鱼鳞多肽亚铁螯合物的制备及结构表征

【目的】探讨鱼鳞多肽亚铁螯合物的制备方法,为鱼鳞废弃物的利用提供新的途径和理论基础。【方法】以草鱼鱼鳞多肽为原料,氯化亚铁为铁源,通过优化螯合条件得到鱼鳞多肽亚铁螯合物;采用元素分析、紫外光谱、红外光谱、电镜扫描、X-射线粉末衍射分析技术对鱼鳞多肽和多肽亚铁螯合物的结构进行表征。【结果】选择抗坏血酸为抗氧化剂,抗氧化剂与氯化亚铁的质量比为0.15∶1,多肽与氯化亚铁质量比为2∶1,pH 5,反应时间40 min,反应温度30℃的条件下,亚铁螯合率为83.4%;红外光谱特征区-NH_2的吸收峰从3301.42 cm^(-1)移动至3362.61 cm^(-1)处,发生明显的位移;元素分析结果表明螯合物中含铁量为10.6%,N、C、H含量显著降低;扫描电镜观察到螯合后颗粒由圆球空心结构变为致密晶粒;X衍射图谱表明螯合物结晶度大幅提高。【结论】以草鱼鱼鳞和氯化亚铁为原料,按照上述条件得到的多肽亚铁螯合物产率高,亚铁离子与多肽配位明显。

鱼鳞多肽亚铁螯合物的氨基酸测定及体外抗氧化活性分析

采用凝胶渗透色谱和全自动氨基酸分析仪分别对鱼鳞多肽亚铁螯合物的分子量分布和氨基酸组成进行了检测。研究了鱼鳞多肽亚铁螯合物对DPPH自由基和过氧化氢(H2O2)的清除作用,并比较了抗坏血酸、鱼鳞多肽和鱼鳞多肽亚铁螯合盐对二者的清除能力。分子量测定及氨基酸组成分析表明,鱼鳞多肽的相对分子质量分布区间为500~5000 Da,多肽亚铁螯合物相对分子质量分布区间为5000~10000 Da,鱼鳞多肽亚铁螯合物中甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、脯氨酸的含量较高,酪氨酸、组氨酸的含量相对较低。体外抗氧化实验结果表明:鱼鳞多肽亚铁盐能清除DPPH自由基和过氧化氢,抗坏血酸、鱼鳞多肽亚铁盐和鱼鳞多肽这三种物质对DPPH自由基和过氧化氢清除能力的强弱顺序为维生素C<鱼鳞多肽亚铁盐>鱼鳞多肽,故鱼鳞多肽亚铁螯合盐具有较强的清除DPPH自由基和过氧化氢的能力。

鲷鱼鳞多肽-木糖美拉德反应产物的制备、结构与功能

探索反应时间、木糖(xylose,Xyl)与鲷鱼鳞多肽(fish scale peptides,FSP)质量比、Xyl与FSP总质量浓度、初始p H值和反应温度对Xyl与FSP美拉德反应的影响,并对在Xyl与FSP质量比1.3∶1、Xyl与FSP总质量浓度78 mg/m L、初始pH 11.85、反应温度100℃、反应时间4.05 h工艺条件下所得产物进行表征。荧光光谱、红外光谱、游离氨基含量以及N-三(羟甲基)甲基甘氨酸-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳过碘酸Schiff碱染色等结构分析,表明FSP与Xyl经美拉德反应后发生共价交联,肽链结构发生变化且形成了新的化合物;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基、羟自由基以及还原力测定表明,FSP经美拉德反应后抗氧化活性显著增加(P<0.05);多酚氧化酶活性测定及苹果褐变实验表明,鲷鱼鳞多肽美拉德反应产物(FSP-MRPs)具有多酚氧化酶抑制活性,其IC_(50)值为0.54 mg/m L,其可能机理为FSP-MRPs具有Cu2+螯合特性,其螯合位点与抗氧化基团密切相关。

