食管鳞状细胞癌中Rb和p16蛋白表达的免疫组织化学研究

目的探讨与细胞周期调节有关的基因改变在食管鳞状细胞癌中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学链霉抗生物素蛋白过氧化物酶连接法（ＳＰ法），检测７３例食管癌中Ｒｂ蛋白和ｐ１６蛋白的表达。结果食管鳞状细胞癌Ｒｂ和ｐ１６蛋白表达阳性率分别为４２５％（３１／７３）和６７１％（４９／７３），Ｒｂ蛋白表达阳性率与食管鳞状细胞癌分级呈显著负相关（Ｐ＜０００５），ｐ１６蛋白表达阳性率与食管鳞状细胞癌分级呈显著正相关（Ｐ＜０００５）。４９例ｐ１６蛋白表达阳性的食管癌中Ｒｂ蛋白表达阴性者３９例，３１例Ｒｂ蛋白表达阳性的食管癌中ｐ１６蛋白表达阴性者２１例，两者呈显著负相关（Ｐ＜０００５）；１０例食管鳞状细胞癌呈Ｒｂ蛋白和ｐ１６蛋白共同表达，３例Ｒｂ蛋白和ｐ１６蛋白表达呈共同阴性。结论Ｒｂ蛋白和ｐ１６蛋白表达的有无可分别作为食管鳞状细胞癌病理分级参考指标之一，并间接证明Ｒｂ蛋白对ｐ１６蛋白表达具有负性调节的功能。

5例食管基底细胞样鳞状细胞癌组织化学及免疫组化观察

目的:探讨食管基底细胞样鳞状细胞癌(BSCC)的组织化学、免疫组化特征及在病理诊断中的作用。方法:收集5例食管BSCC分别作HE、组织化学及免疫组化染色,同时收集5例典型鳞状细胞癌(SCC)作对照。结果:BSCC主要由密集的小细胞组成,排列成实体小叶状及假腺样(筛网状),并见粉刺样坏死及基底膜样物质沉积(PAS+),4例BSCC均见不同分化程度的鳞状细胞癌成分,1例见局灶性鳞状细胞分化。免疫组化基底细胞样成分Ker(AE1/AE3)、Ker14、PCNA、LM及p53均阳性,Ker194例基底细胞样成分及2例伴随鳞癌成分同时阳性;Syn仅1例BSCC阳性;5例SCCKer(AE1/AE3)均阳性,3例Ker14弱阳性,2例Ker19弱阳性。5例BSCC和BCC其S-100、CgA、NSE及SMA均阴性。结论:BSCC是鳞状细胞癌独特的组织学类型,进行组织化学及免疫组化染色有助于BSCC诊断及鉴别诊断。

口腔鳞状细胞癌P53基因的免疫组织化学研究

随着肿瘤分子生物学研究的不断深入和发展，癌基因和抗癌基因在肿瘤发生和发展中的作用日益受到重视。Ｐ５３抗癌基因的产物是分子量为５３０００的核磷酸化蛋白质。已证明发生于１３２～２１５位氨基酸残基之间的突变可导致Ｐ５３蛋白失活，并表现出显性的癌基因转化作用...

10例直肠基底细胞样鳞状细胞癌组织化学及免疫组化观察

目的探讨直肠基底细胞样鳞状细胞癌(BSCC)的组织化学、免疫组化特征及在病理诊断中的作用。方法收集10例直肠BSCC分别作HE、组织化学及免疫组化染色,同时收集10例典型鳞状细胞癌(SCC)作对照。结果BSCC主要由密集的小细胞组成,排列成实体小叶状及假腺样(筛网状),并见粉刺样坏死及基底膜样物质沉积(PAS+),8例BSCC均见不同分化程度的鳞状细胞癌成分,2例见局灶性鳞状细胞分化。免疫组化基底细胞样成分Ker(AE1/AE3)、Ker14、PCNA、LM及P53均阳性,Ker19,8例基底细胞样成分及4例伴随鳞癌成分同时阳性;Syn仅2例BSCC阳性,10例SCCKer(AE1、AE3)均阳性,6例Ker14弱阳性,4例Ker19弱阳性。10例BSCC和BCC其S100、CgA、NSE及SMA均阴性。结论BSCC是鳞状细胞癌独特的组织学类型,进行组织化学及免疫组化染色有助于BSCC诊断及鉴别诊断。

