基于化学模式识别结合灰色关联度法的鲜地黄药材质量评价

目的:构建基于化学模式识别和灰色关联度法的鲜地黄药材多指标综合评价模型,为鲜地黄药材整体质量评价提供参考。方法:收集不同产地的32批鲜地黄药材样品,测定各批样品中总灰分,酸不溶性灰分,浸出物,梓醇、地黄苷D、铅、镉、砷、汞、铜含量与指纹图谱,采用聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析和灰色关联度法对各指标数据进行分析。结果:HCA和PCA均可将32批鲜地黄药材分为4类,但无明显产地聚集现象;指纹图谱中峰1~3、9、10的峰面积及总灰分、浸出物、梓醇含量是体现各产地鲜地黄药材质量差异的主要指标;32批鲜地黄药材灰色关联度为0.036~0.042,灰色关联度差异为0~13.89%,综合质量差异不大。结论:化学模式识别结合灰色关联度法构建的多指标综合评价模型分析结果客观、科学、准确,可用于鲜地黄药材质量的综合评价。

鲜地黄本草功效考证与现代药理学研究

考据历代本草记载的鲜地黄功效,并通过检索知网、万方数据库、维普数据库来了解鲜地黄的现代临床应用情况和药效物质研究进展。结果发现,除中国药典2020年版记载的清热生津、凉血止血功效外,鲜地黄还可用于活血生新、散瘀止痛、养阴生津。鲜地黄及其相关复方广泛用于外伤出血、瘀血、痛经、产伤内损、伤寒心悸、中医神志病(狂症、百合病)、消渴、热毒疮疡、热病阴伤、瘟疫病等治疗。现代药理学研究显示,鲜地黄的主要活性成分有梓醇、麦角甾苷等,它们具有抗氧化、抗炎、神经保护、胰岛素抵抗改善作用。鲜地黄及其相关复方对慢性肝炎、鼻咽癌放疗相关的口腔黏膜不良反应、麦粒肿、霰粒肿、抑郁症、失眠、焦虑症等的临床治疗效果较好。

ICP-MS测定鲜地黄中26种金属元素及不同加工工艺元素差异性比较

目的:建立电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)同时测定鲜地黄中Al、As、B、Ba、Ca、Cd等26种金属元素,分析和比较5种不同工艺加工鲜地黄样品中金属元素的组成差异,为完善鲜地黄的质量评价体系、筛选鲜地黄最佳加工工艺和产品开发提供参考。方法:制备了鲜地黄的喷雾干燥、冷冻干燥、微波干燥、真空干燥及烘箱干燥5种样品共15份,经微波消解后,采用ICP-MS同时测定5种不同加工工艺鲜地黄中26种金属元素,同时采用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)及聚类分析(HCA)统计学方法进行数据处理和挖掘。结果:各元素线性关系良好(r>0.999),检测下限为0.004~12.493μg·L^(-1),精密度符合规定(RSD<5%),各元素加样回收率为98.411%~100.541%,RSD为1.463%~3.505%;不同加工工艺鲜地黄样品含有丰富的金属元素,其中K、Na、Ca、Mg、Al、Fe、Zn 7种元素的含量均较高,但不同加工工艺鲜地黄样品金属元素含量差异较大;其中鲜地黄喷雾干燥后人体必须常量元素K、Na及人体所需的微量元素Fe、Zn、Se、Cu、Co、Mo等的含量均显著高于其他加工样品。PCA结果显示,15份不同加工工艺的地黄样品均能清晰地聚成5组;通过OPLSDA提取出对不同加工工艺鲜地黄分组贡献率>1的5种金属元素,分别为K、Al、Na、Mg、Fe;HCA分析将15份样品分为2个组别,其中冷冻干燥和微波干燥为一组,烘箱干燥、喷雾干燥和真空干燥为一组,其第二组别下细分的小组中,喷雾干燥和真空干燥又聚为一组。结论:建立的方法简单、可靠、准确且灵敏度高,可用于鲜地黄不同加工样品中金属元素的测定;综合本研究结果及中药材加工技术的发展趋势和市场需求,喷雾干燥法能较好地保持鲜地黄的颜色及丰富的金属元素,且能实现生产化,喷雾干燥法可作为鲜地黄的加工方法。为完善鲜地黄质量控制体系及其开发利用提供一定的研究基础。

