化妆品眼刺激性评价中角膜损伤生物标志物研究

针对离体兔眼(IRE)试验只适用于筛选严重眼刺激性(UN GHS第1类)的缺陷,建立IRE试验结合基于细胞活性生物标记物的荧光染色方法用于评价化妆品眼刺激性。通过IRE试验条件的探索,包括测试浓度和后暴露时间,对市售化妆品进行眼刺激性检测,同时对角膜进行冰冻切片并染色,鬼笔环肽对丝状肌动蛋白进行染色,DAPI染色胞核后,测量损伤深度(depth of injury,DOI),并比较体外DOI、体内DOI及Draize试验结果,建立预测模型。结果显示通过DOI检测,可对化妆品无刺激性至中刺激性进行检测,表明在离体兔眼中,基于细胞活力的DOI测量可作为角膜损伤的生物标志物,适用于化妆品眼刺激性的评价。

基于细胞活性生物标记物的BCOP方法预测洗发水、沐浴露、洁面类化妆品的眼刺激性

建立牛角膜浑浊和渗透性(BCOP)结合基于细胞活性生物标记物的荧光染色用于评价化妆品眼刺激性的方法。采用BCOP法对市售的洗发水、沐浴类和洁面类化妆品进行眼刺激性检测,同时对角膜进行冰冻切片并染色,鬼笔环肽对胞内的f-actin(filamentous actin)丝状肌动蛋白进行染色,DAPI染色检测细胞核后,测量损伤深度(depth of injury,DOI),依据BCOP测试结果、Draize试验结果及DOI,建立预测模型。结果表明,通过DOI检测,可对化妆品轻刺激性和中刺激性进行区分,DOI检测显然能够为眼刺激性分类提供更可靠的依据,适用于化妆品眼刺激性的评价。