草中的异荭草苷和异牡荆苷,以乙酸乙酯∶乙醇∶水(4∶1∶5)为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,流速2.0 mL/m in,主机800 r/m in,检测波长254 nm。以此分离条件经一步洗脱,从300 mg白花败酱草粗提物中制备得到异荭草苷24.1 mg和异牡荆苷49.8 mg,产物纯度经HPLC检测高达98.0%,结构经UV、IR、MS1、H NMR和13C NMR鉴定,二者均为首次从败酱属植物中分离得到。

高速逆流色谱制备分离中药黄柏中的生物碱

利用高速逆流色谱对传统中药黄柏中的生物碱类活性成分进行了制备分离。两相溶剂分离系统采用氯仿 甲醇 0 5mol/LHCl(体积比为 2∶1∶1) ,并对制备物进行了薄层色谱分析。证实了生物碱成分 ,检出了小檗碱。

夏天无生物碱的高速逆流色谱分离纯化

采用pH-区带精制逆流色谱与常规高速逆流色谱相结合的方法快速分离纯化夏天无总生物碱。利用pH-区带精制逆流色谱对夏天无总生物碱进行分离,以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(5∶5∶2∶8,V/V,上相加5mmol/L三乙胺,下相加5mmol/LHCl)为溶剂系统,上样量3.0g,分离得到1个混合物和3个高纯度的生物碱单体:原阿片碱(375mg)、苏元胡碱甲(362mg)和比枯枯灵(246mg),其纯度分别为97.5%,95.6%和97.1%。所得混合物850mg经常规高速逆流色谱二次分离,以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1∶0.8∶1.1∶1,V/V)为溶剂系统,得到比枯枯灵(105mg)和四氢巴马亭(470mg)单体,纯度分别为99.1%和99.7%。从该药材分得苏元胡碱甲,两种制备分离模式相结合,提高了夏天无生物碱的分离效率。

罗布麻中黄酮的超声波强化提取及高速逆流色谱分离纯化

本研究采用超声波强化提取罗布麻中总黄酮,选择乙醇浓度、超声功率、超声时间、料液比为因素进行正交试验优选出超声提取的最佳工艺条件:60%浓度乙醇,料液比为1:15,在300W的超声波下超声提取10min。此条件下,提取率达90%以上。将提取后的总黄酮应用高速逆流色谱进行分离纯化,两相溶剂系统为乙酸乙酯:乙醇:水:乙酸(4:1:5:0.25,V/V),进样量为150mg,得45mg纯度为98.6%的罗布麻甲素。

高速逆流色谱分离与鉴定鹿药中黄酮类化合物

采用高速逆流色谱(HSCCC)与其它色谱联用的方法分离纯化鹿药中的化学成分,得到5个黄酮类化合物:5,7,3′,4′-四羟基-3-甲氧基-8-甲基黄酮(1)、8-甲基木犀草素(2)、3′-甲氧基木犀草素(3)、木犀草素(4)和槲皮素(5),它们均为首次自该种及该属植物中分离得到。HSCCC以V(氯仿):V(甲醇):V(水)=4:3:2混合液为溶剂,上相为固定相,下相为流动相,分离纯化得到3个分别含化合物1,4和5的主要部分,经HPLC检验纯度分别为98.3%,96.7%和95.3%;还有1个含有化合物2和3的较纯部分,通过SephadexLH-20柱色谱,以V(甲醇):V(水)=1:1混合液洗脱将二者分离。通过理化性质及紫外、红外、质谱、核磁等波谱分析确定化合物结构。

高速逆流色谱法分离纯化黄芪中的芒柄花素和毛蕊异黄酮

采用高速逆流色谱法(HSCCC),以正己烷氯仿甲醇水组成二相系统作为固定相与流动相,对黄芪的乙酸乙酯粗提物进行了分离纯化。结果发现:以正己烷氯仿甲醇水(体积比为1.5∶3∶3∶2)组成的系统可以从黄芪的乙酸乙酯粗提物中分离出毛蕊异黄酮,纯度可达95%以上,并可以初步纯化芒柄花素;接着用正己烷氯仿甲醇水(体积比为4∶4∶5∶4)组成的系统进一步纯化芒柄花素,其纯度达95%以上。利用该方法,可以对中药黄芪中的异黄酮进行快速的分离和纯化。

高速逆流色谱在植物有效成分分离中的应用

高速逆流色谱在植物有效成分分离中的应用袁黎明（云南师范大学化学系昆明６５００９２）傅若农（北京理工大学化工与材料学院北京１０００８１）张天佑（北京市新技术应用研究所北京１０００３５）高速逆流色谱（Ｈｉｇｈ－ｓｐｅｅｄＣｏｕｎｔｅｒｃｕｒｅｎｔＣｈｒ...