不同干燥条件对鲜地黄中梓醇含量的影响

不同干燥条件对鲜地黄中梓醇含量的影响边宝林杨健王宏洁倪慕云贾仲华（中国中医研究院中药研究所北京１００７００）地黄为玄参科植物地黄Ｒｅｈｍａｎｎｉａｇｌｕｔｉ－ｎａｓａＬｉｂｏｓｃｈ．的块根。在临床用药中分为鲜地黄、干地黄（生地黄）及熟地黄３种，其功能...

鲜地黄化学成分的分离鉴定及活性作用初探

目的:对鲜地黄的化学成分进行分离、鉴定,寻找药效活性强的化合物。方法:采用化学分离手段,从鲜地黄新鲜的根茎中分离得到6个化合物。结果:分离得到6个化合物,通过波普鉴定谱分别为:毛蕊花糖苷(1)、梓醇(2)、桃叶珊瑚苷(3)、水苏糖(4)、胡萝卜苷(5)、β-谷甾醇(6)。并观察了体外毛蕊花糖苷对RAW细胞的作用。结论:毛蕊花糖苷对LPS诱导RAW细胞增殖具有一定的抑制作用。

鲜地黄加工炮制后新成分含量变化研究

目的:分析鲜地黄加工炮制成生地黄和熟地黄后新产生成分含量变化。方法:采用HPLC法,研究鲜地黄加工成生地黄及炮制成熟地黄中,新产生的2个化学成分:5-羟甲基麦芽酚(DDMP)和5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量变化,并测定市售生地黄和熟地黄中两者的含量。色谱条件:Zorbax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水(5∶95);流速1.0 mL·min-1;检测波长280 nm。结果:鲜地黄中未检测到DDMP和5-HMF,加工炮制成生地黄和熟地黄后均检测到,其在熟地黄中的含量高于生地黄,在熟地黄中两者的含量均随炮制时间的延长而逐渐升高,分别炮制至24 h和32 h达到最高,随后降低。在市售3批生地黄和10批熟地黄中均检测到这2个成分,5-HMF的含量熟地黄高于生地黄,DDMP含量生地黄和熟地黄没有明显差异。结论:鲜地黄加工成生地黄及炮制成熟地黄后产生DDMP和5-HMF,含量随炮制时间延长逐渐升高。熟地黄中5-HMF含量与生地黄中有明显差异。

血热出血模型大鼠血清中鲜地黄高效液相色谱分析

目的:对阴虚血热出血大鼠含鲜地黄血清进行分析,探索鲜地黄清热凉血药效的物质基础。方法:给予血热出血症模型大鼠鲜地黄,采集血清,用高效液相色谱法分析大鼠含药血清、正常血清以及鲜地黄药材的色谱,研究鲜地黄在血中移行成分以及鲜地黄对大鼠血清中固有成分的影响。结果:在血热出血症模型大鼠含药血清中检测到了鲜地黄的有效成分——梓醇的色谱峰;且发现血清中和药材中有3种相同的共有成分;鲜地黄对模型大鼠血清中1种固有成分的升高有抑制作用。结论:鲜地黄中梓醇及3种未明成分可能是其清热凉血物质基础;鲜地黄对动物血清中固有成分代谢的影响可能是鲜地黄清热凉血药效的机制。

