散鳞镜鲤皮肤囊肿病病原的分离与鉴定

吉陶单极虫隶属于后生动物亚界,粘体动物门,粘孢子纲,双壳目,单极虫科,单极虫属。目前,已报道单极虫属种类约100余种,主要寄生于淡水鱼类,少数种类可寄生于海水鱼类当中。绝大部分种类不会导致鱼类疾病,仅少数几种单极虫会导致鱼类的大量死亡,如寄生于异育银鲫皮肤的“肤孢子病”武汉单极虫、寄生于异育银鲫鳃上的“鳃孢子虫病”汪氏单极虫以及寄生于鲤或散鳞镜鲤肠道或皮肤的吉陶单极虫等。

池塘培育大规格芙蓉鲤鲫技术试验

芙蓉鲤鲫(原名芙蓉鲫)是以散鳞镜鲤为母本、兴国红鲤为父本进行品种间杂交,得到杂交种芙蓉鲤,再以芙蓉鲤为母本,红鲫为父本进行远缘杂交,得到新型杂交鲫鱼——芙蓉鲤鲫。该鱼具有性状稳定、变异系数低、食性杂、适应性广,具有耐低氧、抗病力强、耐操作运输、生长快、肉食好等特点。

框鳞镜鲤♀×青鱼♂杂种F)1胚胎发育和仔鱼早期发育初步研究

采用人工催产和干法受精技术,对框鳞镜鲤♀×青鱼♂进行了2次杂交试验,共获受精卵878.9万粒,用网箱和环道孵化方法共得到培育4d仔鱼358万尾。受精率94.15%,孵化率51.4%。水温控制在23～24℃,受精后5min胚盘隆起,约58min进入2细胞期,1h10min进入4细胞期,1h25min进入8细胞期,1h43min进入16细胞期,1h53min进入32细胞期,2h20min进入多细胞期,2h49min进入囊胚早期,4h30min进入囊胚中期,5h18min进入囊胚晚期,6h30min进入原肠早期,7h30min进入原肠中期,9h30min进入原肠晚期,10h20min进入神经胚期,12h00min进入胚孔封闭期,14h30min进入眼泡出现期,18h20min进入尾芽期,23h30min进入晶体出现期,25h00min进入肌肉效应期,27h55min进入心脏搏动期,40h33min至45h30min为孵出期。胚后发育观察到4日龄,4日龄后下塘培育乌仔,该杂交组合胚胎发育时间介于双亲之间。同时,观察了杂种胚胎发育各时期中自卵裂、囊胚、原肠作用、器官形成至孵出期的发育异常现象,畸形率为51.8%。

鲤鲫移核鱼与散鳞镜鲤杂交优势及遗传性状的研究

本研究将鲤鲫移核鱼进行有性杂交,使其遗传性状得到改良,效果显著。试验材料为鲤鲫移核鱼 F_2?(以下简称移核鱼)和散鳞镜鲤?(以下简称镜鲤),经杂交获 F_1(以下简称颖鲤)。当年颖鲤个体增重平均比双亲快 47％,群体增重平均快 109％;二冬龄个体增重平均快60.1％,群体增重平均快75.11％。颖鲤含肉率为74.58％,移核鱼和镜鲤为61.7％与72.21％。颖鲤和父母本肌肉蛋白质含量分别为18.35％,17.37％和16.95％。模糊数学聚类分析表明,颖鲤及其反交在体高、体厚、头长等性状均偏向移核鱼,尤其偏向其雌性个体。

