皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌癌细胞表达CD54抗原的免疫电镜研究

为探讨皮肤鳞状细胞癌 (鳞癌 )和基底细胞癌 (基癌 )癌细胞上是否低水平表达 CD54抗原，应用低温聚合、包埋后染色的胶体金免疫电镜技术，对 3例鳞癌和 3例基癌 CD54免疫组化染色阴性的癌细胞进行了研究。在 3例鳞癌和 3例基癌中，各 2例癌细胞表面及突起处观察到 CD54胶体金颗粒的存在；其中 1例鳞癌张力微丝-桥粒复合体处还可见 CD54胶体金颗粒分布。研究发现，虽然鳞癌和基癌癌细胞 CD54免疫组化染色阴性，但应用胶体金免疫电镜可以观察到其癌细胞低水平表达 CD54抗原。该结果可解释皮肤鳞癌和基癌临床上可发生转移，但发生率较低的机理，值得进一步研究。

化学发光微粒子免疫法检测鳞状上皮细胞癌抗原的方法学评价

目的 对化学发光微粒子免疫法检测鳞状上皮细胞癌抗原（SCC Ag）进行方法学评价及性能验证。方法 对化学发光微粒子免疫法检测鳞状上皮细胞癌抗原的不精密度、回收率、线性分析、定量可报告低限值、特异性和灵敏度、反复冻融试验以及参考范围验证等方面进行评价。结果 化学发光微粒子免疫法检测鳞状上皮细胞癌抗原低、中、高值样本批内不精密度CV%分别为3.88%、2.80%和0.69%,批间不精密度CV%分别为3.98%、3.10%和3.17%;回收率为95.77%-102.25%,平均回收率为98.89%;线性分析R2为0.9997;定量可报告低限值为0.21ng/mL,CV%为15.06%;特异性为96%,灵敏度为94%;低、中、高值样本反复冻融试验CV%分别为7.99%、2.97%和1.36%;参考范围验证的检测结果均〈1.3ng/mL。结论 化学发光微粒子免疫法检测鳞状上皮细胞癌抗原方法符合实验室要求,检测性能良好,可广泛在实验室开展应用。

基于磁颗粒化学发光免疫分析方法检测鳞状细胞癌抗原

目的建立一种快速、灵敏的化学发光免疫分析方法检测人血清中鳞状细胞癌抗原(SCCA)水平。方法使用异鲁米诺(ABEI)和异硫氰酸荧光素(FITC)分别标记SCCA的单克隆抗体,与待测SCCA抗原通过夹心法免疫反应形成抗原抗体复合物,采用包被有FITC的磁颗粒作为固相分离载体,加入底物之后检测发光强度。结果本方法线性范围达到22ng/mL,灵敏度为0.025ng/mL,批内变异系数(CV)和批间CV分别小于6%和7%。与现有的SCCA检测方法进行比对,相关系数为0.990 1。结论基于磁颗粒化学发光免疫分析检测SCCA的方法性能稳定、可靠,可用于定量检测人血清中SCCA浓度。

鳞状细胞癌相关抗原在肺部恶性和良性疾病中的变化

目的探讨血清鳞状细胞癌相关抗原(SCC Ag)在肺部恶性和良性疾病中的变化。方法采用微粒子化学发光全自动免疫分析技术检测88例肺部恶性疾病患者(肺腺癌38例、肺鳞癌50例)、132例肺部良性疾病患者(支气管炎35例、肺炎65例、肺气肿32例)和128名健康对照者(正常对照组)血清SCC Ag水平,统计各组SCC Ag水平和阳性率并做比较。结果肺部良、恶性疾病各组血清SCC Ag水平有不同程度升高,与正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01、P<0.001);其中肺鳞癌组最高,其次为肺炎组。在良性疾病组中,肺炎组血清SCC Ag水平最高,与其余各组比较差异均有统计学意义(P<0.001)。肺腺癌组、支气管组和肺气肿组3组之间比较差异无统计学意义。肺鳞癌组随着TNM分期的增高,血清SCC Ag水平也随之增高,不同TNM分期之间差异均有统计学意义(P<0.01、P<0.001)。结论 SCC Ag在肺鳞癌中有较高的表达量,肺部良性疾病也可引起SCC Ag不同程度的升高,因此,在鳞癌及良性疾病的鉴别诊断中要引起重视。

喉鳞状细胞癌中C-Met基因和细胞核增殖抗原的表达及其临床意义

目的:探讨喉鳞状细胞癌中C-Met和增殖细胞核抗原PCNA(proliferating cell nuclearantigen)的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化SP法检测40例喉鳞癌中C-Met和PCNA的表达,并取30例声带息肉作对照。结果:C-Met在喉鳞癌中阳性表达率为57.5%,高于对照组6.7%(P<0.05)。C-Met在喉鳞癌中的表达与病理分级、临床分期及淋巴结转移有关(P均<0.05),与年龄、原发部位无显著相关(P>0.05)。PCNA在喉鳞癌中的表达率为77.5%,在声带息肉中为16.7%,两者间比较有显著差异(P<0.05)。PCNA的表达强度与喉癌的病理分级、临床分期及淋巴结转移呈显著相关,与年龄、原发部位无关。C-Met和PCNA的表达具有相关性(P<0.05)。结论:C-Met和PCNA的过表达在喉鳞癌的发生、发展及转移过程中发挥重要作用,二者对于判断喉癌的进展和预后具有重要的临床意义。