怀鲜地黄HPLC指纹图谱研究

目的建立怀鲜地黄指纹图谱,为有效控制鲜地黄药材的质量奠定基础。方法将鲜地黄榨汁、取汁,采用梯度洗脱的方法,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,检测波长215、230 nm,柱温30°C,体积流量1 mL/min。采用药典委员会指纹图谱相似度评价软件(2004 A版)进行数据处理。结果对10批怀鲜地黄进行HPLC测定,在215、230 nm下各确定12个共有峰,建立了鲜地黄两个波长下的指纹图谱。结论该方法准确、可靠,可为怀鲜地黄的质量控制提供参考。

速冻冷藏对鲜地黄汁中梓醇含量的影响

目的:观察速冻冷藏对鲜地黄汁中梓醇含量的影响。方法:应用速冻冷藏的方法对鲜地黄汁进行保鲜贮藏,采用高效液相色谱法测定鲜地黄汁中的梓醇含量,以乙腈-0.1%磷酸水溶液(1∶99)为流动相,检测波长:210nm,流速:1.0mL/min,柱温:25℃。结果:6个月内鲜地黄汁中梓醇含量基本保持稳定,鲜地黄汁在速冻冷藏条件下保鲜贮存期至少可达6个月。结论:速冻保鲜技术简单、方便,可用于鲜地黄汁的保鲜。

鲜地黄色素的稳定性研究

目的:对鲜地黄色素的稳定性进行初步研究。方法:用分光光度法测定色素溶液在不同环境下的吸光度,以外观变化和吸光度的大小比较色素的稳定性,结果:用无水乙醇超声提取的鲜地黄色素在碱性条件下稳定,紫外线和还原剂对其稍有影响,高温、氧化剂及几种金属离子对色素有较大影响。结论:鲜地黄中的黄色素在一定条件下稳定,具有一定的开发利用价值。

木豆叶、鲜地黄提取物对ox-LDL损伤的HUVEC的保护作用

目的研究木豆叶、鲜地黄提取物(DMT)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的影响,初步探讨DMT防治动脉粥样硬化的机制。方法应用血清药理学方法制备正常对照、辛伐他汀、DMT血清,以供细胞实验使用。采用ox-LDL损伤HUVEC,与各组药物共培养,即空白组、模型组、辛伐他汀组(15%辛伐他汀血清)及DMT低(5%DMT血清)、中(10%DMT血清)、高剂量组(15%DMT血清),24 h后MTT法检测细胞活力;收集细胞,流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)含量;硝酸还原酶法检测上清液NO含量;ELISA法检测上清液内皮素(ET-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)含量;Western Blot法检测细胞凝集素样氧化低密度脂蛋白受体(Lox-1)、Caspase-3、Cytc蛋白的表达。结果与模型组比较,辛伐他汀组及DMT低、中、高剂量组细胞活力明显提高(P<0.01);DMT低剂量组ROS水平明显降低(P<0.05);辛伐他汀组细胞上清液ET-1、VCAM-1含量及Lox-1、Caspase-3、Cytc蛋白含量明显降低(P<0.05,P<0.01);DMT低剂量组细胞Caspase-3、Cytc蛋白含量明显降低(P<0.01);DMT中剂量组细胞上清液ET-1、VCAM-1含量及Lox-1、Caspase-3、Cytc蛋白含量明显降低(P<0.05,P<0.01),细胞上清液中NO含量明显升高(P<0.01);DMT高剂量组细胞上清液ET-1、VCAM-1含量及Lox-1、Cytc蛋白含量明显降低(P<0.01),NO含量明显升高(P<0.01)。结论DMT能够抑制ox-LDL诱导的HUVEC损伤,恢复其收缩舒张分泌功能,其机制可能与影响Lox-1介导的内皮细胞氧化应激有关。

