野生菌中鹅膏毒肽和鬼笔毒肽检验方法及样品处理技术研究进展

综述鹅膏毒肽和鬼笔毒肽检验方法及野生菌样品处理技术研究进展。食用蘑菇中毒事件多为误食鹅膏菌毒素所致,引起急性肝毒性中毒的致命蘑菇毒素主要为鹅膏毒肽和鬼笔毒肽。蘑菇毒素检测样品处理技术主要包括蛋白沉淀法、固相萃取技术、在线净化技术、免疫亲和技术等,检测方法主要包括快速检测法、毛细管电泳质谱联用法、高效液相色谱法、液相色谱质谱联用法等。快速检测法操作简便,适用于蘑菇毒素现场检测;毛细管电泳质谱联用法有高分辨率和高灵敏度的特点;高效液相色谱法在基层实验室广泛应用于蘑菇毒素的检测分析;液相色谱质谱联用法可准确的对蘑菇毒素进行定性和定量分析。通过比较这些技术和方法,可对实验室根据相对应的样本建立简单、快速、准确检测鹅膏毒肽的方法提供重要参考依据。

滇黔桂鬼笔科研究

本文报道了来自滇黔桂3个省区的鬼笔科4属16个种及变种,包括竹荪属5个分类单位,内鬼笔属1个,蛇头菌属2个和鬼笔属8个。它们占了全国总数的72.7%。显示了这些地区真菌研究的重要性和该地区真菌的多样性。文中有这些种类的详细描述及线条图。

五棱散尾鬼笔——陕西省新发现简报

在陕西省杜陵国家遗址公园发现1种鬼笔目真菌,经鉴定确认为五棱散尾鬼笔Lysurus mokusin(Cibot:Pers.)Fr.。查阅相关文献发现,此前该菌在陕西省内未有报道和文献记载,因此,本次调查发现增加了该菌在我国种质资源分布的地区。

白鬼笔仿野生栽培技术

白鬼笔（Phallus impudicus L. ex．Pers．），又称竹下菌、男荪、无裙荪等，为担子菌亚门、腹菌纲、鬼笔目、鬼笔科、鬼笔属真菌。自然条件下，于林下腐殖质层中单生或群生，其出菇温度较低，子实体开伞在秋冬季节，因此菇农又称其为冬荪，主要分布于贵州、四川、云南、安徽、广东等地[1]。白鬼笔目前在贵州毕节市已有较大面积的人工栽培（图1）。

重脉鬼笔——陕西省新记录种

在对秦岭及周边地区进行大型真菌种质资源考察过程中,在陕西省杜陵国家遗址公园发现一种鬼笔目(Phallales)真菌,经鉴定,确认为重脉鬼笔[Phallus costatus (Penzig) Lloyd]。标本保藏于陕西省微生物研究所秦岭菌物标本馆。查阅相关文献后发现,此前该菌在陕西省内未见文献记载。因此,这一发现扩增了该菌在我国种质资源分布地区。

白鬼笔菌蕾的生长发育及出菇条件初探

通过对野生白鬼笔菌蕾进行无土处理及有土栽培分组,研究了不同大小的菌蕾在不同的温度条件下的生长发育及出菇情况。无土处理条件下,菌蕾直径过小时(d=0.2 cm^2.0 cm),在4℃~30℃范围都不能长出孢托,而直径大小在2.0 cm^6.0 cm的菌蕾在4℃~30℃范围内能够长出孢托,出菇的时间随着菌蕾的直径增大和温度的升高而提前。有土栽培条件下,不同直径大小(d=0.2 cm^6.0 cm)的菌蕾最终都能够长出孢托,原来较小的菌蕾经过一段时间的生长发育,到一定大小(d=3.5 cm^5 cm)后才能长出孢托出菇。所有结果表明,当菌蕾生长发育到一定阶段大小后,其长出孢托与有无土处理的关系不大,并且在4℃低温条件下都能出菇。

白鬼笔生物学特征研究

通过野外调查、菌种分离及室内试验观察,对白鬼笔生态、形态与结构特征进行了研究.结果表明,在豫南,白鬼笔多发生于春秋季节,其子实体群生于腐叶层较厚,土壤为酸性的杂木林内,子实体由菌盖、菌柄、菌托等部分组成.菌盖髓部由厚壁菌丝和囊状细胞组成.子实层由担子、担孢子及幼担子组成,每担子具4个担孢子,担孢子杆状,平滑.在PDA培养基上,菌落具菌丝束,菌丝束由营养菌丝和粗糙菌丝构成,营养菌丝无色透明,有分支,具横隔,有明显的锁状联合.粗糙菌丝无色有隔,具锁状联合,且有膨大的纺锤状细胞,纺锤状细胞内均含有一枚球状体.

