欣茨鲍特菌引起泌尿系统感染1例

欣茨鲍特菌属于鲍特菌属,为革兰阴性球杆菌,菌体较小,无芽孢,有荚膜,很少引起人类感染[1]。报道的少数案例涉及呼吸、消化、循环系统等,泌尿系统感染仅在2021年报道过1例[2]。本文介绍了1例本院就诊的欣茨鲍特菌泌尿系统感染病例。报道如下。1临床资料患者男,36岁。主诉:右侧腰腹疼痛不适1月余。现病史:患者在2022年8月2日无明显诱因出现右侧腰腹部胀痛不适,伴发热,无恶心呕吐,无尿频尿急尿痛,无肉眼血尿等不适,遂前往广东省人民医院河源医院就诊,未进一步检查,予以消炎(具体药物不详)等对症治疗后好转;8月28日患者出现尿频、尿急、尿痛,于8月31日前往该院再次就诊,腹部CT平扫示:(1)右侧输尿管下端结石、局部输尿管炎症并右肾轻度积水;(2)左肾多发小结石。患者于9月1日右侧腰腹部胀痛反复,为进一步治疗,9月2日来我院门诊就诊,门诊拟以“右侧输尿管结石”收住院。

1例重症百日咳鲍特菌肺炎成人患者的救治与护理

总结1例系统性红斑狼疮合并重症百日咳鲍特菌肺炎患者的成功救治经验。护理要点包括精准抗菌药物方案构建,完全闭环隔离管理,精细化容量管理,全程重症超声评估以及正念心理鼓励。经过精细治疗及精心护理,患者病情好转出院。

痰中分离出支气管败血鲍特菌1例

鲍特菌属一共包含8个菌种，但只有百日咳鲍特菌、副百日咳鲍特菌和支气管败血鲍特菌这3种以哺乳动物为宿主的病原菌被详细研究。支气管败血鲍特菌具有广泛的宿主范围，宿主包括狗、羊等哺乳动物，不过很少感染人［1］。2013年3月，我们从1例肺癌患者痰液中分离到一株支气管败血鲍特菌，现报告如下。

百日咳鲍特菌BP283基因的实时荧光定量PCR检测方法的建立

目的探讨检测百日咳鲍特菌BP283基因片段的有效方法。方法以百日咳鲍特菌BP283序列为目的基因,设计探针和引物,构建质粒标准品;建立FQ-PCR体系,优化反应条件,并进行方法学评价。结果成功构建了重组质粒pCR2.1-BP283;建立了检测BP283基因片段的FQ-PCR方法:标准曲线相关系数为0.998,最低检测浓度为102copies/μL,对临床其他常见呼吸道病原体不出现特异性扩增曲线,批内及批间变异系数均<4%。结论FQ-PCR方法可成功检测百日咳鲍特菌BP283基因,该方法具有敏感性好、特异性高及重复性好等优点。

环介导恒温扩增技术在百日咳鲍特菌检测中应用研究进展

核酸扩增技术是病原微生物检测的重要武器,其中聚合酶链反应（PCR）技术已经在临床检验中广泛应用。与PCR相比,环介导恒温扩增（LAMP）技术具有操作简便,快速灵敏,对仪器和样本质量要求低等优点,尤其适合病原微生物的即时检验。

百日咳鲍特菌MALDI-TOF MS谱库的扩展及鉴定效果评价

目的对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术鉴定百日咳鲍特菌谱库进行扩展。方法采用Microflex LT软件,用经全基因组测序确认的9株百日咳鲍特菌和1株副百日咳鲍特菌构建蛋白质指纹谱库,对布鲁克数据库进行扩展。对标准菌株ATCC 29213、ATCC 25922、ATCC 700603、ATCC 27853进行MALDI-TOF MS鉴定,评价扩展库的准确性。选取6株百日咳鲍特菌,每个菌株取3个菌落分别用MALDI-TOF MS鉴定,评价试验的精密度。采用36株临床分离株验证扩展谱库对百日咳鲍特菌的识别能力,并进行扩展库前后鉴定结果比较。结果成功构建9株百日咳鲍特菌和1株副百日咳鲍特菌参考谱库,并扩展现有布鲁克数据库Taxonomy(5989)数据库为Taxonomy(5989+)。扩展库准确鉴定4株标准菌株ATCC 29213、ATCC 25922、ATCC 700603、ATCC 27853,对鲍特菌鉴定无干扰;6株百日咳鲍特菌的重复鉴定符合率为100%,精密度良好。用于外部验证的36株菌经扩展后数据库鉴定,种水平鉴定率达86.1%。结论百日咳鲍特菌质谱库的扩展提升了地区性分离菌株鉴定能力。

