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利用重组A蛋白偶联的琼脂糖凝胶纯化α-半乳糖苷酶单克隆抗体 被引量:1
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作者 田曙光 高红伟 +2 位作者 李素波 章扬培 宫锋 《生物技术通讯》 CAS 2007年第3期460-462,共3页
目的:采用一种简单易行的纯化方法获得高纯度α-半乳糖苷酶单克隆抗体。方法:使用重组A蛋白偶联的琼脂糖凝胶捕获和纯化小鼠腹水中的α-半乳糖苷酶单克隆抗体。结果:获得了高纯度、高效价的α-半乳糖苷酶单克隆抗体。结论:应用重组A蛋... 目的:采用一种简单易行的纯化方法获得高纯度α-半乳糖苷酶单克隆抗体。方法:使用重组A蛋白偶联的琼脂糖凝胶捕获和纯化小鼠腹水中的α-半乳糖苷酶单克隆抗体。结果:获得了高纯度、高效价的α-半乳糖苷酶单克隆抗体。结论:应用重组A蛋白偶联的琼脂糖凝胶纯化α-半乳糖苷酶单克隆抗体是一种简单、有效的方法。 展开更多
关键词 Α-半乳糖苷酶 单克隆抗体 重组A蛋白 琼脂糖 纯度 效价
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疏水层析介质苯基-琼脂糖凝胶合成与吸附性能的研究
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作者 徐伟 王芝祥 李永清 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期494-496,共3页
以琼脂糖凝胶为基质 ,与 2 ,3-环氧丙烷苯基醚反应后 ,制得疏水层析介质苯基 -琼脂糖凝胶。考察了它的物化性能及对多种蛋白、基因产品的吸附与分离性能 ,结果表明其吸附性能、分离纯化性能、化学稳定性均与国外同类产品相近。对链激酶... 以琼脂糖凝胶为基质 ,与 2 ,3-环氧丙烷苯基醚反应后 ,制得疏水层析介质苯基 -琼脂糖凝胶。考察了它的物化性能及对多种蛋白、基因产品的吸附与分离性能 ,结果表明其吸附性能、分离纯化性能、化学稳定性均与国外同类产品相近。对链激酶的纯化收率大于 95 % ;人血 B因子的纯化倍数为 2 6 ,收率大于 95 %。 展开更多
关键词 苯基-琼脂糖 疏水层析介质 吸附性能 分离 纯化
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亲和色谱-氢化物发生原子荧光分光光度法纯化检测人血浆中的硒蛋白-P 被引量:2
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作者 包建民 于晓燕 +1 位作者 刘微 李优鑫 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期804-809,共6页
开发了两步亲和色谱法:肝素-琼脂糖凝胶、Ni-琼脂糖凝胶色谱纯化人血浆中硒蛋白-P的方法,并采用氢化物发生-原子荧光分光光度法(HG-AFS)检测,成功搭建了硒蛋白-P的纯化检测平台。确定了亲和色谱纯化的最佳梯度洗脱条件,通过十二烷基硫酸... 开发了两步亲和色谱法:肝素-琼脂糖凝胶、Ni-琼脂糖凝胶色谱纯化人血浆中硒蛋白-P的方法,并采用氢化物发生-原子荧光分光光度法(HG-AFS)检测,成功搭建了硒蛋白-P的纯化检测平台。确定了亲和色谱纯化的最佳梯度洗脱条件,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)定性检测,得到了一定纯度的硒蛋白-P,其回收率达43.2%。HG-AFS方法的线性相关系数为0.999 1,检出限为0.09μg/L,日内精密度(RSD)为0.12%,日间精密度(RSD)为0.27%,加标回收率为95%~104%。该亲和色谱纯化方法简单易控、回收率高,HG-AFS检测灵敏度高,结果准确可靠。 展开更多
关键词 蛋白-P 人血浆 肝素-琼脂糖 Ni-琼脂糖 亲和色谱 氢化物发生原子荧光分光光度法
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SDS-AGE尿蛋白电泳与几种生化指标在高血压肾病检测中的临床意义 被引量:4
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作者 杨辛 范君 +3 位作者 吴颖稚 钱重玲 林洁 李菁 《医学综述》 2018年第17期3511-3515,共5页
