一种鲨肝再生因子类似物的克隆表达及纯化

获得可溶性表达的鲨肝再生因子类似物，初步研究性质与活性。构建含有鲨肝再生因子类似物片段的原核表达载体pET32a-S；转化BL21，IPTG诱导表达融合蛋白，表达产物经过分离纯化-FXa酶切-分离纯化，得到鲨肝再生因子类似物；利用MTT比色法研究该重组产物对肝癌细胞株SMMC-7721的增殖活性。结果 原核表达的融合蛋白在大肠杆菌中以可溶的形式存在，表达量为40％，分子质量为30ku，去除融合子后的鲨肝再生因子类似物分子质量为12ku，PI=4．7。活性研究显示在6．25-50μg／ml浓度范围内，类似物与天然产物均有相似的刺激SMMC-7721细胞株增殖的活性，但是在高浓度下却表现出了抑制活性。