松花粉鳕鱼皮胶原肽复合物对小鼠免疫及抗氧化功能的影响

为研究松花粉鳕鱼皮胶原肽复合物对小鼠免疫及抗氧化功能的改善作用,分别进行了健康小鼠增强免疫力实验和老龄小鼠抗氧化实验,通过测定小鼠免疫器官/体重比值、淋巴细胞增殖能力、血容素半数溶血值、巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力评价受试样品的免疫活性;通过测定小鼠超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)水平综合评价受试样品的抗氧化作用。结果显示,受试样品对健康小鼠的免疫器官/体重比值无明显影响,能显著提高小鼠的淋巴细胞增殖能力、血容素半数溶血值和巨噬细胞吞噬指数,具有较好的免疫活性;同时,受试样品能显著提高老龄小鼠的SOD、GSHPx酶活水平和GSH含量,并能显著降低MDA含量水平,表现出了较好的抗氧化活性。通过实验可知,松花粉鳕鱼皮胶原肽复合物具有增强免疫力和抗氧化作用。

响应面法优化鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合铁工艺

采用响应面法优化鳕鱼皮胶原蛋白肽与氯化亚铁进行螯合反应的条件,制备小分子肽螯合铁产品。以pH值、小分子肽与FeCl2的质量比和小分子肽液质量分数3因素的5水平进行二次正交旋转组合试验,建立螯合物得率的二次回归方程。结果表明:最佳螯合工艺条件为胶原蛋白肽与氯化亚铁的质量比4:1、小分子肽液质量分数3.5%、pH7.0。在此条件下,螯合物得率为37.31%,与模型的预测值37.46%接近。红外光谱检测结果显示,亚铁离子与小分子肽中的NH2+和COO-有螯合,是一种新型螯合物。

鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合镁工艺条件探究

以鳕鱼皮胶原蛋白肽作为原料,合成了鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合镁,运用正交实验优选鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合镁最佳实验条件。实验结果表明,鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合镁最佳的实验条件是:镁盐与肽质量比为2∶1、反应时间为115 min、pH为7.5以及反应温度为70℃;采用水相合成法制备鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合镁,以红外分光光谱对产物进行表征。

鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合铜工艺条件探究

以鳕鱼皮胶原蛋白肽作为原料,合成了鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合铜,运用正交实验优选鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合铜最佳实验条件。实验结果表明,鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合铜最佳的实验条件是:铜盐与肽摩尔比为2∶1、反应时间为115 min、pH为6.5以及反应温度为65℃。采用水相合成法制备鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合铜,以紫外分光光谱、红外分光光谱以及TG热稳定性分析对产物进行表征。

干鳕鱼皮胶原低聚肽粉对实验性哮喘模型小鼠的影响及机制

目的探讨干鳕鱼皮胶原低聚肽粉(CP)对实验性哮喘发生的影响及其机制是否为通过调节NOD样受体蛋白(NLRP)3炎症小体的表达而实现。方法雄性Balb/c小鼠50只随机分为正常组、模型组和CP低(300 mg/kg)、中(600 mg/kg)、高(900 mg/kg)剂量组。除正常组外其余各组全程以CP灌胃的方式建模,按照浓度进行给药,在第1、7、14天,以腹腔注射的方式给予2.5 mg/ml卵清蛋白和氢氧化铝佐剂(OVA-Alum)溶液,每只0.2 ml,在第17、18、19天以雾化吸入的方式给予1%OVA-生理盐水溶液持续激发30 min。正常组小鼠灌胃、腹腔注射及雾化激发均采用生理盐水。第21天乙醚麻醉处死小鼠,取肺组织保存于-80℃冰箱备用。分别采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、Western印迹法及免疫组织化学(IHC)法检测肺组织中白细胞介素(IL)-4、 IL-5、 NLRP3、凋亡相关颗粒样蛋白(ASC)、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1含量,并使用苏木精-伊红(HE)染色及Masson染色观察肺组织切片中炎症细胞聚集和胶原纤维沉积等肺组织病理学改变。结果模型组肺组织中IL-4、 IL-5、 NLRP3、 ASC、 Caspase-1 mRNA和蛋白质表达水平均明显高于正常组(P<0.05,P<0.01)。CP低、中、高剂量组肺组织中IL-4、 IL-5、 NLRP 3、 ASC、 Caspase-1 mRNA和蛋白质表达水平均低于模型组,其中高剂量组差异均显著(P<0.05,P<0.01)。肺组织切片染色结果显示模型组炎症细胞聚集于胶原纤维沉积与正常组相比均明显增多,而CP低、中、高剂量组组织学改变明显减少。结论 CP对实验性哮喘模型小鼠具有预防性保护作用,其机制与抑制IL-4、 IL-5的产生及NLRP 3炎症小体活化有关。