蚕蛹基础日粮中添加不同脂肪源对框鳞镜鲤生长、体成分及健康状况的影响

将324尾健康框鳞镜鲤Cyprinus carpio var.specularis(10.70±0.70)g随机平均分配在室内循环水养殖系统的12个养殖缸里。在蚕蛹基础饲料中分别添加2%的大豆油(SO)、菜籽油(RO)、鱼油(FO)及混合油(MIX,大豆油∶菜籽油∶鱼油=1∶1∶1),配制4组等氮(36.5%)等脂(7.0%)饲料,饲养58d后,探讨框鳞镜鲤对不同脂肪源的利用效果。结果表明:(1)大豆油组终末体重显著大于混和油组,肠长比显著大于其他各组,肥满度和肠指数显著大于鱼油组(P<0.05);肝胰脏指数混合油组显著低于鱼油组和大豆油组,菜籽油组显著低于大豆油组(P<0.05);(2)全鱼水分大豆油组显著高于菜籽油组和混合油组,粗脂肪含量显著低于其他各组(P<0.05);肌肉水分大豆油组显著大于鱼油组和混合油组(P<0.05);不同脂肪源对框鲤全鱼和肌肉的粗蛋白和灰分、肌肉粗脂肪、肝胰脏的一般体成分无显著影响(P>0.05);(3)肝胰脏和肌肉脂肪酸组成基本反映了饲料的脂肪酸组成;肝胰脏PUFA水平大豆油和菜籽油组相近,均显著高于鱼油组(P<0.05);肌肉PUFA水平大豆油组显著高于鱼油组(P<0.05),肌肉HUFA水平菜籽油组显著高于鱼油组和混合油组(P<0.05);(4)除菜籽油组血清GLU水平显著高于大豆油组外(P<0.05),4种脂肪源对框鲤其他血清生化指标水平没有显著影响(P>0.05);(5)组间血清T-SOD活性没有显著差异(P>0.05),大豆油组GSH-XP活性显著大于其他各组(P<0.05),MDA水平显著低于鱼油组及混合油组(P<0.05),鱼油组血清AKP活性显著低于其他各组(P<0.05);鱼油组肝胰脏T-SOD活性显著高于其他各组(P<0.05),AKP活性显著高于菜籽油组和混合油(P<0.05),GSH-XP活性显著高于混合油组(P<0.05),MDA水平各组无显著差异(P>0.05)。综上所述,框鳞镜鲤对大豆油的利用效果最好,其次是菜籽油、鱼油和混合油利用效果较差。

饲料中糊精水平对乌克兰鳞鲤生长及糖代谢的影响

为了探讨饲料中糊精水平对乌克兰鳞鲤生长和糖代谢的影响,试验配制蛋白质水平为30%,糊精水平分别为15%和25%的2种试验饲料,以平均体重为3.92 g的乌克兰鳞鲤幼鱼为试验对象,将300尾鱼随机分为2组,每组设3个重复,每个重复50尾鱼。饲养8周后,检测乌克兰鳞鲤生长指标、生化指标和糖代谢酶活性;禁食48 h后再投喂,测定投喂后0、3、6、12、24、48 h肝胰脏和肠道葡萄糖激酶(GK)和葡萄-6-磷酸酶(G6 Pase)mRNA的表达量。结果表明:1)25%糊精组的特定生长率显著高于15%糊精组(P<0.05)。2)25%糊精组的血清甘油三酯、胆固醇和葡萄糖含量显著高于15%糊精组(P<0.05)。3)25%糊精组血清己糖激酶(HK)、GK、丙酮酸激酶(PK)、苹果酸脱氢酶(MDH)活性,肝胰脏HK、GK、G6 Pase活性显著高于15%糊精组(P<0.05),而肝胰脏MDH活性则显著低于15%糊精组(P<0.05)。4)再投喂24 h后25%糊精组肝胰脏GK mRNA的表达量显著高于15%糊精组(P<0.05)。再投喂6 h后,25%糊精组G6Pase mRNA表达量显著高于15%糊精组(P<0.05)。综合分析,在本试验条件下,25%的饲料糊精水平对乌克兰鳞鲤生长和糖代谢的促进作用好于15%的饲料糊精水平。

兴淮鲫（白鲫♀×散鳞镜鲤）性腺晚发育的研究

兴淮鲫的性腺发生和发育状况比较特殊，大致有下列类型；（１）无性腺个体，占解剖总数的１９．６％；（２）两性嵌合型个体，其性腺以卵巢为主，精巢为辅，占解剖总数的２．４５％；（３）卵巢发育不正常个体，占解剖总数的１９％；（４）卵巢发育正常个体，占解剖总数的１２．８％；（５）精巢发育异常个体，占解剖总数的１５．３％；（６）精巢发育正常个体，占解剖总数的３０．６％。总之，兴淮鲫的大多数个体性腺发育不正常，只有部分雌性和雄性个体的性腺发育是正常或比较正常的。但精巢内的精子是否具有受精能力尚待进一步研究。

