五种鲤科鱼类生长激素cDNA的克隆和序列分析

通过RT-PCR方法，以草鱼、鳙鱼、鲫鱼、鲤鱼、齐口裂腹鱼等5种鲤科重要经济鱼类的垂体总RNA为模板扩增出其生长激素（fish growth hormone，fGH）的完整ORF序列，并克隆到pMD18-T载体上，命名为pMD-1（草鱼）、pMD-2（鳙鱼）、pMD-3（鲫鱼）、pMD-4（鲤鱼）、pMD-5（齐口裂腹鱼）。测序结果显示，ORF序列其长度均为633bp。序列分析表明，所有ORF序列均以ATG为起始密码，以TAG为终止密码，编码210个氨基酸残基，推导的生长激素前体由22个氨基酸的信号肽和188个氨基酸的成熟肽组成。同源性分析表明，草鱼、鳙鱼、鲤鱼、鲫鱼和齐口裂腹鱼的fGH同源性在93．3％-99．5％之间。

促性腺激素释放激素类似物促进鱼类生长激素分泌和生长

采用离体灌流孵育和腹腔注射方法,研究鲑鱼促性腺激素释放激素(GnRH)类似物 sGnRH-A(Arg^6Trp~?Leu^3Pro~?NEt-LHRH)和哺乳类GnRH类似物LHRH-A(Ala^5Pro~?-NEt-LHRH)对鲤鱼脑垂体生长激素(GH)分泌的直接刺激作用以及对草鱼鱼种 GH 分流和生长的促进作用。2分钟脉冲式 sGnRH-A 和 LHRH-A 以剂量依存形式直接刺激离体灌流孵育的鲤鱼脑垂体 GH分泌,且 sGnRH-A 刺激GH 分泌活性显著高于 LHRH-A。腹腔注射两种剂量(0.01μg/g 体重/周和0.001μg/g 体重/周)的 sGnRH-A 或LHRH-A(每周一次,共 6周)都能显著提高草鱼鱼种相对体重和相对体长生长率,并促进草鱼鱼种血清 GH 水平提高。sGnRH-A 和 LHRH-A 促进生长的作用是剂量依存的,且sGnRH-A的促进生长作用显著高于 LHRH-A。

用酶联免疫吸附受体法检测鱼类生长激素的生物活性

根据激素—受体反应的原理，结合酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）和放射受体测定法（ＲＲＡ）的优点，应用我们纯化的草鱼生长激素（ｇｃＧＨ）和大鳞大马哈鱼生长激素（ｓＧＨ）及其特异抗体．采用鱼类肝细胞膜受体制剂，首次建立了测定鱼类ＧＨ生物活性的酶联免疫吸附受体测定法（ＥＬＩＳＡ—ＲＡ）。此法检测草鱼ＧＨ的灵敏度达０．０６３～０．１２５μｇ／ｍｌ，检测大马哈鱼ＧＨ与草鱼肝膜受体结合的灵敏度达０．２５μｇ／ｍｌ。同时表明草鱼ＧＨ、基因重组鲤ＧＨ以及大马哈鱼ＧＨ均可不同程度地与草鱼（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌｕｓ）、鲤（Ｃｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏ）、鲶（Ｓｉｌｕｒｕｓｍｅｒｉｄｉｏｎａｔｉｓ）和黄颡鱼（Ｐｅｔｔｅｏｂａｇｒｕｓｆｕｌｖｉｄｒａｃｏ）肝细胞ＧＨ受体特异结合。本测定系统可用于测定鱼类垂体中的ＧＨ含量以及监测鱼类ＧＨ分离纯化过程。

鱼类生长激素的分离、鉴定及其生理功能研究的进展

主要对80年代末至90年代中期国际有关鱼类生长激素的分离、鉴定和生理功能研究的进展予以综述。资料表明，蓝鲨、罗非鱼等21种鱼类的生长激素（GH）已被分离，并阐明鱼类GH一般是在碱性条件下，将脑垂体匀浆，或取其体外培养的分泌液，经凝胶过滤和反相高效液相色谱纯化得到；鱼类GH的生物活性多以具有促进幼鱼生长的特性来鉴定。最新研究表明，鱼类生长激素的主要生理功能为：具有生长促进作用、低渗调控作用，参与应激反应，与胰岛素样生长因子相互作用，通过垂体－性腺轴发挥对鱼类性腺类固醇生成的调控作用，增强甲状腺的活性，促进周边代谢中T4转化为T3等。

鱼类生长激素的异源表达、应用及安全性评价

鱼类生长激素对鱼的生长发育起着重要的调节作用,能促进鱼体快速生长,提高饵料转化率,在水产养殖业中具有重大应用价值。转生长激素基因鱼具有快速生长效应,可以缩短养殖周期,降低养殖成本和风险。鱼类生长激素基因异源表达体系的建立和发展,使获得大量廉价的鱼类生长激素产品成为可能,为鱼类养殖业新型饵料添加剂的研制开辟了新的途径。本文综述了转生长激素基因鱼和鱼类生长激素基因的异源表达两方面的研究及其安全性评价。