鲜地黄中梓醇提取工艺

对鲜地黄中梓醇的提取方法进行优选 ,采用正交设计法 ,确定了最佳提取工艺 ,即 3倍量甲醇 ,加热回流提取2次。

鲜地黄中两个酰胺类化合物通过SIRT3/Bcl-2/Caspase-3信号通路减轻LPS诱导的NRK-52e细胞损伤

目的:探究鲜地黄中两个酰胺类化合物rehmagluamide(Reh)和rehmanalkaloid C(Reh C)对LPS诱导NRK-52e细胞损伤的干预作用及潜在机制。方法:建立LPS诱导的NRK-52e细胞损伤模型,加入SIRT3选择性抑制剂3-TYP,ELISA法检测细胞上清液中炎症因子TNF-α与IL-6水平;流式细胞术检测细胞凋亡、活性氧(ROS)与线粒体膜电位(JC-1)水平;细胞免疫荧光检测细胞中SIRT3蛋白及线粒体凋亡关键蛋白Caspase-3、Cleaved Caspase-9、Bax、Bcl-2表达。结果:与模型组比较,Reh和Reh C可不同程度降低LPS作用下NRK-52e细胞凋亡及TNF-α、IL-6、ROS水平和Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达,升高线粒体膜电位、SIRT3蛋白表达及Bcl-2/Bax水平,但在加入3-TYP后Reh和Reh C的改善作用显著降低。结论:Reh和Reh C可能通过SIRT3/Bcl-2/Caspase-3信号通路减轻LPS诱导的NRK-52e细胞损伤。

鲜地黄提取物中总环烯醚萜类含量测定

本研究的目的在于建立测定鲜地黄提取物中总环烯醚萜类成分含量的方法。采用乙醇和酸处理样品后，用紫外分光光度法进行测定。发现梓醇在0．066-0．143mg／mL范围内有良好的线性关系（r=0．99），其稳定性、重复性、回收率都较好，从而建立了测定鲜地黄提取物中总环烯醚萜含量的方法，该方法简便、快速、可靠。并用此法测定了总环烯醚萜类成分的含量。

金菊鲜地黄汤防治鼻咽癌放疗所致口腔黏膜反应的临床研究

目的:观察金菊鲜地黄汤防治鼻咽癌放疗所致口腔黏膜反应的临床疗效。方法:将200例需行首次常规放疗的鼻咽癌患者采用随机数字表法随机分为两组,两组均采用三维放疗。对照组100例采用常规西医口腔处理,给予生理盐水清洗口腔、鼻咽及口咽部,清洗后采用甲硝唑注射液漱口,每日4~6次;治疗组100例在对照组治疗基础上加服金菊鲜地黄汤(金银花、菊花、鲜地黄、沙参、麦冬、玉竹、太子参、甘草、丹参、川贝母),每日1剂,水煎药汁至200 m L,分早、晚口服。两组均从放疗第1天开始治疗,直至放疗结束判定疗效。结果:治疗组出现放射性口腔黏膜反应的时间、累积放射剂量均较对照组差别有统计学意义(P<0.05);治疗组总放疗时间少于对照组(P<0.05);治疗组治疗后卡氏评分明显高于对照组(P<0.05)。结论:金菊鲜地黄汤能有效防治鼻咽癌放疗所致口腔黏膜反应。

鲜地黄联合人工肝治疗慢性重型肝炎疗效研究

目的研究口服鲜地黄汁联合人工肝支持系统对慢性重型肝炎的治疗效果。方法将48例患者随机分为两组,在给予重型肝炎综合治疗及人工肝治疗的基础上,治疗组给予鲜地黄汁,每日60ml分服;对照组给予乳果糖口服,每次10ml,每日3次。分别于治疗前及治疗后2周观察患者症状、肝功能、凝血酶原活动度及血清内毒素、细胞因子(TNF、IL-1β)变化。结果治疗前慢性重型肝炎口干发生率高达81.40%,腹胀发生率为67.44%,内毒素血症发生率为100%。经治疗,两组症状均有所好转,胆红素、内毒素、细胞因子下降,凝血酶原活动度回升。与对照组比较,治疗组在口干舌燥、大便干结、胆红素下降、凝血酶原活动度回升、内毒素下降及细胞因子下降等方面均优于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论鲜地黄可促进排便,有效降低血清内毒素及促炎性细胞因子水平,促进胆红素下降,缩短凝血酶原时间,减少严重出血的危险,并可改善口干舌燥等症状。