目的探讨十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶(SDS-AGE)尿蛋白电泳与几种生化指标在高血压肾病患者检测中的临床价值。方法选取2015年3月至2017年12月上海市杨浦区控江医院住院部临床确诊的230例高血压患者为研究对象,其中210例高血压肾病患者作... 目的探讨十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶(SDS-AGE)尿蛋白电泳与几种生化指标在高血压肾病患者检测中的临床价值。方法选取2015年3月至2017年12月上海市杨浦区控江医院住院部临床确诊的230例高血压患者为研究对象,其中210例高血压肾病患者作为高血压肾病组,20例单纯性高血压患者作为单纯性高血压组,另外选取同期20例健康体检者作为对照组。检测各组受试者尿微量白蛋白(mAlb)、β_2微球蛋白(β2-MG),血清胱抑素C(Cys C)、血清视黄醇结合蛋白(RBP)、血尿素氮(BUN)及肌酐等指标并进行比较。结果各组尿m Alb、尿β_2-MG、血RBP、血清Cys C、BUN、血肌酐比较差异有统计学意义(P<0.05),单纯高血压组和高血压肾病组尿m Alb高于对照组,高血压肾病组尿β2-MG、血RBP、血清Cys C、BUN、血肌酐高于对照组和单纯高血压组(P<0.05)。210例高血压肾病组SDS-AGE电泳检测结果显示,138例肾小球蛋白尿,31例肾小管蛋白尿,41例混合性蛋白尿。210例高血压肾病患者SDS-AGE尿蛋白电泳与尿m Alb、尿β_2-MG、血Cys C、血RBP、BUN、血肌酐检测不同类型蛋白尿的总阳性检出率分别为100.0%、98.6%、32.8%、98.6%、21.0%、2.0%、20.0%,SDS-AGE尿蛋白电泳总阳性检出率高于其他6项生化指标。结论 SDS-AGE尿蛋白电泳可以协助判断尿蛋白的性质,协助临床鉴别肾脏病变的部位。中分子及大分子可以反映肾小球病变,小分子蛋白尿可以反映肾小管病变,混合性蛋白尿提示病变涉及肾小球和肾小管。SDS-AGE尿蛋白电泳有助于早期、准确地判断肾脏损伤及损伤程度,为临床提供准确的诊断依据。 展开更多
关键词 高血压肾病 十二烷基苯磺酸钠-琼脂糖 尿蛋白电泳 病理性蛋白尿
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AngⅡ和ET-1在无肝素化体外循环转流早期的表达
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作者 闫炀 耿希刚 +1 位作者 许锁春 张永建 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期126-128,共3页
目的观察无肝素化体外循环期间AngⅡ、ET-1的表达水平,为临床提供参考依据。方法制备鱼精蛋白-琼脂糖凝胶柱并建立动物模型,对肝素化及无肝素化体外循环期间AngⅡ、ET-1水平进行检测。结果血浆AngⅡ及ET-1水平在组内相比,以转流开始时... 目的观察无肝素化体外循环期间AngⅡ、ET-1的表达水平,为临床提供参考依据。方法制备鱼精蛋白-琼脂糖凝胶柱并建立动物模型,对肝素化及无肝素化体外循环期间AngⅡ、ET-1水平进行检测。结果血浆AngⅡ及ET-1水平在组内相比,以转流开始时为对照,1、2、3h时AngⅡ及ET-1水平均逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05);两组间比较转流期间差异有统计学意义(P<0.05)。结论依靠鱼精蛋白-琼脂糖凝胶对凝血因子进行吸附以进行无肝素化体外循环效果明确,但通过对AngⅡ及ET-1在血浆中表达水平的评估,提示其现阶段距临床应用仍有差距。 展开更多
关键词 无肝素化 体外循环 鱼精蛋白-琼脂糖凝胶 血管紧张素Ⅱ 内皮素-1
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Radiation effects on physically cross-linked agarose hydrogels
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作者 王潇 敖银勇 +3 位作者 黄玮 刘波 安友 翟茂林 《Nuclear Science and Techniques》 SCIE CAS CSCD 2015年第5期48-52,共5页