免疫组织化学方法检测P16 P13 P40在颈部淋巴结转移性鳞状细胞癌鉴别诊断中的应用

临床上以颈部淋巴结包块为首发症状的患者很多。颈部转移性癌约占头颈部恶性肿瘤的5%[1]，主要分为转移性鳞状细胞癌和转移性腺癌，有相当一部分人不能完全明确原发灶，尤其是远处转移的鳞状细胞癌[2-4]，至今仍是临床诊治的难题之一。本研究用免疫组织化学染色抗体联合检测方法鉴别肺和宫颈来源的颈部转移性鳞状细胞癌。

口腔鳞状细胞癌P53基因的免疫组织化学研究

随着肿瘤分子生物学研究的不断深入和发展，癌基因和抗癌基因在肿瘤发生和发展中的作用日益受到重视。Ｐ５３抗癌基因的产物是分子量为５３ＫＤ的核磷酸化蛋白质。已证明发生于１３２～２１５位氨基酸残基之间的突变可导致Ｐ５３蛋白失活，并表现出显性的癌基因转化作用［...

免疫组织化学检测P16、Ki67在宫颈鳞状上皮内病变中的应用

目的分析免疫组化P16、Ki67在宫颈鳞状上皮内病变中的应用及意义。方法收集经活检或手术切除宫颈组织标本,其中宫颈鳞状上皮内病变80例将其作为病例组,此外将30例非宫颈病变手术切除正常宫颈组织标本作为对照组。采用S-P免疫组化方法对所有标本进行P16、Ki67表达的检测,并分析其表达及意义。结果 P16阳性率依次由对照组、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ组呈上升趋势,对照组与病例组两两比较差异有统计学意义(P<0.05);对照组Ki67阳性率明显低于病例组CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ,差异有统计学意义(P<0.05),病例组内比较差异无统计学意义(P>0.05);P16、Ki67的关联性比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Ki67和P16的表达情况可有效甄别子宫颈良性反应病变情况,但二指标的关联性不强,提示其对病变的指示方向并非相同,因此,对于Ki67和P16的表达情况进行联合检测,可以更为公允的帮助相关人员鉴定子宫颈病变情况,值得在临床中进一步推广。

乳头状肾细胞癌的病理及免疫组织化学研究

目的观察乳头状肾细胞癌(PRCC)的病理特点及免疫组织学研究。方法分析PRCC标本共45例,按组织细胞特点嗜碱亚型14例,嗜酸亚型31例。免疫组化染色,检测2种亚型上皮膜抗原(EMA)、细胞角蛋白7(CK7)、CD10、波形蛋白(Vim)及2种亚型Fuhrman分级比较与患者预后分析。结果嗜碱型与嗜酸型在EMA、CK7、CD10、Vim表达方面具有统计学意义(P<0.01,P<0.005)。嗜碱型与嗜酸型在Fuhrman分级比较,嗜酸型显著高于嗜碱型,两组分级比较具有统计学意义(P<0.005)。本组45例患者,随访期间病死率为15.6%(7/45),其中嗜碱型2例,嗜酸型5例。其余患者随访期间未出现复发或转移。结论乳头状肾细胞癌临床多发恶性肿瘤,其嗜碱亚型和嗜酸亚型的免疫组织学特点和Fuhrman分级以及临床预后均不同。

