响应面法优化鱿鱼皮蛋白肽的制备工艺及其理化性质分析

为实现鱿鱼加工下脚料鱿鱼皮的高值化利用,本研究采用酶法制备鱿鱼皮蛋白肽。以多肽浓度和三氯乙酸可溶性氮指数(Trichloroacetic acid-nitrogen soluble index,TCA-NSI)为评价指标,采用单因素和响应面试验优化酶解工艺参数,并对所制备蛋白肽的氨基酸组成、分子量分布、蛋白肽序列、抗氧化活性及其体外模拟消化特性进行表征。结果表明,最佳酶解工艺条件为酶解温度43.50℃、酶解时间100 min、酶解pH7.50、胰蛋白酶与碱性蛋白酶比例2:1、加酶量4000 U/g,在此条件下其TCA-NSI可达89.02%±0.66%。所制备的鱿鱼皮蛋白肽其氨基酸组成均衡,必需氨基酸指数(Essential amino acid index,EAAI)可达0.90。此外,鱿鱼皮蛋白肽含有43个多肽序列,其中38个肽段的分子质量低于1800 Da,其DPPH自由基、ABTS^(+)自由基和羟自由基清除率的IC_(50)分别为0.61、0.28和1.95 mg/mL,且经体外模拟胃肠消化后仍能维持较好的抗氧化活性。本研究结果为鱿鱼加工下脚料的开发利用和精深加工提供了理论依据。

复合酶法制备鱿鱼皮胶原蛋白抗冻肽的工艺研究

为了获得具有较高活性的抗冻肽,提高水产加工副产物的综合利用率,本试验以水解度和过氧化氢酶低温保护活性为指标,优化鱿鱼皮胶原蛋白酶解工艺,并对水解产物进行分离纯化及结构鉴定。结果表明,最佳酶解条件为:当底物浓度为4%、加酶量为4000 U·g^(-1)时,先由碱性蛋白酶于pH值8、50℃条件下酶解2 h;灭酶后由木瓜蛋白酶于pH值6、45℃条件下酶解3 h。在此条件下所得酶解产物分子量主要在1000~5000 Da之间,经G-25凝胶柱分离后得到具有较高抗冻活性的F2组分,其主要成分的氨基酸序列可能为Gly-Pro-Try-Pro-Ala-Ala-Asn-Ser-Pro-Glu或Glu-Pro-Ser-Asn-Ala-Ala-Pro-Try-Pro-Gly。本研究为鱿鱼皮的精深加工和新型抗冻剂的开发提供了一定的理论依据。

鱿鱼皮胶原蛋白肽的脱色及其对风味影响的研究

为探究脱色工艺及其对鱿鱼皮胶原蛋白肽风味的影响,本试验在酶解制备的基础上,研究了不同活性炭和树脂对鱿鱼皮酶解液的脱色效果及最优工艺,并采用电子舌、电子鼻、氨基酸分析及感官评价等方法对鱿鱼皮胶原蛋白肽风味变化进行了分析。结果表明,粉末状活性炭的脱色效果较好,最佳脱色工艺为:pH值2.0,添加量0.1%(m/v),30℃下脱色30 min,该条件下鱿鱼皮酶解液的脱色率和蛋白损失率分别为82.91%和24.81%。分子量分布与游离氨基酸分析结果表明,与脱色前相比,脱色后样品的分子量分布变化不大,游离氨基酸及苦味氨基酸含量下降,鲜味氨基酸占比上升。电子舌、电子鼻及感官评价结果表明,脱色前后样品的风味差异较大,脱色后,样品的风味有显著改善,表现为苦味下降,鲜、酸、咸味提升。本研究结果为鱿鱼皮高附加值产品的开发及胶原蛋白肽的应用提供了一定的理论依据。