实时荧光定量PCR快速检测百日咳鲍特菌方法学建立及评价

目的建立实时荧光定量PCR检测百日咳鲍特菌的方法。方法以百日咳鲍特菌的重复插入序列IS481为目的基因,设计探针和引物,以克隆的IS481基因片段为DNA模板,在荧光定量PCR仪上建立实时荧光定量PCR检测方法和标准曲线,并进行灵敏度、重复性、特异性实验。结果建立的定量标准曲线阈值循环数(Ct)与模板拷贝数呈良好线性关系(r=0.998);最低检测浓度为102 copies/μl;批内及批间变异系数均小于4%;对临床其他常见呼吸道病原体不出现特异性扩增曲线。结论实时荧光定量PCR法检测IS481基因可用于百日咳鲍特菌的快速检测,具有较好的灵敏度、特异性及重复性。

2084例急性呼吸道感染患儿鼻咽分泌物中百日咳鲍特菌核酸检测分析

目的对2084例急性呼吸道感染患儿的鼻咽分泌物中百日咳鲍特菌的核酸检测结果进行分析。方法2084例急性呼吸道感染患儿,采集鼻咽抽吸物标本,采用基因序列设计的百日咳鲍特菌IS481靶位特异性引物,对鼻咽抽吸物标本进行荧光定量PCR扩增,随机取阳性扩增产物进行核苷酸序列测定,并将所测序列在GenBank中进行比对。对不同性别、年龄段、发病季节百日咳鲍特菌的阳性检出率进行统计学分析。结果鼻咽抽吸物标本中百日咳鲍特菌阳性率为2.21%(46/2084),不同性别、年龄段、发病季节患儿鼻咽抽吸物标本百日咳鲍特菌阳性检出率差异有统计学意义(χ^2分别为4.186,58.163,13.428;P均<0.05)。结论急性呼吸道感染患儿百日咳鲍特菌感染阳性率较高。

鲍特菌属基因组比较研究进展

鲍特菌属的百日咳鲍特菌、副百日咳鲍特菌和支气管炎败血鲍特菌都是引起哺乳动物呼吸道感染的病原菌,宿主范围各不相同.本文从基因组一般结构、插入序列元件和菌种进化、菌种的特有基因和宿主范围限制、重要毒力因子等4个方面对三者进行了比较分析.

西安市与上海市百日咳鲍特菌对大环内酯类抗生素的耐药性、耐药相关分子特征及多位点抗原序列分型的比较研究

目的 比较西安市与上海市临床分离百日咳鲍特菌对大环内酯类抗生素的耐药性、耐药相关分子特征及多位点抗原序列分型(MAST)特征,为改进我国百日咳的防治和疫苗策略提供参考。方法 采用E-test法检测2018年至2019年西安市和上海市临床分离百日咳鲍特菌对红霉素、阿奇霉素、克拉霉素的耐药性;采用PCR法检测可水平转移的耐药基因与耐药相关突变位点;采用MAST方法对菌株进行分型,比较两市菌株耐药性的差异及抗原序列型别构成比的差异。结果 本研究共分离出百日咳菌株60株,其中西安市34株,上海市26株。西安市与上海市临床分离百日咳鲍特菌对大环内酯类抗生素的耐药性存在统计学差异(χ^(2)=13.650,P<0.001)。两市菌株MAST分型型别构成比也存在统计学差异(χ^(2)=18.642,P<0.001),西安市菌株以prn1/ptxP1/ptxA1/fim3-1/fim2-1型别为主,而上海市prn1/ptxP1/ptxA1/fim3-1/fim2-1与prn2/ptxP3/ptxA1/fim3-1/fim2-1型别几乎各占一半。两市所有耐药株均检出A2047G位点突变,所有敏感株均未检出该突变;耐药基因中,部分耐药株检出甲基化酶基因ermA和ermB,未检出其他耐药基因;所有敏感株均未发现耐药基因和位点突变。结论 西安市与上海市临床分离百日咳鲍特菌对大环内酯类抗生素的耐药性存在差异,两市菌株MAST型别分布亦存在差异,应进一步加强中国百日咳菌株耐药性和基因型演变的监测。

一株减毒百日咳鲍特菌的构建及生物学特性分析

百日咳是传染性强、感染率高的急性呼吸道传染病,主要感染婴幼儿,是婴儿死亡的主要原因之一。百日咳鲍特菌(Bordetella pertussis)是引起百日咳的最主要病原菌。近年来世界各地多次出现百日咳暴发,迫切需研制更加有效的新型百日咳疫苗。本研究构建了一株减毒百日咳活疫苗BPTM1,利用同源重组方法敲除编码百日咳鲍特菌主要毒力因子百日咳毒素(pertussis toxin,PTX)和皮肤坏死毒素(dermonecrotic toxin,DNT)的基因,并用大肠埃希菌的同源基因置换了负责气管细胞毒素(tracheal cytotoxin,TCT)转运的基因amp G。通过聚合酶链反应验证毒素及相关基因的敲除和置换,蛋白免疫印迹法检测表明PTX的S1亚基未表达。体外生长曲线和体内定植曲线均表明,相比于野生型百日咳鲍特菌BPMM,减毒BPTM1的生长和定植能力未受影响,其所致肺部病理效应减轻,而所诱导的百日咳鲍特菌特异性Ig G、Ig G1、Ig G2a抗体保持高水平。本研究表明,减毒百日咳鲍特菌BPTM1有可能成为百日咳候选疫苗。