不同水平白藜芦醇对乌克兰鳞鲤部分生化指标的影响

研究旨在探讨白藜芦醇对乌克兰鳞鲤消化酶及非特异性免疫指标的影响。采用单因子浓度梯度法,在饲料中分别添加0、40、80、120、160、200 mg/kg水平的白藜芦醇（RES）,投喂7 d后测定乌克兰鳞鲤肝胰脏和血浆中的部分生化指标。结果表明：饲料中添加160 mg/kg白藜芦醇能提高乌克兰鳞鲤抗氧化能力,其中肝胰脏超氧化物歧化酶（SOD）活性显著提高,丙二醛（MDA）含量明显降低,血浆中过氧化氢酶（CAT）活性也明显提高。与对照组相比,饲料中添加40-160 mg/kg白藜芦醇,能提高乌克兰鳞鲤肝胰脏、前肠和中肠的消化能力。综合分析,饲料中添加80-160 mg/kg白藜芦醇能有效提高乌克兰鳞鲤幼鱼的非特性免疫力和消化功能。

乌克兰鳞鲤精子超低温冷冻保存方法研究

为研究适用于乌克兰鳞鲤精子的超低温冷冻保存方法,分析比较3种稀释液[Hank′s、Cortland、Freezefish冻精稀释液,精子与每种稀释液均设置3种比例(1∶1、1∶3、1∶5)]及3种体积分数为10%的抗冻剂(二甲基亚砜、1,2-丙二醇和丙三醇)对乌克兰鳞鲤精子低温(4 ℃)保存活力的影响;运用筛选出的冷冻保护液及稀释比例,分析比较3种“3步冷冻法”以及3种解冻温度(20、30、40 ℃)对乌克兰鳞鲤精子活力的影响。试验结果表明,采用Hank′s作为稀释液,10%二甲基亚砜为抗冻剂,精子与稀释液比例为1∶3,平均降温速率为12 ℃/min,解冻温度为30 ℃时,精子活力最高(>68%)。通过对稀释液、抗冻剂、稀释比例、降温速率和解冻温度的层层筛选,建立了适宜乌克兰鳞鲤精子超低温冷冻保存的方法,在其种质保护方面具有重要意义,为开展其他鱼类精子超低温冷冻保存提供参考。

兴国红鲤和散鳞镜鲤杂种优势的RAPD分析

运用随机扩增多态DNA方法对兴国红鲤、苏联镜鲤、德国镜鲤及它们的杂交后代进行遗传分析。结果表明：兴国红鲤与苏联镜鲤的杂交子一代接受双亲的遗传物质是相等的，而兴国红鲤与德国镜鲤的杂交子一代接受父本的遗传物质稍多一些。计算了两组杂交子一代的多态性位点比例和平均杂合度，兴国红鲤和苏联镜鲤杂种一代的多态性位点比例为0．3684，平均杂合度0．1487；兴国红鲤与德国镜鲤杂种一代的多态性位点比例为0．3737，平均杂合度为0．1499。说明两组杂交子一代的多态性位点比例和平均杂合度基本上没有差异。兴国红鲤和苏联镜鲤杂交子一代的杂种优势可以用杂种优势理论中的显性假说来解释。

框鳞镜鲤鱼片注射腌制工艺的研究

以框鳞镜鲤鱼片为对象,研究了NaCl添加量、转谷氨酰胺酶(TGase)添加量、腌制温度和腌制时间对框鳞镜鲤鱼片品质的影响,以开发框鳞镜鲤鱼片的注射腌制工艺。结果表明,框鳞镜鲤鱼片注射腌制过程中,NaCl添加量、TGase用量、腌制温度和腌制时间对框鳞镜鲤鱼片的品质有明显影响。在低温腌制时,TGase添加量对鱼片质构参数的影响不明显,而NaCl添加量、腌制时间对鱼片的弹性、咀嚼性有明显影响,腌制温度和时间则对鱼片的黏聚性有明显影响。经正交实验,其适宜的注射腌制条件为:NaCl添加量0.75%、转谷氨酰胺酶添加量1.5%、腌制温度10℃和腌制时间4h。