鳞癌患者血清中鳞状细胞癌抗原表达的临床意义

目的 :探讨鳞状细胞癌抗原 (squamouscellcarcinomaantigen ,SCC -Ag)在鳞癌患者血清中的表达水平与病理分级、临床分期及与放疗预后的关系。方法 :采用IMX微粒子酶免疫分析系统检测 14 1例鳞癌患者SCC -Ag表达水平。结果 :鳞癌患者血清SCC -Ag表达水平高于正常人 ;宫颈鳞癌及食管鳞癌SCC -Ag表达在放疗前后有明显差异 ;食管鳞癌SCC -Ag表达与临床分期及病理分级呈正相关。结论 :血清SCC -Ag可作为宫颈。

PTEN基因和增殖细胞核抗原在喉鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的:探讨喉鳞状细胞癌中PTEN和增殖细胞核抗原(proliferating ceu nuclear antigen,PCNA)的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化SP法检测40例喉鳞癌中PTEN和PCNA的表达,并取30例声带息肉作对照。结果:PTEN在喉鳞癌中阳性表达率为52.5%,低于对照组的93.3%(P<0.05)。PTEN在喉鳞癌中的表达与病理分级、临床分期及淋巴结转移有关(均P<0.05),与年龄、原发部位无显著相关(P>0.05)。PCNA在喉鳞癌中的表达率为77.5%,在声带息肉中为16.7%,两者间比较差异有显著性(P<0.05)。PCNA的表达强度与喉癌的病理分级、临床分期及淋巴结转移呈显著相关,与年龄、原发部位无关。PTEN和PCNA的表达具有相关性(P<0.05)。结论:PTEN表达的下调和PCNA的过表达在喉鳞癌的发生、发展及转移过程中发挥重要作用,二者对于判断喉癌的进展和预后具有重要的临床意义。

IL-13鳞状细胞癌抗原及IgE在儿童咳嗽变异性哮喘中的检测价值

目的 咳嗽变异性哮喘是一种与白细胞介素 13(IL 13)相关的以气道炎症为特征的疾病。研究表明 ,IL 13所诱导的基因中鳞状细胞癌抗原 (SccAg)表达最多 ,因此推测SccAg在咳嗽变异性哮喘中的发病中也起重要作用。本文旨在评价IL 13、SccAg及免疫球蛋白E(IgE)在咳嗽变异性哮喘患儿中的检测价值。 方法 用酶联免疫吸附试验 (ELISA)法检测 5 1例咳嗽变异性哮喘患儿、2 6例哮喘患儿、33例正常儿童血清IL 13、SccAg及IgE水平 ,并对结果进行统计学处理。 结果 ①咳嗽变异性哮喘患儿发作期血清IL 13(2 38.88± 4 0 .0 7ng/L)、SccAg (2 .81± 0 .38ng/ml)水平显著高于缓解期 (85 .15± 17.98ng/L,2 .2 9± 0 .31ng/ml)及正常对照组 (77.2 7±18.16ng/L,2 .2 9± 0 .34ng/ml) (均P <0 .0 1) ,但缓解期及正常对照组间差异无显著性 ;②咳嗽变异性哮喘发作期患儿血清IgE (6 2 2 .4 8± 2 95 .0 1KU/L)水平显著高于缓解期 (373.81± 15 7.92KU/L) ,两组均显著高于正常对照组 (10 2 .99± 38.81KU/L) (均P <0 .0 1) ;③咳嗽变异性哮喘患儿发作期血清IL 13、SccAg及IgE水平与哮喘患儿发作期 (2 6 3.12± 4 9.99ng/L ,3.0 1± 0 .37ng/ml,717.0 4± 314 .0 1KU/L)间差异无显著性。结论 联合检测血清IL 13。

增殖细胞核抗原在上颌窦鳞状细胞癌的表达

目的:探讨增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)在上颌窦鳞癌中的表达及其与上颌窦鳞癌发生发展的关系。方法:应用免疫组化SABC法检测了35例上颌窦鳞癌和15例鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的PCNA表达。结果:PCNA染色阳性细胞为细胞核染色。PCNA指数上颌窦鳞癌为86.94±9.83,鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤为46.14±2.66,二者差异有统计学意义(P<0.001)。随上颌窦鳞癌的分化程度的降低,PCNA指数增加,不同分化间PCNA指数差异有统计学意义(均为P<0.05)。结论:PCNA的表达与上颌窦鳞癌的发生及分化程度相关。