施今墨运用鲜地黄验案3则

地黄,一名"地髓",因其丰腴润泽,犹如地中之精髓[1];又名"芐",张隐庵谓其"性惟下行,故字从下"。20世纪60年代,由于受到来源、保存困难等因素的影响,鲜药应用出现了明显的萎缩状况。至80年代后期,中药临床基本都以干代鲜,鲜药在各大中城市基本无供应[2]。近年来,随着物质生产的不断丰富,以及鲜药保存及作用研究的不断深入,鲜药供应逐渐恢复。但由于鲜药使用有所中断,导致临床运用较为生疏.

UPLC/ESI-Q-TOF MS法分析鲜地黄、生地黄、熟地黄的化学成分

目的建立超高效液相色谱-电喷雾/四极杆飞行时间串联质谱联用(UPLC/ESI-Q-TOF MS)法分析鲜地黄、生地黄、熟地黄中的化学成分。方法分析采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,1.8μm);流动相为0.1%甲酸溶液-甲醇,梯度洗脱;柱温40℃;体积流量0.3 m L/min;进样量2μL。结果共鉴定了26个化学成分,包括12个环烯醚萜苷、8个苯乙醇苷、3个核苷、2个有机酸、1个紫罗兰酮。梓醇、益母草苷、毛蕊花糖苷是鲜地黄和生地黄中的主要成分,而在熟地黄中含有量较低;地黄苷D在3种炮制品中的含有量均较高,比较稳定。结论该方法可为控制地黄质量提供科学依据。

鲜地黄低聚糖纯化及其理化特性和抗氧化活性研究

采用超声法和热水法对鲜地黄低聚糖进行提取并进一步纯化,分别得到两组片段GRCP和GRSP。通过对其糖类组成及含量、热稳定性和抗氧化活性等进行研究,结果表明:GRCP和GRSP的碳水化合物含量分别是901.39±0.73和948.06±5.03 mg/g,单糖组成均以半乳糖(含量分别是51.39%和51.56%)和葡萄糖(含量分别是43.24%和43.80%)为主,包括少量阿拉伯糖、甘露糖、木糖、果糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸。两组片段有相似的糖类红外特征峰,主要成分为低聚糖,其中以水苏糖为主,热稳定性结果表明二者的结构分别在205.5、209.0℃下较为稳定。二者均有一定的清除DPPH自由基和超氧阴离子自由基的能力,为以鲜地黄为原料进行开发和利用提供一定的研究思路与理论参考。

鲜地黄的化学成分研究

目的:研究鲜地黄的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、MCI树脂柱色谱及HPLC制备技术对鲜地黄的乙醇提取物进行分离纯化,并采用波谱技术和理化性质鉴定其结构。结果:从鲜地黄中分离得到19个化合物,分别鉴定为:地黄三萜A(1)、3-epi-pomolic acid(2)、大根香叶烯B(3)、dihydroxy-β-ionone(4)、β-谷甾醇(5)、泡桐素(6)、1-(4-methyl-2-furanyl)-2-(5-methyl-5-ethenyl-2-tetrahydrofuranyl)-propan-1-one(7)、梓醇(8)、筋骨草醇(9)、异毛蕊花糖苷(10)、毛蕊花糖苷(11)、海胆苷(12)、焦地黄苯乙醇苷B1(13)、苯甲醇-β-巢菜糖苷(14)、苯乙醇-β-巢菜糖苷(15)、苯乙醇-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(16)、卫矛醇(17)、新地黄苷A(18)、rehmapicrogenin(19)。结论:其中,化合物1为新化合物,化合物2、3、6、14、17为首次从该植物中分离得到。