鱼类生长激素的分子生物学和应用研究的进展

依据1985－1995年国际有关资料对鱼类生长激素的分子生物学及其应用研究的最新成果与进展进行综合评述。研究表明，已完成鳗鲡等9种鱼类生长激素的氨基酸组成与全序列分析及大麻哈鱼等20种鱼类的生长激素基因的分离与克隆，有些已在工程菌或动物细胞中高效表达；鱼类生长激素基因的调控机制与生长激素的活性部位研究正在深入进行；将外源的生长激素引入鱼体或将外源的生长激素基因导入受体鱼，以期促进生长、增加抗性，是生长激素应用于水产养殖研究的主要方向。

重组鱼类生长激素对中国对虾成活率及促生长作用的研究

The diet containing yeast expressing recombinant Chinook salmon growth hormone (rcsGH) was fed to juvenile Chinese prawn (Penaeus chinensis) for 50 days in the experiment. The results first indicated that the additions of both 10 ng and 100 ng rcsGH/g diet significantly promoted the growth of juvenile prawn (weight gains significantly increased compared to controls and the effect was dose dependent). In addition, the prawn fed the diet containing rcsGH exhibited the improved survival rate (with 2 fold survival rate that of controls). The experiments provided the basis of application of recombinant fish growth hormone on growth and survival enhancements of cultured Chinese prawn.

鱼类生长激素的体内代谢、分泌调控和作用机制研究的进展

主要对1983－1996年间关于鱼类生长激素的体内代谢、分泌调控和作用机制的研究进展予以综合评述。通过鱼类生长激素特异性放射免疫测定法的建立和体内代谢动力学研究，证实，外源生长激素在鱼体内不会产生积累。鱼类生长激素的分泌调控受下丘脑分泌的生长激素释放因子（GHRF）和释放抑制因子（SRIF）的双重调节；促性腺激素释放激素（GnRH）、雌二醇（E2）、促甲状腺素释放激素（TRH）和神经肽（NYP）对鱼类生长激素的释放有刺激作用；儿茶酚胺也有调控鱼类生长激素释放的作用。已证实，生长激素（GH）能够促进鱼体蛋白质的合成，产生正氮平衡，提高鱼类对食物的转化率；能够促进鱼体脂肪的动用与氧化，增加血清葡萄糖的含量。胰岛素样生长因子-I（IGF－I）是生长激素发挥生理作用的中介物质；鱼类生长激素受体主要在肝脏，同时在卵巢、精巢、脂肪、皮肤、软骨、鳃、血液、脑、胆囊、肾脏和肌肉组织中也有分布。生长激素具有加强鱼鳃Na+／K＋－ATP酶的活性，增加鱼类的低渗调控作用；鱼类对口服外源生长激素的吸收部位主要在后肠。

鱼类生长激素基因工程研究

生长激素是鱼体生长发育最重要的内分泌激素.20世纪30年代以来,在对生长激素生物化学功能研究的基础上,对鱼类生长激素的生理功能和作用机制进行了系统深入的探讨,为鱼类生长激素基因工程研究奠定了基础.随着分子生物学技术的发展,40多种鱼类的生长激素基因及其cDNA被克隆,鱼类生长激素基因工程研究取得了一系列重要进展:应用DNA重组和基因转移技术,获得了多种转生长激素基因鱼,由于重组生长激素基因的“内源性”表达,转基因鱼获得生长快、饵料转化效率高等优良生产性状,显示了生长激素基因在鱼类基因工程育种中的广阔应用前景;另一方面,鱼类生长激素基因在工程菌中表达的技术体系得以建立和发展,使获得大量廉价的鱼类生长激素产品成为可能,为渔业养殖新型饵料添加剂的研制开辟了新的途径.

鱼类生长激素基因的研究现状及展望

鱼类的生长激素基因在鱼类生长发育和新陈代谢过程中发挥着极其重要的生物学作用。就鱼类生长激素基因(fGHG)的分离、活性检测、结构、分子克隆及在体外表达与基因转移等方面的研究进行了综述,并对其未来的研究策略和发展方向进行了展望。