基于框鳞镜鲤形体和营养特征的分类研究

根据不同季节框鳞镜鲤的形体参数、背部和腹部肌肉的营养成分,采用因子分析和系统聚类对框的鳞镜鲤进行特征分类研究。结果表明:框鳞镜鲤在春、夏季的主要形体特征是体形较大,内脏比例较高,鱼皮比例较低;而秋、冬季的特征主要是体形较小,鱼鳞、内脏比例较低而肌肉比例较高。腹部肌肉在春、夏季的主要特征是蛋白质、游离氨基酸、灰分含量较低,而水分含较高;秋季的主要特征是蛋白质和灰分含量较高,水分含量较低;冬季的主要特征是蛋白质、粗脂肪、总糖含量较高,水分较低。背部肌肉在春季的特征是蛋白质、粗脂肪、总糖和灰分含量较低,游离氨基酸和水分含量较高;在夏季的主要特征是粗脂肪和总糖含量较高,游离氨基酸、灰分、水分较低;而在秋、冬两季的特征主要是粗脂肪、总糖和水分含量较低,蛋白质、游离氨基酸及灰分含量较高。

散鳞镜鲤两个保种群体的遗传多样性

利用20个微卫星标记分析国内仅存的两个散鳞镜鲤(Cyprinus carpio)保种群体(SP、CJ)的遗传多样性。结果表明:共检测到147个等位基因,平均值为7.35,有效等位基因数(Ae)、期望杂合度(He)以及多态信息含量(PIC)的平均值分别为2.7828、0.6041和0.5386。SP群体的Ae、He以及PIC值分别为3.1126、0.6479和0.5948,大于CJ群体(2.4529、0.5602和0.4823)。在两个群体中,群体特有等位基因共53个,其中9个为低频等位基因。对20个引物在两个群体中等位基因的显著性分析表明:其中有16个引物可以作为区分两个群体的特异性分子标记。瓶颈效应分析结果显示:2个群体均经历了瓶颈效应。同胞率检测结果(SP97.5%;CJ96.7%)偏高说明群体内近交压力较大。哈迪-温伯格平衡检测表明:两个群体大部分位点偏离平衡并处于杂合子过剩状态。两个群体间的遗传距离(D)为0.5625,SP和CJ群体的个体均各聚为一支。群体间的遗传分化指数(Fst)为0.1138,Nm值为1.9462。该研究表明:散鳞镜鲤群体遗传多样性水平较高,其中SP群体的遗传多样性水平高于CJ群体,两群体处于中度遗传分化。

蓝色鳞鲤(Cyprinus carpio blue var)同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法对蓝色鳞鲤(Cyprinus carpio blue var)进行同工酶分析。结果表明:在蓝色鳞鲤的眼睛、肌肉、肝脏、心脏、肾脏5种组织中,14种酶(LDH、ADH、GDH、MDH、G-6-PDH、EST、POD、SDH、FDH、SOD、α-AMY、CAT、COX、ME)的同工酶谱均存在明显的组织特异性。14种酶共记录出33个基因位点,其中α-Amy-2、Cox-2、Est-1、Ldh-1、Mdh-1、Mdh-2和Sod-1为多态位点。蓝色鳞鲤群体的多态位点百分数为21.21%(P0.99),平均预期杂合度和平均实际杂合度分别为0.1079和0.2121,遗传偏离指数(d)值为正。平均有效等位基因数(Ne)为1.24。实验表明,目前蓝色鳞鲤群体的种质资源状况尚好,表现出明显的杂交优势。

