孕妇血清妊娠相关蛋白A鲁米诺氧通道免疫测定方法的建立

目的：建立孕妇外周血妊娠相关蛋白A的鲁米诺氧通道免疫测定方法。方法：采用1株鼠抗人PAPP-A单克隆抗体用于生物素标记，兔抗人PAPP-A多克隆抗体包被受体微球，与包被有链霉亲和素的供体微粒共同构成检测试剂，优化检测条件并评价检测性能。结果：本方法的批内及批间精密度为5.91％～7.94％和6.14％～9.69％；分析灵敏度2.8 mU／L，功能灵敏度4.6 mU／L，在2.8～8000 mU／L范围内线性良好；回收率为96.7％～100.3％，通过干扰性实验分析溶血、黄疸和脂血的干扰率均＜10％；当PAPP-A浓度高达8000 mU／L时，无Hook效应；本文所建立方法检测50份临床标本，结果与时间分辨荧光分析法的结果相关系数为0.989。结论：本研究建立的方法能够用于孕妇血清PAPP-A的定量测定，检测性能符合临床诊断试剂的要求。

血清总IgE鲁米诺氧通道免疫分析方法的建立

过敏性疾病是指机体与某些抗原初次接触致敏后,当再次受到相同抗原的刺激引起生理功能紊乱及组织损伤.过敏性疾病是世界上普遍流行的一种非感染性疾病,由于其病因的复杂性及病程的反复性,给临床诊断及治疗带来了一定的困难.目前,临床上常将总IgE检测作为过敏反应的筛查实验;此外,通过测定特异性IgE与总IgE的比例,还能预测临床对患者进行特异性脱敏治疗的疗效[1].目前检测总IgE的方法主要有放射免疫分析试验、酶联免疫吸附试验及化学发光免疫分析试验等,此外IgE检测芯片也被应用于过敏性疾病的检测中[2].鲁米诺氧通道免疫分析技术（luminescent oxygen channeling immunoassay,LOCI）是一种基于单线态氧能量传递,并结合免疫分析的均相免疫测定方法.本研究采用LOCI技术,建立了一种定量测定血清总IgE的方法,并进行了方法学评价.

超敏妊娠相关血浆蛋白A均相化学发光免疫检测方法的建立

目的建立有关急性冠脉综合征(ACS)患者血清中妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)的均相化学发光免疫检测方法。方法使用PAPP-A抗体与受体微球和生物素连接,以双抗体夹心法,生物素化抗体和受体微球与血清中PAPP-A结合,以鲁米诺氧途径免疫分析(LOCI)检测PAPP-A浓度。评价此方法各项性能指标。数据分析使用ELISA Calc软件。结果本研究PAPP-A检测方法灵敏度为0.55 m U/L,回收率为95%~100%;线性、稳定性及特异性良好;重复性批内变异系数(CV)<10%,批间CV<15%;检测不易受血红蛋白、甘油三酯和胆红素的干扰。该方法与时间分辨荧光免疫方法(TRFIA)进行相关分析(r=0.990,P<0.05)。检测104例正常健康人(男/女为43/61,年龄为24岁~69岁)血清PAPP-A,初步推算正常参考范围为1.60 m U/L^25.12 m U/L。结论本研究所建立的超敏PAPP-A检测方法准确性好,灵敏度、回收率、特异性较高,与TRFIA相关性良好,评价了其应用于临床检测的可行性,并为参考范围的确定提供了一定的依据。