鱼鳞多肽对酪氨酸酶活性的抑制作用

酪氨酸酶抑制剂在化妆品、医疗和食品工业等领域中有着重要的应用,可以有效抑制黑色素的合成。该研究以来源自罗非鱼鱼鳞的多肽为原料,通过单因素试验得到超声预处理工艺参数:多肽浓度0.14 g/mL、超声功率600 W,超声温度55℃。随后,将多肽溶液与金属铜离子进行螯合。经柱层析、乙二胺四乙酸洗脱后,得到具有金属铜离子螯合能力的多肽组分。酪氨酸酶活性测定结果表明,当多肽样品浓度为5 mg/mL时,其对酪氨酸酶活性的抑制率达到60.0%,即该鱼鳞多肽组分可强烈抑制酪氨酸酶的活性。通过纳喷离子源高效液相色谱-串联质谱法鉴定分析,该组分中各多肽序列与酶活性中心金属铜离子的结合情况,推测该组分对酪氨酸酶活性的抑制作用机理是与酶自身配体竞争活性中心的金属铜离子,破坏酶活性中心结构,从而对酶活性产生抑制作用。综上,该具有金属铜离子螯合能力的鱼鳞多肽是一种有效的酪氨酸酶活性抑制剂。

补骨脂提取物与罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽抗骨质疏松的实验研究

目的:研究补骨脂提取物与罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽抗骨质疏松有效性和安全性。方法:以正常成长期雌性大鼠为模型,采用双能X射线吸收法(DXA)测定大鼠骨密度,同时进行大剂量长期毒性试验;以去双侧卵巢诱发骨质疏松大鼠为模型,观察其抗骨质疏松的作用。结果:补骨脂提取物与胶原蛋白多肽对正常大鼠股骨、胫骨骨密度未见明显增强作用,同时未见明显毒性,但能明显增加骨质疏松大鼠股骨骨密度,明显减少尿钙的排出量,保持体内足够的钙含量。结论:补骨脂提取物与罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽具有明显的抗骨质疏松作用。

补骨脂与罗非鱼鳞胶原蛋白多肽对MC3T3-E1细胞ALP、Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达的影响

目的:研究补骨脂提取物与罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽对体外培养新生小鼠颅骨MC3T3-E1细胞ALP、Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达的影响。方法:将鱼胶原蛋白多肽与补骨脂提取物配伍,以小鼠成骨细胞株MC3T3-E1作为细胞模型,在培养体系中加入不同浓度及比例的补骨脂提取物和鱼胶原蛋白多肽,采用real-time PCR测定MC3T3-E1细胞ALP、Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达。结果:补骨脂提取物和鱼胶原蛋白以质量比1∶1、总浓度为0.2 mg/ml时,对ALP、Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达有明显促进作用,ALPm-RNA表达量高于单独的补骨脂提取物组。结论:中药补骨脂提取物和鱼胶原蛋白多肽能促进MC3T3-E1细胞ALP、Ⅰ型胶原蛋白mRNA的表达,二者配伍对促进MC3T3-E1细胞的分化具有相乘作用。

罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽对小鼠成骨细胞增殖与Ⅰ型胶原蛋白分泌的影响

目的研究不同分子量的罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽对体外培养新生小鼠颅骨MC3T3-E1细胞增殖与Ⅰ型胶原蛋白分泌及Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达的影响。方法采用WST-8法测定胶原蛋白多肽对小鼠成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖的影响,ELISA法检测胶原蛋白多肽对MC3T3-E1细胞Ⅰ型胶原蛋白分泌的影响,采用real-time PCR分析不同分子量的胶原蛋白多肽对Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达的影响。结果胶原蛋白多肽能促进MC3T3-E1细胞增殖(P<0.01)、促进MC3T3-E1细胞Ⅰ型胶原蛋白的分泌和Ⅰ型胶原蛋白mRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。结论罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽能有效促进MC3T3-E1细胞增殖与Ⅰ型胶原蛋白分泌,分子量较小的多肽(917.3Da)作用更加明显。