鱿鱼皮明胶水解物降血压活性研究

探讨了秘鲁鱿鱼(Dosidicus eschrichitii Steenstrup)皮明胶水解物对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制活性以及其降血压作用。采用超滤法对明胶水解液进行初步分离;采用比色法检测不同分子量范围鱿鱼皮明胶水解物组分的ACE抑制活性;采用两肾一夹型建立肾血管性高血压大鼠(RHR)模型,经口服预防给药30 d后,测定大鼠血压和血液中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量。试验结果表明鱿鱼皮明胶水解物体外均能明显抑制ACE的活性,其中UC-2和UF-2的半抑制浓度(IC50)分别为0.71和0.79 mg/mL。UF-2组分经口服预防给药可显著降低肾血管性高血压大鼠的动脉血压和大鼠血浆中的AngⅡ水平,具有较好的降血压效果。

鱿鱼皮胶原蛋白的测定与回收

为回收鱿鱼皮中胶原蛋白等有益成分 ,首先对胶原蛋白的定量方法进行了考察 ,确立了适宜于鱿鱼皮中胶原蛋白含量测定 (以羟脯氨酸计 )的方法。结果表明 ,在测定鱿鱼皮中胶原蛋白的含量时 ,宜先将鱿鱼皮进行脱脂处理 ,然后再直接水解测定羟脯氨酸。就水解条件而言 ,可分别采用 12 0℃水解 12h或 130℃水解 6h代替ISO 3496E方法中的 10 5℃水解 16h ,以缩短水解时间。其次 ,采用酶法促溶和热水提取的方法对鱿鱼皮中胶原蛋白进行回收利用 ,以胶原蛋白回收率为依据 ,得出胃蛋白酶 5℃酶解 72h和 10 0℃水提 6h分别为酶法提取和热水提取的最佳条件 ,将提取液调配后进行感官鉴定 ,统计结果表明 ,胃蛋白酶提取液显著优于 10 0℃水提液。对胃蛋白酶酶提温度的选择说明 ,胃蛋白酶促溶温度宜控制在 15℃以下 。

鱿鱼皮胶原蛋白的功能特性

测试了鱿鱼皮胶原蛋白的特征吸收光谱和分子量分布,比较了胶原蛋白的溶解性、保水性、湿润性、吸油性、乳化性及乳化稳定性、起泡性及泡沫稳定性等应用功能特性。结果表明:(1)3种方法(热水法、酸法和酶法)提取的鱿鱼皮胶原蛋白均在220 nm处有最大吸收,胶原蛋白的分子量为220 ku左右;(2)热水法和酶法提取的胶原蛋白的溶解性能要好于酸法胶原蛋白;(3)提取的3种胶原蛋白均具有一定的保水性,分别为0.54%、0.52%和0.55%;(4)热水法和酶法提取的胶原蛋白的润湿性较好;(5)3种胶原蛋白均具有良好的吸油性,分别为2.7、3.0和3.3 mL/g;(6)3种胶原蛋白拥有较好的乳化性和乳化稳定性,其中酸法提取的胶原蛋白的即时乳化性最好,但酶法提取的胶原蛋白的乳化稳定性最好;(7)3种胶原蛋白具有良好的起泡性和泡沫稳定性,其中酸法提取的胶原蛋白的起泡性和泡沫稳定性最好,分别为83%和67%。

鱿鱼皮胶原蛋白水解肽抗氧化活性研究

目的探讨秘鲁鱿鱼(Dosidicus eschrichitiiSteenstrup)皮胶原蛋白多肽组分对自由基的清除作用以及水解产物的体内抗氧化作用,为鱿鱼加工废弃物的高值化利用探索一条新途径。方法采用化学发光法研究胶原蛋白活性多肽体外对超氧阴离子自由基(O2.-)和羟自由基(.OH)的清除作用,并筛选出体外清除自由基活性最好的组分;灌胃于D-半乳糖致衰老的模型小鼠,测定小鼠血液及皮肤中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)及羟脯氨酸(Hyp)含量。结果与结论鱿鱼皮胶原蛋白多肽分子量小于2000D组分对O2.-和.OH具有较好的清除效果,该活性多肽组分可以提高小鼠血液及皮肤中SOD和GSH-Px的活力,降低MDA含量,并能提高小鼠皮肤组织中Hyp的含量。