口服鳕鱼皮胶原低聚肽对改善面部肤质的效果观察

目的:观察鳕鱼皮胶原低聚肽对改善面部肤质的有效性。方法:检测鳕鱼皮胶原低聚肽组成,并选择35名健康受试者,随机分为受试组和对照组。受试组18例,口服鳕鱼皮胶原低聚肽,6g/d,共30天;对照组17例,不服用任何胶原类产品。对两组志愿者在受试前后进行问卷调查评分;用visia数字皮肤分析仪和soft5.5皮肤检测仪检测面部皮肤的斑点、皱纹、纹理、毛孔、棕色斑、紫外线色斑、红色区、紫质、水份、油脂、弹力等指标。结果:鳕鱼皮胶原低聚肽中低聚肽含量为93.77±0.74%,平均分子量为495.86道尔顿。问卷调查结果显示,口服鳕鱼皮胶原低聚肽具有改善睡眠及增强体力的作用,受试组健康评分较口服前有明显改善(P<0.05)。受试组面部皮肤的皱纹、毛孔、纹理、紫质、红色区、水份、油脂弹力改善明显,与受试前及对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),受试前后志愿者无明显不良反应。结论:口服鳕鱼皮胶原低聚肽可改善面部肤质。

不同来源胶原肽对光老化皮肤成纤维细胞的影响研究

比较研究了海蜇、牛骨和鳕鱼皮3种不同来源胶原肽对光老化皮肤成纤维细胞的修复作用。发现3种胶原肽均可显著提高光老化细胞的细胞增殖活性,经紫外照射后,人皮肤成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白及透明质酸合成量明显降低,表现为差异性极显著(P<0.01),同时细胞内抗氧化酶系T-SOD、CAT和GSH-Px的抗氧化酶活力也都降低。当加入3种胶原肽后,光老化细胞的Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白及透明质酸合成量与细胞内T-SOD、CAT和GSH-Px酶活力均有所增加,且改善光老化细胞内抗氧化酶活力与增加细胞胶原分泌效果较好的是海蜇胶原肽。

鳕鱼皮胶原蛋白肽对小鼠慢性四氯化碳肝损伤的保护作用研究

目的以鳕鱼皮胶原蛋白肽为原料,探讨其对慢性肝损伤模型小鼠的保护作用。方法 ICR雄性小鼠50只,随机分为5组,每组10只,分别为正常组(NG)、模型组(MG)、阳性药物组(PG)、CSCP低剂量组(LG)和CSCP高剂量组(HG)。除NG外,其余组小鼠腹腔注射CCl4花生油溶液,每周3次,连续8w。在第4w末,PG每日灌胃给予联苯双酯溶液(150 mg/kg bw),LG和HG每日以CSCP溶液灌胃,剂量分别为200、400 mg/kg bw,NG和MG每日以等量纯水灌胃。饲养8w后处死小鼠,收集血清和肝脏。测定血清中谷氨酰转肽酶(у-GT)、碱性磷酸酶(ALP)的活性,肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的水平;透射电镜观察小鼠肝组织病理学变化;免疫组化法测定肝脏中TNF-α的表达水平。结果 CCl4诱导小鼠肝脏发生病变,LG、HG显著降低肝损伤小鼠血清中у-GT和ALP活性,与MG比较,ALP值在HG降低了11.76%;肝脏中GSH-Px和CAT水平升高,与MG比较,CAT值在HG升高幅度为20.63%;肝脏病理损伤程度明显改善。结论鳕鱼皮胶原蛋白肽对小鼠慢性肝损伤有着保护作用。