鱼类生长抑素调控垂体生长激素分泌的作用机制

生长抑素是一个多基因、多功能的家族。通过其受体的介导参与机体的生长、发育、代谢、生殖以及免疫等生理过程。本文简要概括鱼类生长抑素及其受体的研究进展,重点对生长抑素调控垂体生长激素分泌的信号转导机制进行讨论,旨在加深对鱼类生长抑素作用机制的认识和了解。迄今,在鱼类中已经鉴定出6种生长抑素基因和4种生长抑素受体。由于存在多种生长抑素基因以及不同的加工过程,一种鱼可能产生多种形式的生长抑素多肽。鱼类进化过程中存在基因组复制,导致一种受体又有多种亚型。鱼类生长抑素调控垂体生长激素分泌的作用机制主要源自金鱼中的研究,结果表明,cAMP通路、钙离子通道以及PKC通路可能参与了金鱼生长抑素抑制垂体生长激素分泌的过程。生长抑素调控垂体生长激素分泌的作用机制是一个复杂的网络结构,多种信号通路参与其中;不同物种间的作用机制不尽相同。鱼类生长抑素基因、受体及其调控垂体生长激素分泌的作用机制仍有待进一步研究。

鱼类血清中锌含量与生长激素水平的关系分析

应用原子吸收光谱法测定了6种养殖鱼类血清中的锌含量,采用放射免疫分析法测定了相应血清中的生长激素水平。实验结果表明,养殖鱼类血清中的生长激素水平与锌含量呈正相关。

养殖鱼类血清生长激素水平与锌含量的关系研究

本文应用放射免疫分析法测定6种养殖鱼类血清中生长激素水平,采用原子吸收光谱法测定了相应血清中的锌含量。实验结果显示,养殖鱼类血清中的生长激素水平与锌含量呈正相关。

鱼类生长激素研究及应用进展

鱼类的生长和发育受体内各种激素的调节,其中生长激素对鱼类的生长起主要调控作用.同哺乳动物类似,在鱼类中,生长激素由脑垂体中的生长激素细胞分泌并通过血液运输到作用部位.现有研究发现,鱼类血液中生长激素的含量与鱼体生长速率的季节性变化有显著关系.因此,意味着如果人为增加鱼体中的生长激素含量,能够加快鱼类的生长,进而产生经济效益.生长激素在鱼体中含量很低,从脑垂体中大量获得生长激素用于渔业生产面临着生产效率低下、成本高等问题.这就限制了生长激素在生产中的大规模应用.但随着生命科学技术的发展,使得人们利用重组的鱼生长激素进行渔业生产就有了可能性.为此,本文就鱼类生长激素研究进展及其对鱼类生长发育影响的研究进行简要综述.

鱼类生长激素的应用研究进展

鱼类生长激素在其生长、代谢、发育、繁殖等方面发挥着重大作用,是具有广泛生理调节作用的调节素,本文就鱼类生长激素的结构、生理功能、在分子生物学领域的研究状况等方面进行综述,并对生长激素的作用机理进行了讨论。

鱼类生长激素释放肽及其受体的研究进展

生长激素释放肽(Ghrelin)是生长激素促分泌素受体(Growth hormone secretagogue receptor,GHSR)的一种内源性配体,主要在胃肠道内产生。目前不少鱼类的Ghrelin基因和氨基酸序列已经确定。鱼类Ghrelin能促进生长激素(GH)、促黄体释放激素(LH)的分泌,并参与摄食调节,表明Ghrelin是一种具有多种生理活性的多肽。综述了鱼类Ghrelin及其受体的结构和分布,并对其调控机理进行了简要介绍,最后论述了Ghrelin在鱼类中的生理功能,旨在为Ghrelin在鱼类营养生理学及内分泌生理学中的研究提供参考。

我国鱼类生长激素基因研究现状

随着分子生物学技术的进一步完善和发展，鱼类生长激素基因的研究如基因结构和功能的关系、表达的调控以及转基因的整合机理等正在逐步深入。目前，基因克隆技术、重组DNA技术、基因表达技术以及核酸序列分析等技术已广泛应用RT-PCR技术取鲮鱼的脑垂体对鲮生长激素cDNA进行克隆，

鱼类生长相关激素的营养调控

鱼类激素是由内分泌腺所分泌的一类具有生物活性的物质，虽然含量极低，却在鱼类整个生命活动中起重要作用。像哺乳类一样，调节鱼类生长发育的内分泌激素主要包括垂体生长激素、类胰岛素生长因子‐Ⅰ和甲状腺激素。鱼类内分泌系统对营养摄入的变化非常敏感，营养状况在调控鱼类激素的合成与分泌中发挥重要作用，研究较多的有饥饿、饲料中蛋白质和碳水化合物水平等。笔者简要综述了这三种营养状况对生长内分泌激素的影响及其调控机制，为鱼类生长内分泌激素营养调控的研究和科学合理配置水产养殖饲料提供参考。

外源生长激素引入鱼体的途径和方法研究进展

外源生长激素能促进鱼类的生长，其引入鱼体的方式有注射、埋植、浸泡、灌喂和投喂等多种，其中以投喂法最适用于生产。ＧＨ可以被鱼类肠壁完整吸收并进入血液、但蛋白酶对ＧＨ有降解作用，该作用在消化道前端（胃或前肠）较为强烈。根据胃肠道特点选择适宜的保护剂ＧＨ加以包被，可以有效减少ＧＨ被蛋白酶的降解程度。