酶法制备鱿鱼皮胶原蛋白肽工艺的条件优化

研究了鱿鱼皮胶原蛋白肽的酶解加工工艺条件。在单因素试验基础上,通过正交试验的方法对碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶及风味蛋白酶制备鱿鱼皮胶原蛋白肽工艺进行优化。优化的提取工艺条件如下:先用0.3%蛋白酶在p H10.5、温度47.5℃条件下水解4 h,再用0.4%木瓜蛋白酶复合风味蛋白酶按1∶2(质量比)的比例在p H 7.5、温度50℃的条件下继续水解4.5 h,结果酶解液的水解度可达28.89%、DPPH·清除率为88.24%,多肽转化率为49.74%,同时84.56%的胶原蛋白肽分子量分布介于180 Da^2 000 Da之间。在优化的酶解条件下,可以得到较好品质的胶原蛋白肽产品。

酶法水解鱿鱼皮制备多肽工艺的研究

分析了阿根廷鱿鱼皮的一般化学组成,并以其为原料,研究了酶的种类、加酶量、pH、温度及酶解时间对水解度(DH)的影响。采用正交实验对酶解工艺进行了优化,研究结果表明,复合蛋白酶水解鱿鱼皮制备多肽工艺的最适条件为:加酶量14000u/g、pH8.5、酶解温度50℃、酶解时间4h。在此条件下水解度可达20.7%。

响应面法优化秘鲁鱿鱼皮明胶-壳聚糖可食膜的制备工艺

本文以鱿鱼皮明胶、壳聚糖、甘油为原料制备可食膜。在单因素试验的基础上,选取鱿鱼皮明胶添加量、甘油添加量、干燥温度作为自变量,以可食性膜的抗拉伸强度为响应值,利用响应面分析法优化制膜工艺。结果表明:可食膜的抗拉伸强度Y对鱿鱼皮明胶添加量A,甘油添加量B,干燥温度C的二次多项回归方程为:Y=29.59+1.86A-7.35B-0.70C-1.02AB+0.39AC-0.39BC-3.40A2-1.32B2-4.34C2,其中甘油添加量对可食膜抗拉伸强度影响最大,干燥温度影响最小。当鱿鱼皮明胶添加量3.42%,甘油添加量0.10%,干燥温度59.8℃时,制备得到的明胶-壳聚糖可食膜抗拉伸强度达最大值36.22MPa,验证结果为37.07MPa,二者相对误差为2.35%,说明响应面优化可食膜制备工艺结果可靠。试验优化得到的可食膜制备工艺可以为水产动物明胶制备可食的包装材料提供一定的理论依据。

鱿鱼皮胶原蛋白制备技术研究

测定了鱿鱼皮的基本组成成分,探索热水法、酸法和酶解法从鱿鱼皮中提取胶原蛋白的制备技术。结果表明,鱿鱼皮中含有丰富的蛋白质,粗蛋白含量为75.35%(干基),胶原蛋白的含量53.96%(干基),胶原蛋白占总蛋白的71.61%;热水法提取胶原蛋白的提取率为90.26%,酸法提取胶原蛋白的提取率为95.16%,胰蛋白酶和木瓜蛋白酶法提取胶原蛋白的提取率分别为95.16%和97.56%,木瓜蛋白酶酶解法的提取效果最好;木瓜蛋白酶酶解法的提取胶原蛋白的最佳条件是底物浓度1:20(g/mL),温度50℃、pH6.0、加酶量3200U/g、时间6h。

鱿鱼皮胶原蛋白肽生理功能的研究进展

鱿鱼是世界上三大未被充分开发利用且极具潜力的海洋生物资源之一,鱿鱼皮是一种高蛋白低脂肪物质,它的蛋白组成与鱿鱼本体基本一致,鱿鱼皮干物质中80%左右是胶原蛋白,鱿鱼皮胶原蛋白具有良好的保水性、湿润性、吸油性及乳化性,使得它在化妆品、摄影用的明胶等方面有良好的应用前景。