狭鳕鱼皮胶原多肽对去势大鼠骨微结构影响的研究

目的通过观察狭鳕鱼皮胶原多肽对去势大鼠骨质疏松模型骨微结构的影响,探讨其防治骨质疏松的可行性。方法成年Wistar雌性大鼠60只,体质量(250±10)g,随机分为5组(n=12),分别为正常对照组(A组)、骨质疏松模型组(B组)、骨质疏松模型+狭鳕鱼皮胶原多肽预防组(C组)、骨质疏松模型+狭鳕鱼皮胶原多肽低剂量治疗组(D组)、骨质疏松模型+狭鳕鱼皮胶原多肽高剂量治疗组(E组),每组12只。B、C、D、E组采用摘除双侧卵巢法制备大鼠骨质疏松模型。C组从术前4周开始、D、E组从术后6周开始,每天按照1.0、0.5、1.0 g/kg行狭鳕鱼皮胶原多肽灌胃,连续6周;A、B组于术后同时间点给予等体积生理盐水灌胃。末次给药24 h后,A、B组大鼠摄股骨X线片并测定灰度值;然后颈椎脱臼法处死各组大鼠,取左侧胫骨近端骨组织行HE染色,观察骨组织病理学改变,测量骨小梁数量(trabecular number,TN)、平均骨小梁厚度(mean trabecular plate thickness,MTPT)、平均骨小梁间距(mean trabecular plate spacing,MTPS)、骨小梁体积百分比(trabecular bone volume,TBV)、平均骨皮质厚度(mean bone cortical thickness,MBCT);免疫组织化学染色观测降钙素受体(caltitonin receptor,CTR)及IL-1表达水平。结果 B组大鼠股骨灰度值显著低于A组(t=45.130,P=0.000),表明去势大鼠骨质疏松模型制备成功。组织学观察示,A、C、E组TN、MTPS、TBV、MBCT与B组比较,差异有统计学意义(P<0.05);C组各骨组织形态计量学参数与D、E组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);D组TN、MTPS、TBV、MBCT与A组比较差异有统计学意义(P<0.05);E组仅MTPS与A组比较差异有统计学意义(P<0.05);E组MTPS、TBV、MBCT与D组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学染色观察示,A、C、D、E组CTR、IL-1表达水平较B组降低,C、E组低于D组,差异有统计学意义(P<0.05);其余组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论狭鳕鱼皮胶原多肽能够改善骨质疏松大鼠的骨微结构,其机制可能与抑制骨组织中CTR、IL-1表达有关,但尚未发现其对骨质疏松症有预防作用。

干鳕鱼皮胶原低聚肽粉诱导人肝癌细胞株SK-Hep-1细胞凋亡作用机制的研究

目的探讨干鳕鱼皮胶原低聚肽粉对人肝癌细胞株SK-Hep-1活性和凋亡的影响及作用机制。方法体外培养人人肝癌细胞株SK-Hep-1,用WST-1检测细胞增殖;荧光显微镜观察DAPI染色后细胞形态;Annexin V-FITC/PI双染后利用流式细胞技术检测细胞凋亡;利用活性氧试剂盒和超氧化物酶试剂盒检测细胞内ROS、SOD活性;采用蛋白质免疫印迹技术检测细胞色素C、Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-8的表达。结果干鳕鱼皮胶原低聚肽粉能够显著抑制人肝癌细胞株SK-Hep-1增殖并诱导细胞凋亡,诱导细胞ROS表达,细胞内SOD水平降低,细胞色素C释放增多,促凋亡蛋白Bax上调,抗凋亡蛋白Bcl-2下调,Bax/Bcl-2比率增加,激活Caspase-3、Caspase-8蛋白的表达。结论干鳕鱼皮胶原低聚肽粉可抑制人肝癌细胞株SK-Hep-1的增殖,且呈时间剂量依性,其机制可能是通过诱导细胞ROS表达增多,引起线粒体膜电位变化,引起细胞色素C释放增多,调节相关蛋白活化,激活Caspase家族级联反应,从而起到抑制肿瘤细胞生长和促进肿瘤细胞凋亡的作用。