鲟鱼肝酶解条件优化及酶解液对双歧杆菌增殖效果的研究

为提高鲟鱼肝脏的加工附加值,使用碱性蛋白酶,以水解度为评价指标,在单因素试验的基础上,通过Plackett-Burman试验、响应面分析法优化鲟鱼肝蛋白酶解条件。在此条件下,进一步探究了酶解液对双歧杆菌的促生长效果。结果表明,最优酶解条件为碱性蛋白酶添加量10 540 U/g鱼肝蛋白、体系初始p H值10.0、酶解时间8.6 h、酶解温度45℃、料液比1∶10(g∶m L),此条件下水解度(81.7%)是优化前(40.4%)的1.02倍。鲟鱼肝蛋白酶解液对青春双歧杆菌、两歧双歧杆菌、动物双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌和婴儿双歧杆菌6种均具有显著的促生长效果。研究结果为鲟鱼加工副产物利用提供了新途径,同时也为双歧杆菌促生长因子的研发提供新思路。

鲟鱼肝中蛋白磷酸酶2A的提取工艺优化

以鲟鱼肝为研究对象,对蛋白磷酸酶2A的提取工艺进行优化研究。基于溶剂提取法,在提取剂的类型、pH值、料液比、Triton-X100体积浓度四个单因素试验基础上,进行三因素三水平的正交试验。结果表明,最佳提取工艺条件为:提取剂为无蔗糖的tris-HCl缓冲液、pH值为8.0、料液比为1∶6、Triton-X100的体积浓度为0.8%.为鲟鱼肝的综合利用及蛋白磷酸酶2A制备奠定了新的理论基础。

高效液相色谱串联质谱法同时测定大黄鱼肝和鲟鱼肝中的脂溶性维生素

建立了一种同时测定6种脂溶性维生素的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定方法。样品经皂化后,用正己烷提取,旋转蒸发浓缩,采用LC-MS/MS选择反应监测(SRM)正离子模式测定,可同时对大黄鱼肝和鲟鱼肝中的脂溶性维生素进行定性和定量。6种脂溶性维生素在0.2~2μg/mL呈现良好的线性关系,相对标准偏差为8.1%~13.6%,方法的平均回收率范围为72.6%~118.3%。

人工养殖鲟鱼鱼肝中辅酶Q_(10)提取工艺的研究

对人工养殖鲟鱼鱼肝中辅酶Q10进行提取工艺的研究。人工养殖鲟鱼鱼肝经除血水、去脂肪等预处理,然后采用醇-碱皂化法提取辅酶Q10。通过正交实验,确定皂化反应的最佳工艺条件,结果表明提取辅酶Q10的最佳工艺条件是NaOH浓度为7.00%、乙醇/水体积比为100.00%、没食子酸/鱼肝质量比为7.00%、皂化时间为30min,在此条件下辅酶Q10的提取率为0.15%。对粗提液采用薄层层析法和紫外吸收法进行定性和定量分析。

柱层析分离纯化人工养殖鲟鱼鱼肝中辅酶Q_(10)工艺的研究

对人工养殖鲟鱼鱼肝中提取的辅酶Q10进行分离纯化工艺的研究。通过薄层层析法选择最佳淋洗液,用硅胶柱层析对人工养殖鲟鱼鱼肝中提取的辅酶Q10进行分离纯化。结果表明,以石油醚/乙醚(10/1,v/v)的混合溶剂为淋洗液,硅胶柱层析分离纯化辅酶Q10的提取液,淋洗速度为3mL/min。对纯化的辅酶Q10进行鉴定,其薄层层析谱和紫外吸收光谱与标准辅酶Q10的相符。