酶法提取鱿鱼皮胶原蛋白工艺条件的研究

研究了酶法提取鱿鱼皮胶原蛋白的工艺条件。根据5种蛋白酶水解液中羟脯氨酸(HYP)的含量,确定了胰蛋白酶和木瓜蛋白酶这2种提取率高的酶为水解用酶,采用L16(45)正交试验确定了这2种酶水解鱿鱼皮以制备胶原蛋白的最佳酶解条件。结果表明,胰蛋白酶和木瓜蛋白酶水解鱿鱼皮以制备胶原蛋白的最佳温度、加酶量、底物浓度、pH、时间分别为55℃、1200U.g-1、1:20、pH8.0、4h和50℃、3200U.g-1、1:20、pH6.0、6h。2种蛋白酶提取的胶原蛋白含量分别为11.08%和11.36%,提取率分别为95.16%和97.56%。

鱿鱼皮胶原蛋白提取前处理的条件优化

试验测定了鱿鱼皮的基本组成成分,探索了酶法提取鱿鱼皮胶原蛋白时前处理的最佳条件。选定了4个因素3,个水平,采用L9(34)正交试验确定了最佳条件。结果表明4,个因素NaOH浓度,NaOH作用时间、异丙醇浓度、活性炭浓度的最佳选择分别为0.15 mol/l、6 h、12%、0.8%,此时提取的胶原蛋白含量为11.08%,提取率为93.6%。

鱿鱼皮酶促水解液Maillard反应合成肉类香味料的研究

研究以鱿鱼皮酶水解液为基料结合其它前体物质进行Maillard反应,产生肉类香味料。研究结果表明,在经胰蛋白酶水解(水解度为20%)后的水解液中添加0.5%L-半胱氨酸盐酸盐、3%食盐、0 5VB1、(1 875%葡萄糖、0.5%Vc等物质后于120℃、80min、pH6.0条件下可产生理想的肉类香味料。

鱿鱼皮酶促水解液Maillard反应合成肉类香味料的研究

研究以鱿鱼皮酶水解液为基料结合其它前体物质进行Maillard反应 ,产生肉类香味料。研究结果表明 ,在经胰蛋白酶水解 (水解度为 2 0 % )后的水解液中添加 0 .5 %L -半胱氨酸盐酸盐、3%食盐、0 .5 %VB1、1.875 %葡萄糖、0 .5 %Vc等物质后于 12 0℃、80min、pH6 .

鱿鱼皮胶原蛋白模拟鱼鳔加工工艺技术研究

以废弃物鱿鱼皮为研究对象,通过对鱿鱼皮提取前处理,胶原蛋白提取,最后模拟加工成鱼鳔的研究。研究结果表明:鱿鱼皮前处理最佳条件为,Na OH浓度为0.12 mol/L,Na OH作用时间5 h,异丙醇浓度为11%,活性炭浓度为0.9%;通过极差分析表明,Na OH浓度影响最为显著,其次异丙醇浓度,Na OH作用时间,活性炭浓度;胶原蛋白提取最佳条件为中性蛋白酶酶解温度50℃,酶解时间55 min,料液比1:13;模拟鱼鳔最佳配比条件为:维生素A 2 160 mg/kg,维生素E 175 mg/kg,K 930 mg/kg,Ca 1 400 mg/kg。

木瓜蛋白酶提取鱿鱼皮胶原蛋白的工艺研究

本文以鱿鱼皮为原料,采用木瓜蛋白酶酶解提取胶原蛋白。考察了底物浓度、酶浓度、酶解时间、pH、温度等工艺条件对胶原蛋白提取率的影响。试验结果表明:木瓜蛋白酶添加量为1%,料液比为1:10,酶解时间8h,酶解温度为40℃时,最高提取率为11.01%。

不同蛋白酶对鱿鱼皮胶原蛋白提取的影响

以鱿鱼皮为原料，研究了胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶和酸性蛋白酶酶法提取胶原蛋白的影响。结果表明，胃蛋白酶添加量为2000U／g，料液比为1：10，4℃条件下反应24h，胶原蛋白提取率最高，平均提取率为33．5％。