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微柱离心结合HPLC法测定鳖甲肽脂质体的包封率 被引量:6
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作者 赵天文 汤晗霄 +5 位作者 盛云杰 盛振华 郑杭生 方大宽 郑婷 张永生 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期1376-1379,共4页
目的:建立微柱离心结合高效液相(HPLC)测定鳖甲肽脂质体包封率的方法,筛选最佳的微柱离心条件,使脂质体与游离药物充分分离。方法:采用薄膜分散法制备鳖甲肽脂质体。采用葡聚糖凝胶Sephadex G-50微柱离心分离鳖甲肽脂质体和游离药物,HPL... 目的:建立微柱离心结合高效液相(HPLC)测定鳖甲肽脂质体包封率的方法,筛选最佳的微柱离心条件,使脂质体与游离药物充分分离。方法:采用薄膜分散法制备鳖甲肽脂质体。采用葡聚糖凝胶Sephadex G-50微柱离心分离鳖甲肽脂质体和游离药物,HPLC法测定鳖甲肽浓度并计算包封率。结果:选择上样体积为0.6m L,然后1 000rcf离心3min,可以完全分离脂质体与外水相的药物;HPLC测得鳖甲肽脂质体平均包封率为32.23%(n=3)。结论:微柱离心可以达到将脂质体与游离药物很好的分离的目的,HPLC可以辅助测定脂质体中鳖甲肽的含量,这种方法可以用作鳖甲肽脂质体的分离并测定包封率的有效方法。 展开更多
关键词 微柱离心法 脂质体 包封率 鳖甲肽 高效液相色谱法 薄膜分散法
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鳖甲肽脂质体药代动力学及肝靶向分析 被引量:2
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作者 汤晗霄 赵天文 +3 位作者 黄宇 盛云杰 郑杭生 张永生 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期68-73,共6页
目的:制备含DiR碘化物荧光染料的长循环脂质体(DiR-SSL),采用SD大鼠和BALB/c裸鼠进行荧光成像的体内靶向性研究,利用空白SSL包封含5-羧基荧光素(5-FAM)的鳖甲肽(HGRFG-5-FAM,HF)制备HGRFG-5-FAM-SSL(HFL),研究HF及HFL分别给药于大鼠的... 目的:制备含DiR碘化物荧光染料的长循环脂质体(DiR-SSL),采用SD大鼠和BALB/c裸鼠进行荧光成像的体内靶向性研究,利用空白SSL包封含5-羧基荧光素(5-FAM)的鳖甲肽(HGRFG-5-FAM,HF)制备HGRFG-5-FAM-SSL(HFL),研究HF及HFL分别给药于大鼠的药代动力学。方法:采用薄膜分散法制备DiR-SSL及HFL,取2组SD大鼠分别尾静脉注射HF及HFL,其HF质量浓度及剂量一致,于不同时间点采血,利用多功能微孔板检测仪分析HF血药浓度,计算药代动力学参数;将DiR-SSL尾静脉注射于BALB/c裸鼠,分别于1,2,5,7,24 h活体成像,读取荧光强度值;取正常SD大鼠尾静脉注射DiR-SSL,24 h后解剖心、肝、脾、肺、肾于荧光成像系统成像并读取荧光强度值,将肝组织冷冻切片进行激光共聚焦扫描。结果:HF注射到SD大鼠体内,其半衰期(T_(1/2))仅0.826 h,而HFL在相同剂量下,T1/2和药时曲线下面积(AUC_(0-∞))分别为HF的16.253,11.899倍;在BALB/c裸鼠活体成像中,荧光主要集中于肝脏位置,随着时间增加荧光强度逐渐减弱;SD大鼠各脏器中的DiR-SSL荧光在肝脏中最强,注射24 h后DiR-SSL仍能在肝脏储留。结论:SSL递药系统能显著延长HF在SD大鼠体内的T_(1/2)。SSL递药系统具有肝靶向作用,提示该系统可作为药物载体进行肝靶向递药。 展开更多
关键词 肝靶向 长循环脂质体 DIR 鳖甲肽 药代动力学 5-羧基荧光素
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鳖甲多肽的全合成及对肝星状细胞的作用 被引量:11
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作者 胡春玲 唐尹萍 +1 位作者 施静妮 刘焱文 《医药导报》 CAS 2011年第10期1278-1280,共3页
目的研究鳖甲多肽的合成及对肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)的作用。方法根据鳖甲活性多肽的序列结构,采用Fmoc固相方法对多肽进行全合成,经反相高效液相色谱法分析、纯化获得合成多肽;不同浓度合成多肽作用肝星状细胞株HSC-T6 ... 目的研究鳖甲多肽的合成及对肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)的作用。方法根据鳖甲活性多肽的序列结构,采用Fmoc固相方法对多肽进行全合成,经反相高效液相色谱法分析、纯化获得合成多肽;不同浓度合成多肽作用肝星状细胞株HSC-T6 24 h,用Annexin V-FITC/PI法检测HSC凋亡。结果反相高效液相纯化后合成多肽的纯度>98.0%,经质谱鉴定其相对分子质量与理论值一致;合成多肽浓度为0.6 mg.mL-1时,早期凋亡细胞开始增多,至2.5 mg.mL-1时,坏死细胞开始增多,随合成多肽浓度增高,各组凋亡细胞随之增多。其中鳖甲合成多肽在1.2,2.5和5 mg.mL-1浓度下能显著提高HSC早期凋亡率(P<0.05)。结论鳖甲多肽可以定向合成,并且合成多肽能诱导HSC的早期凋亡。 展开更多
关键词 鳖甲 肝星状细胞 ANNEXIN V-FITC/PI
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鳖甲活性多肽3种干燥方式的比较研究 被引量:3
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作者 马丽 周苗 +1 位作者 叶晓川 刘焱文 《湖北中医药大学学报》 2015年第6期53-55,共3页
目的优选鳖甲活性多肽的最佳干燥方式。方法以鳖甲活性多肽溶液为原料,分别采用冷冻干燥、喷雾干燥和真空干燥3种方式进行干燥。采用高效液相色谱分析法(HPLC)及双缩脲法对所得产品的成分及总多肽含量进行检测,并与原药液进行比较。结... 目的优选鳖甲活性多肽的最佳干燥方式。方法以鳖甲活性多肽溶液为原料,分别采用冷冻干燥、喷雾干燥和真空干燥3种方式进行干燥。采用高效液相色谱分析法(HPLC)及双缩脲法对所得产品的成分及总多肽含量进行检测,并与原药液进行比较。结果冷冻干燥、喷雾干燥所得产品呈淡黄色,真空干燥产品颜色略深呈浅黄色;HPLC图谱显示,3种干燥方式制得产品均有12个色谱峰,且与原药液一致,对其中6个主峰的峰面积与浓度的比值进行分析,均无显著性差异;总多肽含量测定结果显示不同干燥方式对其无显著影响。结论综合分析确定鳖甲活性肽最佳干燥方式为冷冻干燥,喷雾干燥次之。 展开更多