短裙竹荪和白鬼笔18SrDNA部分序列及其系统学意义

以短裙竹荪 [Dictyophoraduplicata(Bosc.)Fisch.]和白鬼笔 (PhallusimpudicusL.:Pers)作为鬼笔目 (Phal lales)的代表种 ,将其部分 1 8SrDNA序列与担子菌门 (Basidiomycota)其他科目 1 2个代表种已知的相关序列进行对比分析 ,以接合菌总状毛霉 (MucorracemosusFres.)为外类群构建系统树 ,探讨鬼笔目在系统分类学中的地位及其亲缘关系。结果表明 ,鬼笔目中竹荪属 (Dictyophora)与鬼笔属 (Phallus)的关系最为密切 ;其次它们与笼头菌科 (Clathraceae)的三叉鬼笔属 (Pseudocolus)关系较近 ,这与传统形态学分类系统一致。此外 ,鬼笔目与J櫣ｌｉｃｈ分类系统中的钉菇目 (Gomphales)、高腹菌目 (Gautieriales)、枝瑚菌目 (Ramariales)及鸡油菌目 (Cantharel lales)的关系较其他目更为密切 ,而与牛肝菌目 (Boletales)和腹菌类的马勃目 (Lycoperdales)及硬皮马勃目 (Scle rodermatales)的亲缘关系则相对较远。这一结果支持了Kirk等将钉菇目、高腹菌目和枝瑚菌目划为鬼笔目的分类观点。

在线液相色谱-二极管阵列检测器-串联质谱法检测野生菌中鹅膏毒肽和鬼笔毒肽

建立了在线液相色谱-二极管阵列检测器-串联质谱技术(LC-DAD-MS/MS)同时测定野生菌中多肽类蘑菇毒素(鹅膏毒肽和鬼笔毒肽)的分析方法。样品经甲醇提取,水稀释后,在碱性条件下用XBridge^(TM) BEH C_(18)柱(150m m×3.0 m m,2.5μm)分离,并先后用DAD和MS/MS检测。使用碱性流动相能够实现5种多肽类蘑菇毒素在15 m in内达到基线分离,同时又能有效抑制质谱加钠峰[M+Na]^+的响应信号,保证检测的稳定性和灵敏度。5种蘑菇毒素在0.05~500 mg/kg范围内线性关系良好,相关系数(r)>0.99;检出限为0.005~0.02 mg/kg。通过实际样品检测,证明该法操作简单、快速,灵敏度高,宽的定量检测线性范围能满足实际样品中蘑菇毒素含量变化大的特点。

黔产白鬼笔不同部位品质分析与评价

以黔产白鬼笔(Phallus impudicus L.)为研究对象,从营养成分、质构特性和微观特征等方面对其菌盖、菌柄和子实体三个部位进行品质分析和营养评价。结果表明,白鬼笔蛋白质含量在16.30 g/100 g~19.50 g/100 g之间,且菌柄>子实体>菌盖,脂肪含量在1.30 g/100 g左右;其不同部位均含有16种氨基酸,必需氨基酸含量占总氨基酸含量的45%,其中谷氨酸和蛋氨酸含量最高;呈味氨基酸总量在7.88 g/100 g~9.31 g/100 g之间,且菌柄>子实体>菌盖。蛋白质评价结果表明,赖氨酸是白鬼笔的第一限制氨基酸;除NI外,SRCAA值、与标准蛋白的贴近度U、EAAI、CS的结果均为菌盖>子实体>菌柄。质构检测结果表明,白鬼笔不同部位的最大拉伸力和最大剪切力均是菌柄>菌盖,干品>复水;同时,菌盖的硬度、粘附性、弹性、胶黏性和咀嚼性均大于菌柄,复水后菌盖的硬度、粘附性、胶黏性和咀嚼性均小于菌柄。此外,白鬼笔菌盖和菌柄的微观结构特征存在明显的不同。该研究可以为白鬼笔的合理膳食、标准制定和产品开发提供一定的科学依据。