食管鳞状细胞癌PD-L1不同抗体免疫组织化学检测的一致性分析

背景与目的:程序性死亡[蛋白]配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)是食管癌免疫治疗应用最广泛的疗效预测生物标志物,准确可靠的PD-L1检测对于筛查免疫治疗的潜在受益者至关重要。本研究旨在探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)患者PD-L1的表达情况以及7种不同克隆号PD-L1抗体免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测的一致性,为规范食管癌PD-L1 IHC检测及后续临床研究提供参考。方法:收集2020年1月—2021年12月复旦大学附属肿瘤医院的146例ESCC手术切除标本,用PD-L122C3、SP263、28-8、E1L3N XP、CST E1L3N、BP6099和MXR0067种克隆号抗体进行染色,并采用联合阳性评分(comprehensive positive score,CPS)、肿瘤细胞比例评分(tumor proportion score,TPS)和免疫细胞评分(immune cell proportion score,IPS)3种评分标准,在不同临界值下对抗体的一致性进行统计学分析。结果:PD-L122C3与两种伴随诊断抗体(SP263、28-8)对比结果显示:CPS临界值为10时,3种抗体之间均一致性较好(Kappa:0.66~0.80);CPS临界值为1时,28-8与22C3、SP263抗体一致性较好(Kappa=0.80、0.65),22C3与SP263一致性一般(Kappa=0.49);TPS临界值为10%和1%时,3种抗体之间均具有很高的一致性(Kappa:0.79~0.89,0.71~0.91)。PD-L122C3与4种国产抗体(E1L3N XP、CST E1L3N、BP6099、MXR006)对比结果显示:CPS临界值为10和TPS临界值为10%时,5种抗体之间均一致性较好(Kappa:0.67~0.88,0.65~0.79);CPS临界值为1时,5种抗体之间一致性较好或一般(Kappa:0.58~0.88);TPS临界值为1%时,5种抗体之间均一致性很好(Kappa:0.85~0.92);IPS临界值为1%和10%时,5种抗体之间一致性一般或较差(Kappa:0.46~0.66,0.30~0.62)。结论:PD-L122C3与两种伴随诊断抗体(SP263、28-8)在CPS和TPS中一致性较好;PD-L122C3与4种国产抗体(E1L3N XP、CST E1L3N、BP6099、MXR006)在CPS和TPS中一致性较好,而采用IPS时不同克隆号抗体的一致性较差。这些抗体之间具有一定的可互换性,可为食管鳞状细胞癌PD-L1临床检测提供更多选择。

食管小细胞癌的临床病理及免疫组织化学研究

目的:研究食管小细胞癌(small cell carcinoma,SmC)的临床病理和免疫组织化学特征以及可能的组织起源. 方法:采用光镜观察和组织化学及免疫组织化学技术,对6(男4,女2)例食管SmC的病理存档资料进行回顾性研究. 结果:溃疡型5例,蕈伞型1例.单纯性SmC2例,伴鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SqC)复合性SmC 4例,免疫组织化学细胞角蛋白(CK)、细胞膜抗原(EMA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)阳性率均为100%,突触素(Syn)和嗜铬素A(CgA)分别为83.3%和50.0%;P53阳性率100%;Ki-67阳性率83.3%. 结论:食管SmC是一种少见的高度恶性的食管肿瘤, 具有向上皮和神经内分泌分化的特性,可能起源于食管黏膜的多潜能干细胞.

甲状腺微小乳头状癌的形态学和免疫组织化学研究

目的:观察甲状腺微小乳头状癌的临床病理并检测其免疫表型,探讨相关疾病的鉴别诊断。方法:光学显微镜下观察223例甲状腺微小乳头状癌的组织形态;对74例甲状腺微小乳头状癌、32例甲状腺增生性病变行免疫组织化学方法标记细胞角蛋白19(CK19)、间皮细胞(MC)、细胞黏附凝集素3(Galectin-3)、CD56,复习相关文献。结果:在223例甲状腺微小乳头状癌中以滤泡状排列为主者占38.6%(86/223),核的特征不典型者占13.9%(31/223)。在74例甲状腺微小乳头状癌中CK19、MC、Galectin-3、CD56阳性表达率分别为100.0%、98.6%、98.6%、4.1%;在32例增生性病变中4者阳性表达率分别为37.5%、12.5%、18.8%、68.8%。结论:部分甲状腺微小乳头状癌细胞以滤泡状排列为主,核的特征不够典型,诊断较为困难。根据滤泡细胞增生活跃,细胞核具有乳头状癌的基本特点,病变与周围滤泡截然不同,且肿瘤性滤泡穿插于硬化间质或正常滤泡之间,可与增生性病变鉴别。CK19、Galectin-3、MC弥漫性中强阳性表达,CD56阴性表达对其诊断有重要价值,联合应用可以提高诊断的准确性和特异性。