As a potential matrix of three-dimensional gel dosimeter, agarose hydrogels will be used for measuring radiation doses, hence the importance of studying their radiation resistance and radiolysis mechanism. Physical pr... As a potential matrix of three-dimensional gel dosimeter, agarose hydrogels will be used for measuring radiation doses, hence the importance of studying their radiation resistance and radiolysis mechanism. Physical property and chemical structure of physically cross-linked agarose hydrogel samples irradiated to 0–200 k Gy by60 Co γ-rays were analyzed by universal testing machine, gel permeation chromatography, fourier transform infrared spectrometer, ultraviolet visible spectroscopy, nuclear magnetic resonance, and gas chromatography. The results showed that agarose hydrogels had good radiation stability below 25 k Gy, and the maximum compression strength of sample was ca. 0.1 MPa at 25 k Gy. The irradiated samples degraded obviously and liquefied gradually with increasing doses. Compared with unirradiated sample, carbonyl groups, which generated from the molecular chains of agarose hydrogels, were observed at 25 k Gy and increased gradually with dose. The main gas products evolved from irradiated agarose hydrogels were H2, CO2, CO and CH4. Based on the analysis of radiolytic products, the radiolysis mechanism of agarose hydrogels under γ-radiation was proposed. 展开更多
关键词 琼脂糖 辐射效应 物理交联 傅里叶变换红外光谱仪 紫外-可见光谱 渗透色谱 辐解产物 万能试验机
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DNA显示中三种染色方法的比较 被引量:1
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作者 张茜 谢湘芝 经承学 《医药论坛杂志》 2004年第13期43-44,共2页
目的 比较聚丙烯酰胺凝胶 -银染 (简称银染 )、SYBRGreenⅠ及溴化已锭 (EB)染色方法在定量聚合酶链反应 (Q -PCR)检测DNA的敏感性。方法 分别用聚丙烯酰胺凝胶 -银染、琼脂糖电泳 -SYBRGreenⅠ染色及EB染色方法检测相同条件下PCR产物 ... 目的 比较聚丙烯酰胺凝胶 -银染 (简称银染 )、SYBRGreenⅠ及溴化已锭 (EB)染色方法在定量聚合酶链反应 (Q -PCR)检测DNA的敏感性。方法 分别用聚丙烯酰胺凝胶 -银染、琼脂糖电泳 -SYBRGreenⅠ染色及EB染色方法检测相同条件下PCR产物 ,进行光密度定量分析及比较。结果  2 4个循环PCR检测DNA产物 :SYBRGreenⅠ染色与银染均见清晰带并可定量分析 ,而EB染色在 2 8个循环次数尚可清晰带型 ;SYBRGreenⅠ及EB染色历时 30min ,而银染则历时 4h~ 5h。结论 在检测DNA时 ,SYBRGreenⅠ染色敏感性同银染 ,但比EB强 ;而且比银染更简单、省时、经济。 展开更多
关键词 聚丙烯酰胺-银染 琼脂糖电泳-荧光染料 溴化已锭 敏感性 Q一聚合酶链反应