黔产白鬼笔不同部位提取物的成分分析

目的:通过黔产白鬼笔子实体干品的菌盖、菌柄、菌托3个部位石油醚和乙醇提取物的化学成分研究,寻找并拓展白鬼笔的利用价值。方法:在常温条件下先后用石油醚和乙醇分别对白鬼笔的3个部位进行超声提取,应用气相色谱-质谱联用仪对提取物的化学成分进行研究,气相色谱柱为HP-INNOWAX极性柱,程序升温条件为:60℃保持2 min,以10℃/min升至160℃,保持6 min,以3℃/min升至220℃,保持17 min,用NIST 08谱库进行成分比对。结果:2种提取物共检出67种成分,其中66种成分在白鬼笔的研究中尚未见报道。石油醚提取物共检出35种成分,菌盖、菌柄、菌托3个部分分别检测出24、18、18种成分。乙醇提取物共检出38种成分,菌盖、菌柄、菌托3个部位分别检测出26、28、12种成分。结论:从白鬼笔中检出的顺,顺-9,12-十八碳二烯酸、二丁基羟基甲苯、邻苯二甲酸二异丁酯、异山梨醇、1,2-环戊二酮、α-吡咯烷酮、烟酰胺、9,12-十八碳二烯酸乙酯等具利用价值的成分可为白鬼笔3个部位的开发利用提供科学依据。

超高效液相色谱三重四极杆质谱联用法快速检测尿液和血浆中鹅膏毒肽和鬼笔毒肽

建立了同时快速检测尿液和血浆中3种鹅膏毒肽和2种鬼笔毒肽的超高效液相色谱三重四极杆质谱联用分析方法。尿液样品直接进样,血浆样品经乙腈沉淀除蛋白后,在UPLCHSST3色谱柱上分离,正离子电喷雾多反应监测(MRM)模式检测,基体匹配标准外标法定量。尿液和血浆样品的线性范围分别为2～100和1～100μg/L;加标回收率分别在92.0%～108.0%和85.0%～100.0%的范围内;相对标准偏差为1.0%～22.0%和2.0%～22.0%(n=6);样品的检出限为0.2～1.0μg/L和0.1～0.5μg/L(S/N=3)。本方法灵敏,简单,快速,特异性强。

细胞松弛素B和鬼笔环肽对梨花粉萌发和花粉管生长的影响

以砂梨(Pyrus pyrifoliaNakai)品种今村秋(Imamuraaki)和丰水(Hosui)为材料,分别用光学显微镜和荧光显微镜观察了离体和半活体条件下微丝骨架解聚剂细胞松弛素B(cytochalasin B,CB)和稳定剂鬼笔环肽(phalloidin)对梨花粉萌发和花粉管生长的影响.结果表明:(1)低浓度(10μg/mL)鬼笔环肽能促进花粉萌发和花粉管生长,但高浓度对花粉萌发和花粉管的生长具有抑制作用;CB抑制花粉萌发和花粉管生长,且抑制效应随其浓度的增加而增强.(2)鬼笔环肽处理柱头后进行自花授粉,可明显促进自花花粉萌发和花粉管的生长,而CB处理柱头后异花授粉则抑制异花花粉萌发及其花粉管生长.可见,微丝骨架参与了梨花粉萌发和花粉管生长过程,并参与了梨自交不亲和反应的调节.

土壤与白鬼笔重金属及农药残留污染评价

为了解贵州地区白鬼笔重金属及农药残留污染状况,对大方县白鬼笔种植基地白鬼笔及其种植土壤中Pb、Cd、Cr、Cu、Zn、Hg、As含量及六六六、滴滴涕残留量进行测定,并对其污染程度进行评价。结果表明,白鬼笔种植基地土壤重金属平均含量表现为Cu>Cr>Zn>Pb>As>Cd>Hg,Pb、Cr、As、Zn含量均未超出贵州省土壤背景值和土壤环境质量二级标准极限值,其余重金属含量均不同程度超标;菌托、菌柄、菌盖中重金属平均含量均表现为Zn>Cu>Pb>Cr>Cd>Hg>As,其中Cd、As、Zn含量在菌托、菌柄、菌盖中均未超标,其他重金属在不同组织中发生不同程度超标。白鬼笔及土壤中均未检测出六六六、滴滴涕残留,未受农残污染。从单因子污染指数来看,白鬼笔种植基地土壤中仅Cd的单因子污染指数平均值为1.99,属轻微污染,其他重金属的单因子污染指数平均值均小于1,处于无污染水平;白鬼笔中7种重金属的平均单因子污染指数均小于1,说明其未受到这些重金属的污染。从综合污染指数来看,白鬼笔种植基地土壤受到了轻污染;白鬼笔菌托、菌柄处于非污染水平,菌盖处于轻污染水平。