乌克兰鳞鲤同工酶及mtDNA D-loop区段的RFLP分析

[目的]分析乌克兰鳞鲤的遗传结构,以期为乌克兰鳞鲤的遗传育种研究提供依据。[方法]利用水平式淀粉凝胶电泳法对乌克兰鳞鲤(46尾)进行了AAT、α-GPD、GPI、IDH、MDH和PGM共6种同工酶以及肌浆蛋白(PROT)的电泳分析。应用PCR技术扩增了其mtDNA的D-loop区段,利用12种限制性内切酶对其扩增片段进行了RFLP分析;并对2种单倍型的PCR扩增片段进行了序列分析。[结果]同工酶检测出的12个基因座位中,α-GPD*、GPI*和PGM*存在变异,多态基因座位比例及平均杂合度预期值分别为25%和0.092 0。RFLP检测结果表明PCR扩增到约1.6 kb的DNA片段,8种限制性内切酶(AluⅠ、DraⅠ、EcoRⅠ、HaeⅢ、HapⅡ、HinfⅠ、TaqⅠ和XspⅠ)有酶切位点,DraⅠ和TaqⅠ个体间存在变异。将不同酶切类型结果组合后,得到2种单倍型。[结论]根据同工酶检测结果,可以认为乌克兰鳞鲤含有中国鲤与欧洲鲤2种血统;与RFLP分析结果相比,序列分析表明2种单倍型在DraⅠ和TaqⅠ酶切位点以外也存在碱基差异。

乌克兰鳞鲤二、三倍体成鱼肌肉营养成分的对比分析

[目的]通过对乌克兰鳞鲤二、三倍体成鱼肌肉的水分、总灰分、粗脂肪、粗蛋白以及氨基酸和脂肪酸构成等进行对比,为科学评估其营养品质提供基础数据。[方法]分析用样品取自鲤鱼背部肌肉,各指标的测定采用国家标准方法。[结果]三倍体与二倍体肌肉中的水分、总灰分、粗脂肪含量无差异,而三倍体粗蛋白含量在0.05水平显著高于二倍体;乌克兰鳞鲤三倍体成鱼肌肉的脂肪酸种类、脂肪酸总量、必需脂肪酸含量明显高于二倍体;二、三倍体成鱼肌肉中的氨基酸种类相同,均为18种,但三倍体鲜味氨基酸、必需氨基酸以及氨基酸总量和氨基酸评分值均高于二倍体。[结论]乌克兰鳞鲤三倍体比二倍体更具有营养学优势。

饲料中不同水平蛋白质、糊精对乌克兰鳞鲤生长、体成分及抗氧化能力的影响

采用全因子试验设计,配制含有3个蛋白质水平（32%、30%、28%）和3个糊精水平（15%、20%、25%）共9组试验饲料,每组3个平行,养殖周期为8周,探讨了对乌克兰鳞鲤（Cyprinus carpio）生长、体成分及抗氧化能力的影响。结果表明,蛋白质和糊精对生长性能无交互作用（P〉0.05）。随着蛋白质水平升高,肝体比显著提高（P〈0.05）;随着糊精水平增加,相对增重率、特定增长率出现明显升高。蛋白质和糊精水平对体内脂肪及灰分含量存在明显的交互作用（P〈0.05）。20%糊精组肝胰脏超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性显著高于15%和25%糊精水平（P〈0.05）,并且丙二醛（MDA）含量显著低于25%糊精水平（P〈0.05）。综合分析得出,蛋白水平在30%~32%,糊精水平在20%~25%之间最适宜乌克兰鳞鲤的生长。

州河鲤、乌克兰鳞鲤成鱼肌肉营养成分的对比分析

通过对州河鲤和乌克兰鳞鲤成鱼肌肉的粗蛋白、水分、灰分、粗脂肪以及氨基酸和脂肪酸构成等进行对比分析,为科学评估其营养品质提供基础数据。结果表明:乌克兰鳞鲤成鱼肌肉中的蛋白质(19.20%)、水分(78.76%)和灰分(1.45%)均极显著地高于州河鲤(18.52%、76.83%、1.20%;P<0.01),而州河鲤的脂肪含量(3.76%)又极显著地高于乌克兰鳞鲤(1.79%;P<0.01);州河鲤成鱼肌肉脂肪酸的种类、脂肪酸总量和必需脂肪酸含量(11种、2.88%、0.60%)均高于乌克兰鳞鲤(10种、0.64%、0.10%),且州河鲤脂肪酸的营养价值略高于乌克兰鳞鲤;州河鲤和乌克兰鳞鲤都含有18种氨基酸,而乌克兰鳞鲤的必需氨基酸含量、风味氨基酸含量和氨基酸总量(8.3%、7.58%、20.29%)均高于州河鲤(7.53%、6.48%、17.82%),乌克兰鳞鲤蛋白质的氨基酸组成优于州河鲤。综合以上分析可以得出,乌克兰鳞鲤较州河鲤更具有营养学优势。