百日咳鲍特菌外膜蛋白的致病性与免疫原性

百日咳鲍特菌外膜蛋白是存在于细菌表面的一组功能性蛋白质,包括P69、FhaC和BrkA,其中以P69最为重要。P69分子中的RGD-(GGxxP)_5和(PQP)_5两个富含脯氨酸结构区分别具有粘附作用和很强的免疫原性,其抗体具有较强的保护作用,可作为无细胞型百日咳疫苗中的一个重要抗原成分。P69具有多态性,百日咳流行菌株的P69已从P69A转变成以P69B或P69C为主,所引起的抗原性漂移与疫苗预防效果下降有直接关系。FhaC是该菌的一种外膜蛋白,能特异地辅助丝状血凝素分泌;BrkA不仅具有蛋白转运功能,且能抵抗抗体依赖补体介导的细胞毒作用。

全身和黏膜免疫在小鼠感染中对百日咳鲍特菌和副百日咳鲍特菌的交叉保护作用

自商业性百日咳疫苗产生以来,百日咳的发病率明显下降。但一些研究显示,百日咳疫苗对副百日咳鲍特菌几乎没有明显的保护作用,而副百日咳鲍特菌同样会引起典型的百日咳症状。经皮下和腹腔内注射疫苗,无法建立起针对百日咳鲍特菌和副百日咳鲍特菌的交叉保护作用。

鲍特菌属3型分泌系统的调控

在鲍特菌属中，百日咳鲍特菌（B．pertussis，Bpe）、副百日咳鲍特菌（B．papapcrtussis，Bpa）和支气管败血鲍特菌（B．bronchiseptica，Bbr）都包含1个高度保守的3型分泌系统。目前只有Bbr的3型分泌系统被详细研究，其3型分泌系统，受BvgAS双成分调控系统调节，由22个基因组成，都属于bsc基因座，包括BopD、Bsp22、BopB和BscN等。在bsc基因座附近新发现了5个保守的开放阅读框架（ORF）——btrS、btrX、btrV、btrW和btrU，这为研究鲍特菌属3型分泌系统提供了新的途径。

西安市与上海市婴儿感染百日咳鲍特菌基因型比较

目的:探讨西安市与上海市临床分离百日咳鲍特菌的基因型特征。方法:收集2018—2019年在西安市和上海市哨点监测医院和社区采集的1岁以下疑似百日咳患儿的鼻咽拭子,经分离培养所得百日咳鲍特菌采用多位点抗原序列分型(MAST)和多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)方法分析其基因型。结果:共采集到疑似百日咳患儿鼻咽拭子1200份,经分离培养得到百日咳鲍特菌60株,其中西安市34株,上海市26株。西安市百日咳鲍特菌的主要MAST型别为prn1/ptxP1/ptxA1/fim3-1/fim2-1(32/34,94.12%),而上海市百日咳鲍特菌的主要MAST型别为prn1/ptxP1/ptxA1/fim3-1/fim2-1(13/26,50.00%)和prn2/ptxP3/ptxA1/fim3-1/fim2-1(11/26,42.31%),两市百日咳鲍特菌MAST型别分布差异有统计学意义(χ2=18.642,P<0.01)。西安市百日咳鲍特菌以MT195(13/34,38.24%)、MT55(10/34,29.41%)、MT104(9/34,26.47%)型别居多,而上海市百日咳鲍特菌以MT27型为主(12/26,46.15%),两市百日咳鲍特菌MLVA型别分布差异有统计学意义(χ2=15.866,P<0.01)。结论:西安市与上海市临床分离婴儿感染百日咳鲍特菌基因型存在差异,应进一步加强中国百日咳鲍特菌基因型演变的监测。

