和田羊毛囊KAP7基因的原核表达及其生物信息学分析

为了研究绵羊毛囊角蛋白基因对异质毛绵羊羊毛性状、品质的影响,将和田羊毛囊高Gly/Tyr蛋白中的角蛋白关联蛋白KAP7基因克隆到原核表达载体pET28a(+)中,然后将重组质粒pET28a(+)-KAP7转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导目的蛋白的表达,并对表达的蛋白进行了SDS-PAGE检测。进行了核苷酸与氨基酸序列分析,并对4个物种的KAP7基因进行了聚类分析。结果表明:成功构建了和田羊毛囊角蛋白原核表达载体pET28a(+)-KAP7,KAP7基因大小为258 bp;并在原核细胞中表达了KAP7成熟蛋白,SDS-PAGE检测在10 ku的位置有特异性表达蛋白条带,与预期的KAP7蛋白大小一致,该基因编码85个氨基酸;将其与绵羊、驯鹿、牦牛的核苷酸序列进行比对,和田羊与GenBank中不同绵羊品种的亲缘关系都比较近,同源性分别为100%、99.6%和98.4%。与牦牛的同源性为96.8%,有14个bp的差异,与驯鹿的同源性为95.7%。