CAV1和CAV2在头颈部鳞状细胞癌组织中的表达及其对生存、免疫的影响

目的:基于生物信息学方法筛选出头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)的关键生物标记物CAV1和CAV2,并探究其在HNSCC中的表达情况以及临床预后价值。方法:本研究中,我们首先基于GEPIA数据库比较了caveolins及cavins在HNSCC的差异表达情况,随后同时在Ualcan平台分析了caveolins及cavins家族中差异基因与临床表型的关系;比较与临床表型相关的差异基因与HNSCC生存的关系;此外还进行了CAV1与CAV2的富集分析及免疫浸润分析。结果:GEPIA数据库分析显示CAV1、CAV2、CAVIN2、CAVIN3等存在显著相关性,其中CAV1、CAV2与临床表型显著相关且能显著影响HNSCC患者生存预后。GSEA富集分析显示CAV1主要上调IL-17 signaling pathway、PI3K-Akt signaling pathway、NOD-like receptor signaling pathway;CAV2主要上调NOD-like receptor signaling pathway、PI3K-Akt signaling pathway。免疫浸润分析表明CAV1及CAV2能显著改变HNSCC肿瘤免疫微环境,与多种免疫细胞浸润存在相关性。结论:CAV1与CAV2在HNSCC中高表达,是与免疫侵袭相关的独立预后因素,可作为确定HNSCC患者的免疫侵袭相关预后的候选预后标志物。

Survivin和Bcl-2在放疗敏感性不同肺鳞癌组织中表达的免疫组织化学研究

目的探讨Survivin和Bcl-2在肺鳞癌组织中表达及在放疗敏感性中的意义。方法选择治疗前肺癌支气管纤维镜或肺穿刺组织标本,根据放疗效果分为放疗高敏感组和放疗低敏感组,应用免疫组织化学方法检测Survivin在肺癌组织中表达。结果Survivin和Bcl-2在肺鳞癌组织中总阳性表达率分别为45.3%、53.7%。Survivin在放疗高敏感组中的阳性表达率为21.7%(13/60),在放疗低敏感组中的阳性表达率为85.7%(30/35),组间差异有统计学意义。Bcl-2在放疗高敏感组中的阳性表达率为35.0%(21/60),在放疗低敏感组中的阳性表达率为85.7%(30/35),组间差异有统计学意义。Survivin和Bcl-2表达间相关性无统计学意义。结论Survivin和Bcl-2表达与肺鳞癌放疗敏感性有关。

乳腺囊内乳头状癌:原位还是浸润性肿瘤? 免疫组织化学分析和临床随访结果

乳腺囊内乳头状癌（IPC）被当做是一种导管内肿瘤,但是最近有证据认为此肿瘤可能是浸润性的,因为肿瘤周围缺少肌上皮。作者评估了来自39例患者（女性35例,男性4例）的40个囊内乳头状癌的肌上皮细胞、Ⅳ型胶原的基膜,并对其临床处理和随访进行了评估。