关键词 鳖甲活性多 冷冻干燥 喷雾干燥 真空干燥 成分分析
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Purification,characterization,in vitro anti-hepatic fibrosis activity of bioactive peptides derived from Carapax Trionycis hydrolysates 被引量:3
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作者 胡春玲 彭小芝 +3 位作者 唐尹萍 刘焱文 胡祖良 高建蓉 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS CSCD 2017年第8期605-610,共6页
Anti-hepatic fibrosis peptide from Carapax Trionycis was purified, characterized, and inhibitory effect was assessed. Carapax Trionycis extract peptide hydrolysates (CTEPHs) were separated by ultrafiltration, Sephad... Anti-hepatic fibrosis peptide from Carapax Trionycis was purified, characterized, and inhibitory effect was assessed. Carapax Trionycis extract peptide hydrolysates (CTEPHs) were separated by ultrafiltration, Sephadex G-15 gel chromatography and RP-HPLC. One novel anti-hepatic fibrosis peptide (CTEPH-I: Asn-Pro-Asn-Pro-Thr) was obtained and identified. MTS assay and enzyme-linked immunosorbent assay were applied to evaluate the anti-fibrotic effect of CTEPH-1 on activated hepatic stellate cells (HSCs) in vitro. CTEPH-1 efficiently inhibited activation and proliferation of cultured HSC-T6 cells via lowering the contents of collagen and TIMP- 1 except for matrix metalloproteinase- 1 (MMP- 1). The purified peptide might be beneficial as functional food or potential drug for treatment of liver fibrogenesis. 展开更多
关键词 Carapax Trionycis extract peptide hydrolysates Extracellular matrix Hepatic stellate ceils
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Synthesis of an active peptide from Carapax Trionycis and its inhibitory effect on the proliferation of hepatic stellate cells 被引量:1
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作者 胡春玲 唐尹萍 刘焱文 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS 2012年第2期132-135,共4页
This study was aimed to synthesize an active peptide from Carapax Trionycis and to investigate its effect on the proliferation of hepatic stellate cells(HSCs).An active peptide from Carapax Trionycis,which was shown... This study was aimed to synthesize an active peptide from Carapax Trionycis and to investigate its effect on the proliferation of hepatic stellate cells(HSCs).An active peptide from Carapax Trionycis,which was shown to have significant anti-hepatic fibrosis activity,was synthesized by solid phase method and characterized by MALDI-TOF MS analysis.The HSCs in log growth phase was treated with the synthetic peptide at different concentrations.Viability and apoptosis of hepatic stellate cells were determined by MTS assay and Annexin V-FITC/PI staining,respectively.The active peptide showed strong inhibition of proliferation and induction of apoptosis of HSC-T6 in a concentration-dependent manner.The results suggest that the active peptide from Carapax Trionycis could be synthesized efficiently and has significant inhibitory effect on the proliferation of HSC-T6. 展开更多
关键词 Hepatic stellate cells Synthetic peptide Carapax Trionycis MTS APOPTOSIS
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