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正丁基-β-D-吡喃果糖苷体外对Bel-7402细胞凋亡的诱导作用 被引量:6
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作者 楼一层 黄芬 +2 位作者 颜香凤 阮班昭 杨翰 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第15期1253-1255,共3页
目的:探讨正丁基-β-D-吡喃果糖苷诱导肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,检测正丁基-β-D-吡喃果糖苷对Bel-7402细胞的增殖抑制效应;将6.25,12.5,25mg·mL-1的正丁基-β-D-吡喃果糖苷作用于Bel-... 目的:探讨正丁基-β-D-吡喃果糖苷诱导肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,检测正丁基-β-D-吡喃果糖苷对Bel-7402细胞的增殖抑制效应;将6.25,12.5,25mg·mL-1的正丁基-β-D-吡喃果糖苷作用于Bel-7402细胞24h和48h,采用流式细胞术(FCM)测定细胞周期及凋亡率;应用凝胶成像分析仪检测DNALadder。结果:正丁基-β-D-吡喃果糖苷在体外对Bel-7402细胞有增殖抑制效应,在正丁基-β-D-吡喃果糖苷作用下,Bel-7402细胞出现显著的细胞凋亡征象;流式细胞术检测结果显示,不同浓度的正丁基-β-D-吡喃果糖苷与Bel-7402细胞作用24,48h可明显抑制Bel-7402细胞存活,25mg·mL-1的正丁基-β-D-吡喃果糖苷抑制率达到42.39%;凝胶成像分析仪检测到典型的DNA阶梯状条带。结论:正丁基-β-D-吡喃果糖苷有诱导Bel-7402细胞凋亡的作用,且随着浓度的升高和作用时间的延长,其诱导细胞凋亡作用增强。 展开更多
关键词 正丁基-β-D-吡喃果糖苷 流式细胞仪 细胞凋亡 BEL-7402细胞 肝癌 琼脂糖
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无肝素化体外循环转流及早期炎性因子的表达 被引量:4
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作者 闫炀 闫路勤 耿希刚 《中国胸心血管外科临床杂志》 CAS 2012年第4期414-418,共5页
目的探讨采用鱼精蛋白-琼脂糖凝胶进行无肝素化体外循环(CPB)的可行性。方法选择健康成年家犬12只,犬龄2~3岁,雌雄不限,体重20~28(23.3±3.7)kg。按随机数字表法将12只犬分为两组,每组6只,肝素化组:行常规CPB;非肝素化组:采用鱼... 目的探讨采用鱼精蛋白-琼脂糖凝胶进行无肝素化体外循环(CPB)的可行性。方法选择健康成年家犬12只,犬龄2~3岁,雌雄不限,体重20~28(23.3±3.7)kg。按随机数字表法将12只犬分为两组,每组6只,肝素化组:行常规CPB;非肝素化组:采用鱼精蛋白-琼脂糖凝胶吸附血浆凝血因子,即行无肝素化CPB。于CPB开始时和CPB1 h、2 h、3 h采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定动脉血中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素8(IL-8)的浓度,并进行比较。结果非肝素化组和肝素化组犬在CPB过程中肉眼观察膜肺内均未见血栓形成,全血激活凝血时间(ACT)始终>480 s,生命体征均平稳。两组血浆TNF-α、IL-6和IL-8浓度在CPB开始时差异无统计学意义,非肝素化组血浆TNF-α和IL-8于CPB 1 h、CPB 2 h和CPB 3 h时均高于肝素化组[CPB3 h TNF-α:(156.48±16.65)ng/L vs.(115.87±15.63)ng/L,t=4.356,P=0.001;CPB 3 h IL-8:(365.38±46.18)ng/L vs.(299.29±34.50)ng/L,t=2.808,P=0.019],而两组IL-6浓度差异无统计学意义(P>0.05)。结论依靠鱼精蛋白-琼脂糖凝胶对凝血因子进行吸附,以进行无肝素化CPB效果明确,但具有一定的促进全身炎症反应效应。 展开更多
关键词 无肝素化 体外循环 鱼精蛋白-琼脂糖凝胶 炎性因子
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