基于生物信息学构建口腔鳞状细胞癌免疫基因的预后模型

目的旨在构建免疫相关基因(IRGs)的风险预测模型,以预测口腔鳞状细胞癌(OSCC)患者的预后。方法应用生物信息学技术分析OSCC的转录组测序数据,鉴定出差异表达的IRGs(DEIRGs)。通过Cox回归分析构建DEIRGs的风险预测模型,并对其预测能力进行评估。分析该模型与临床病理和免疫细胞浸润的相关性。结果通过比较OSCC和正常样本共鉴定出3634个差异表达基因,其中包括330个DEIRGs(FDR<0.05,|logFC|>1)。单因素Cox回归分析筛选出与预后相关的20个DEIRGs(P<0.05),多因素Cox回归分析筛选出其中15个DEIRGs用于构建风险预测模型。该模型可作为OSCC患者的独立预后因素(P<0.001),预测患者预后的能力具有较高的准确性(AUC=0.732),并与临床分期(t=-3.484,P<0.001)、B细胞(Cor=-0.180,P=0.002)和CD4^(+)T细胞(Cor=-0.127,P=0.026)密切相关。结论基于15个预后相关DEIRGs构建的风险预测模型能够有效地预测OSCC患者的预后,可帮助临床医生为不同风险的OSCC患者选择个性化的治疗策略。

HPV E6/E7 mRNA联合P16/ki67免疫细胞化学双染色检测在不典型鳞状细胞(ASCUS)分流诊断中的作用

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV) E6/E7 mRNA联合P16/KI-67抗原(ki67)免疫细胞化学双染色检测对意义不明确的不典型鳞状细胞(ASCUS)分流诊断的价值。方法选取272例患者,回顾性分析剩余的细胞学标本中HPV E6/E7 mRNA及P16/ki67免疫细胞化学双染色检测结果。HPV E6/E7 mRNA检测采用HPV E6/E7 mRNA检测试剂盒利用Panther分子诊断仪进行检测、P16/ki67采用免疫细胞化学染色利用Ventana Benchmark Ultra免疫组织化学染色仪进行。分析两种检测法在同级别宫颈上皮病变中阳性率的差异,探讨两种检测法及二者联合检测在诊断高级别鳞状上皮内病变(HSIL)的效能的差异,综合评估不同检测方法分流诊断ASCUS中的作用。结果宫颈细胞学ASCUS对应的组织病理学结果包括慢性宫颈炎、低级别鳞状上皮内病变(LSIL)、HSIL到宫颈癌等。单纯分子诊断或免疫细胞化学染色检测阳性率随宫颈病变严重程度的加重而增加。在宫颈炎和LSIL病变组中,两种检测法阳性率之间的差异明显,在HSIL和宫颈癌病变组中,两种检测法阳性率之间无显著差异。联合检测法诊断HSIL以上病变的综合性能最佳,其灵敏度、特异度、约登指数、符合率、阳性预测值、阴性预测值分别为95. 65%、85. 40%、0. 81、87. 13%、57. 14%、98. 97%。结论 HPV E6/E7 mRNA和P16/ki67免疫细胞化学染色检测均在ASCUS分流诊断中有一定的意义,联合检测HPV E6/E7 mRNA和P16/ki67明显提高分流诊断的灵敏度,保持了较好的特异度。

协同刺激分子B7-H4在舌鳞状细胞癌组织中的表达及其与预后的关系

目的:观察协同刺激分子B7同系物4(B7 homolog 4,B7-H4)在人口腔舌鳞状细胞癌(oral tongue squamous cell carcinoma,OTSCC)中的表达,并探讨其与预后的关系。方法:选取2006年1月至2018年12月在苏州大学附属第三医院病理科存档的99例OTSCC患者的癌组织、30例OTSCC患者的癌旁组织石蜡包埋块,通过免疫组织化学染色检测B7-H4在OTSCC癌组织、OTSCC癌旁组织中的表达情况,采用卡方检验分析OTSCC癌组织中B7-H4的表达与患者临床病理特征的关系,运用生存分析法(Kaplan-Meier法)分析B7-H4表达与患者总生存期(overall survival,OS)的关系,拟合Cox模型评价各临床病理特征与患者预后的关系。结果:免疫组织化学检测结果显示,OTSCC组织中B7-H4无表达或低表达共40例,占总样本的40.4%,高表达59例,占总样本的59.6%;99例OTSCC患者临床病理资料分析结果显示,B7-H4的表达与临床分期、N分期相关(P<0.001);Kaplan-Meier生存分析显示,B7-H4表达较高患者的OS低于B7-H4表达较低的患者,差异具有统计学意义(HR=1.013,95%CI=1.004~1.022,P<0.05);单因素Cox回归生存分析模型示,T分期、组织分化程度、肿瘤大小、B7-H4表达与OTSCC患者预后相关(P<0.05);在多因素Cox回归生存分析模型中,B7-H4高表达(HR=1.015,95%CI=1.005 3~1.024,P<0.01)和组织分化程度(HR=1.665,95%CI=1.004 7~2.760,P<0.05)可作为OTSCC患者预后评判的独立危险因素。结论:B7-H4的表达与OTSCC患者预后显著相关,其有助于OTSCC患者预后评估。

