阳离子交换色谱法同时测定啤酒和鲱鱼精脱氧核糖核酸中的碱基和核苷

建立了测定啤酒和鲱鱼精DNA中的碱基和核苷的阳离子交换色谱法。采用强阳离子交换柱,以水(A)和稀H2SO4(B,pH 2)为流动相,梯度洗脱:0～15 min,0～50%B。6种核苷和碱基(次黄嘌呤、鸟苷、胞苷、胞嘧啶、鸟嘌呤和腺嘌呤)在18 min内实现基线分离,UV检测波长为254 nm。实验表明,6种核苷和碱基的工作曲线的线性范围为0.1～100 mg/L;检出限为0.009～0.068 mg/L(S/N=3),峰面积和保留时间的相对标准偏差(RSD)分别为1.3%～2.2%和1.6%～3.1%。将本方法用于啤酒和鲱鱼精DNA中的碱基和核苷的分析,平均回收率为89.5%～102.9%。

鲱鱼精dsDNA和联苯胺相互作用的光谱分析

在p H值为7.38的磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffer saline,PBS）中,采用荧光光谱和紫外-可见吸收光谱,考察联苯胺（benzidine,BZ）与鲱鱼精双链脱氧核糖核酸（double-stranded deoxyribonucleic acid,ds DNA）的相互作用机制,运用离子强度验证结合体系（BZ-ds DNA）荧光光谱的影响和DNA熔点变化两种方法的结合模式.结果表明,BZ以嵌插方式与鲱鱼精ds DNA结合,结合作用力主要是氢键和范德华力,结合反应为自发过程.实验还发现,当ds DNA质量浓度为8.00×10-6~48.00×10-6g/L时,BZ荧光强度F0和结合体系BZ-ds DNA荧光强度F的比值（F0/F）与ds DNA质量浓度呈线性关系,ds DNA的检测限为2.00×10-6g/L,且其测定不受常见共存金属离子和抗坏血酸等的干扰.因此,基于BZ与ds DNA作用的荧光光谱建立的检测ds DNA的新方法,可用于检测实验室废水中的ds DNA,平均回收率在98.00%~103.00%.