一羟鬼笔毒肽(PHN)的制备及其毒理研究

利用反相高效液相色谱技术对灰花纹鹅膏菌(Amanita fuliginea)的肽类毒素进行分离,并对保留时间为60.807 min的成分进行了纯化,纯度达到99%.通过环肽检测、紫外光谱和质谱鉴定为一羟鬼笔毒肽(PHN),其相对分子质量为772.36 Da.一羟鬼笔毒肽(PHN)能引起植物细胞坏死,对小白鼠的LD50为1 414μg.kg-1,能引起小白鼠肝脏充血,血液循环衰竭.

黄盖鹅膏中二羟鬼笔毒肽(PHD)的抗肿瘤活性研究

采用MTT法研究了从黄盖鹅膏(Amanita subjunquillea S.Imai)子实体中分离纯化的二羟鬼笔毒肽对胃癌细胞(SGC)和肝癌细胞(SMMC-7721)增殖的体外抑制作用,并对H22荷瘤小鼠进行了体内抗肿瘤试验。结果表明:二羟鬼笔毒肽对SGC和SMMC-7721体外细胞增殖无抑制作用,但对H22荷瘤小鼠有明显的抑瘤作用,剂量为0.3mg/kg时,抑瘤率可达65.15%。

响应面优化微波辅助提取白鬼笔多糖及其抗氧化和抗糖化能力

以白鬼笔为原料,去离子水作为溶媒,研究微波辅助提取白鬼笔多糖工艺并采用响应面法优化其工艺条件。以铁还原力、DPPH自由基清除能力及ABTS+自由基清除能力来评价抗氧化能力,并以晚期糖基化终产物抑制率来评价其抗糖化能力。结果表明:白鬼笔多糖最佳提取工艺条件为微波温度65℃,微波时间10 min,微波功率280 W,料液比1∶30(g/mL),在此条件下白鬼笔多糖提取率为9.03%。白鬼笔多糖具有较强的抗氧化能力和抗糖化能力,可作为一种天然的食品添加剂。

白鬼笔出菇特性研究

对白鬼笔菌蕾破壳生长过程中子实体的变化进行了综合分析。研究表明,白鬼笔在破壳后生长过程中存在三个生长阶段,子实体重量变化不显著,仅有4%左右的下浮,可食用部分只有30%左右,商品折干率仅为5%左右。

辽宁树莓园红鬼笔发生初报及种类鉴定

在沈阳市东陵区祝家屯镇下楼子村树莓栽培园田间地表首次发现一种大量生长的奇特真菌,经鉴定确认该菌为红鬼笔(Phallus rubicundus(Bosc.)Fr.),属于属真菌门,担子菌亚门,腹菌纲,鬼笔目,鬼笔菌属。通过田间发生调查、菌种分离鉴定及室内培育观察,对红鬼笔生态、形态与生长特征进行了初步研究。

a-鹅膏毒肽和二羟鬼笔毒肽的制备和鉴定(英文)

-鹅膏毒(环)肽和二羟鬼笔毒(环)肽是剧毒的鹅膏菌和其它几种致死毒菌中由一些修饰氨基酸组成的环肽毒素。由于-鹅膏毒肽对真核生物的mRNA合成的专一性抑制和和二羟鬼笔毒肽对肌动蛋白的专一性束缚,因而它们在分子生物学和细胞学研究中具有重要应用,对其需求逐步增加。为此,作者使用了一种改良的毒素提取方法,以制备高效液相色谱从灰花纹鹅膏菌中分离制备-鹅膏毒肽和二羟鬼笔毒肽,并通过紫外吸收光谱和质谱进行鉴定,表明-鹅膏毒肽和二羟鬼笔毒肽的分离效果好,纯度高。本方法对其它毒菌中的-鹅膏毒肽和二羟鬼笔毒肽的分离制备具有同样的应用价值。