实时荧光定量聚合酶链式反应检测百日咳鲍特菌的效能研究

背景百白破疫苗效价不足事件引发公众对百日咳的关注,但目前各种百日咳实验室检测方法均具有一定的局限性,无法满足快速进行病原学诊断的临床需求。目的评价一种商品化的实时荧光定量聚合酶链式反应(Q-PCR)试剂盒对百日咳鲍特菌(BP)感染的临床检测效果。方法2016年11月-2017年4月在首都医科大学附属北京儿童医院采集无热咳嗽患儿鼻咽拭子302例,以及临床诊断为百日咳患儿鼻咽拭子50例。采用Q-PCR与细菌培养方法筛查302例无热咳嗽患儿是否存在BP感染,并比较两种方法检测50例临床诊断百日咳病例的阳性率,综合评估Q-PCR的临床应用价值。结果302例无热咳嗽患儿中,以细菌培养为金标准时,Q-PCR检测的灵敏度为78.6%(11/14),特异度为95.8%(276/288),阳性预测值为47.8%(11/23),阴性预测值为98.9%(276/279)。在50例临床诊断百日咳病例的鼻咽拭子标本中,Q-PCR检测的阳性率为34.0%(17/50),细菌培养的阳性率为22.0%(11/50),两者比较,差异无统计学意义(χ^2=3.125,P=0.077)。结论以细菌培养结果为金标准,Q-PCR筛查百日咳的灵敏度及特异度较高;在为临床诊断百日咳患儿提供病原学证据中,Q-PCR与细菌培养方法检测阳性率相当。

免提取冻干式百日咳鲍特菌核酸检测方法建立及应用

目的本研究建立快速、便携、特异、敏感的百日咳鲍特菌实时定量PCR(Q-PCR)核酸检侧方法,并初步探索在呼吸道感染患者中百日咳鲍特菌(Bordetella pertussis)检测的应用价值。方法靶基因采用IS481基因,优化反应试剂实现免核酸提取直接扩增,对体系进行冻干处理,简化操作步骤。并对所收集得到的上呼吸道感染者的咽拭子标本进行检测评价。结果本检测体系检出限达到100copies/mL,227例急性上呼吸道感染者的咽拭子标本中,其阳性检出率为3.96%。结论成功建立了高敏感、简便、快速的百日咳核酸检测方法,为百日咳诊断提供了新手段。

首次从人创面分泌物中分离出创口鲍特菌及病例简报

对1株从人感染创面分泌物分离的特殊菌进行鉴定和药敏试验。收集该患者的创面分泌物标本,采用血琼脂平板和麦康凯琼脂平板进行分离培养。VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定系统鉴定为鲍特菌属(置信度为97%),VITEK MS全自动快速微生物质谱检测系统和16S rRNA分析鉴定结果均为创口鲍特菌(置信度均为99.9%)。药敏试验结果显示,创口鲍特菌对头孢唑林、头孢他啶、头孢吡肟、头孢曲松、庆大霉素、妥布霉素、左氧氟沙星、复方磺胺甲口恶唑均耐药,对哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南和美罗培南均为中介,仅对阿米卡星敏感。此病例为国内首次从临床标本中分离出创口鲍特菌的报告,为指导创口鲍特菌感染的快速、准确鉴定和临床合理用药提供参考。

成人百日咳鲍特菌肺炎1例

百日咳是由百日咳杆菌(主要是百日咳鲍特菌)感染引起的急性呼吸道传染病,由于百白破疫苗的使用,该病患病率逐渐减少。但近年来,百日咳再次成为全球范围内值得关注的公共卫生问题,尤其是儿童,研究发现注射百白破疫苗的儿童,随着年龄增长,疫苗保护效力逐渐下降是导致再次流行的原因之一。

一株红霉素耐药百日咳鲍特菌的完整基因组分析

目的明确国内一株红霉素耐药百日咳鲍特菌P2013109的全基因组序列,了解其基因特征。方法对一株抗原基因型为ptxA1/ptxC1/ptxP1/prn1/fim2⁃1/fim3⁃1/tcfA2的临床分离红霉素耐药百日咳鲍特菌P2013109采用了二代和三代高通量测序技术进行了全基因组测序,对基因组进行组装、基因预测和功能注释,并与包含我国疫苗株CS、国外疫苗株Tohama I,以及国外发表临床分离的共15株菌的完整基因组序列进行全基因组比较分析。结果P2013109的完整基因组序列总长度4126010 bp,GC含量为67.72%,预测基因有4085个。该基因组的所有拷贝23s rRNA基因均显示A2047G突变。相比P2013109,其他15株菌主要存在3个比较大的缺失区域。另外,将P2013109与其他16株进行系统发育树分析,显示全部菌株分成3个遗传分支。Tohama I和CS这两个疫苗株归类为Ⅰ型,它们与其他2个型别相比较呈现76个SNPs。P2013109独立为Ⅱ型,与其他菌株的进化关系相对较远,相比较其他菌株呈现25个SNPs。国外菌株为Ⅲ型,与其他菌株相比呈现21个SNPs。结论国内当前流行的红霉素耐药百日咳鲍特菌具有独特的系统发育分支,其遗传进化与疫苗株和国外流行菌株不同。