口腔鳞状细胞癌与干燥综合征的交叉免疫基因预测分析

目的通过生物信息学法筛选口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)与干燥综合征(Sjogren's syndrome,SS)在转录水平的交叉免疫基因(cross immune genes,CIGs)并分析免疫浸润状态,为OSCC在SS患者中的诊断和治疗提供科学依据。方法从GEO数据库下载OSCC和SS数据集,使用limma R软件包结合Venn图筛选OSCC和SS中的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),再与免疫基因数据集进行交叉筛选获得CIGs。采用最小绝对收缩和选择算子(least absolute shrinkage and selection operator,LASSO)回归算法筛选核心CIGs。利用CIBERSORT R软件包分析浸润的免疫细胞类型及比例。结果从OSCC数据集中筛选出2885个DEGs,从SS数据集中筛选出2472个DEGs,交叉分析得到55个CIGs;经LASSO回归分析后二次交叉筛选出RASGRP3为潜在的核心CIGs,在OSCC和SS中表达均上调。另外,在OSCC和SS中,记忆CD4+T细胞、巨噬细胞和活化自然杀伤(natural killer,NK)细胞浸润均与RASGRP3相关。结论癌基因RASGRP3可作为OSCC和SS的潜在治疗靶点,并对二者的诊断具有参考价值;RASGRP3与浸润的NK细胞、巨噬细胞、CD4+T细胞等密切相关,为探索针对SS患者OSCC的免疫治疗策略提供新思路。

口腔鳞状细胞癌组织中P16蛋白的免疫组化定量分析

目的 探讨P16蛋白在口腔鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的表达及与口腔鳞癌发生发展的关系。方法 采用免疫组化S -P法,对5 6例口腔鳞癌组织、30例癌旁组织及10例正常口腔黏膜中P16蛋白的表达进行检测,应用全自动图像分析仪对染色结果进行定量测定。结果 口腔鳞癌组织中P16蛋白的表达量低于癌旁组织及正常黏膜(P <0 .0 5 ) ,口腔鳞癌Ⅲ级低于Ⅰ、Ⅱ级(P <0 .0 5 )。颈淋巴结转移组低于无颈淋巴结转移组(P <0 .0 5 )。结论 P16蛋白在口腔鳞癌组织中的表达常为缺失,说明其作为抑癌基因在口腔鳞癌的发生中起作用。P16蛋白的表达程度越低,分化越差,肿瘤越易于浸润和转移。

程序性死亡受体/配体免疫治疗策略在人乳头瘤病毒阳性头颈部鳞状细胞癌中的研究进展

人乳头瘤病毒(HPV)感染已成为头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)的主要致病因素之一,与HPV阴性相比,HPV阳性HNSCC表现出以程序性死亡受体(PD)为代表的多种免疫细胞及其效应分子的表达增加。PD-1/PD-L1高表达的患者与HPV阳性HNSCC患者存活率的显著提高相关。而HPV阳性HNSCC患者在接受抗PD-1/程序性死亡配体(PD-L1)免疫治疗后的客观缓解率、无进展生存期、总生存期等指标较HPV阴性HNSCC患者有所提高,提示HPV阳性HNSCC患者在接受抗PD-1/PD-L1免疫治疗上可能取得更好疗效。另外,PD-1/PD-L1抑制剂联合HPV癌症疫苗、双通路抑制剂等免疫治疗方案在HPV相关癌症中已发挥出独特的优势。根据HPV状态为患者制定个体化免疫治疗是一种有前景的治疗策略。