血清鳞状细胞癌抗原在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌患者中的表达及其临床意义

目的探讨血清鳞状细胞癌抗原(SCCAg)水平与鼻腔鼻窦鳞状细胞癌(NSCC)患者临床分期及治疗预后关系。方法采用微粒子酶免疫分析法(MEIA)检测河北省邢台市眼科医院29例NSCC患者治疗前后血清SCCAg水平。结果 29例NSCC患者血清SCCAg阳性率为86.2%(25/29),SCCAg阳性率与NSCC的TNM分期有关。治疗前后患者血清鳞状细胞癌抗原水平变化差异有统计学意义(P<0.05)。复发患者SCCAg明显升高。结论血清SCCAg可作为鼻腔鼻窦鳞癌的相关肿瘤标志物,对判断鼻腔鼻窦鳞癌治疗效果、预后有重要的临床意义。

喉鳞状细胞癌p16和增殖细胞核抗原表达

目的探讨p16基因及增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学技术SP法检测抑癌基因p16蛋白及PCNA在40例喉鳞状细胞癌中的表达,并与癌旁组织和正常喉组织对比,结合喉鳞状细胞癌的临床病理特征进行分析。结果在喉鳞状细胞癌中p16阳性率(50.0%)明显低于癌旁组织(76.0%)和正常组织(100.0%,P<0.05);Ⅰ、Ⅱ期喉癌中p16阳性率明显高于Ⅲ、Ⅳ期。喉鳞状细胞癌中PCNA阳性率为55.0%,明显高于癌旁组织(32.0%)和正常组织(10.0%,P<0.05);Ⅰ、Ⅱ期喉鳞状细胞癌中PCNA表达明显低于Ⅲ、Ⅳ期(P<0.05)。p16阳性与阴性患者生存期≥5年的比率分别为66.7%和33.3%,P<0.05;PCNA阳性与阴性患者生存期≥5年的比率分别为37.5%和62.5%,P<0.05。结论p16和PCNA分别是喉鳞状细胞癌进展及预后判断的独立指标;p16和PCNA联合检测对喉鳞状细胞癌的预后评估可能更有价值。

直接化学发光免疫分析法定量检测鳞状细胞癌抗原SCC-Ag试剂研究

目的:研制可定量检测人血清中鳞状细胞癌抗原SCC-Ag的直接化学发光免疫分析法试剂。方法:采用表面羧基修饰的磁性微球作为固相载体包被SCC-Ab1,以吖啶磺酰胺为信号标记物标记SCC Ab2;待测物SCC-Ag与试剂混合后,形成双抗体夹心复合物结合在磁珠上,清洗分离,复合物在激发液的作用下发光,相对发光强度(RLU)与样本中的SCC-Ag浓度呈正相关。结果:试剂性能分析显示,最低检出限不高于0.1 ng/mL;批内变异系数≤5%、批间变异系数≤10%;线性范围是1.2~200 ng/mL,线性相关系数R≥0.999;试剂热稳定性变化幅度≤10%、长期稳定性变化幅度≤15%;平均加样回收率98.7%;检测100例临床标本与罗氏SCC-Ag检测试剂盒对比,相关性系数为R2=0.9894。结论:该试剂具有灵敏度高、线性范围广、稳定性好、特异性高、准确度高等特点,为临床人血清鳞状细胞癌抗原SCC-Ag定量检测提供坚实的基础。

喉鳞状细胞癌中HPV与TAP、CD8、HLA表达的相关性及临床意义

目的检测抑制基因蛋白16(P16)与抗原加工相关转运体(TAP)1、TAP2、人类白细胞抗原(HLA)、CD8在喉鳞状细胞癌中的表达,探讨喉鳞状细胞癌中TAP1、TAP2、HLA、CD8的表达及其与人乳头瘤病毒(HPV)感染的相关性及临床意义。方法选取滨州医学院附属医院2013年1月至2018年12月行手术切除的84例喉鳞状细胞癌患者的组织蜡块进行临床研究,其中男性68例,女性16例,年龄45~78岁,中位年龄63岁,采用免疫组化EnVision法检测84例喉鳞状细胞癌组织中P16和TAP1、TAP2、HLA、CD8的表达情况,分析其与临床病理特征的关系。进一步采用χ^(2)检验或Fisher精确检验、Spearman秩相关检验分析HPV感染与上述蛋白表达的相关性,采用Kaplan-Meier进行生存分析,Cox比例风险回归模型进行多因素生存分析。结果P16在喉鳞状细胞癌中的阳性表达率为11.9%(10/84),在癌旁正常组织中为阴性表达;CD8在喉鳞状细胞癌组织中的阳性率为38.1%(32/84),低于癌旁正常组织[56.0%(47/84)],TAP1、TAP2、HLA在喉鳞状细胞癌组织中的阳性率均低于癌旁正常组织[41.7%(35/84)比69.0%(58/84)、29.8%(25/84)比56.0%(47/84)、42.8%(36/84)比57.1%(48/84)],其中,TAP2在癌和癌旁正常组织中的表达差异有统计学意义(χ^(2)=5.80,P<0.05)。喉鳞状细胞癌组织中CD8的表达与临床分期有关,差异有统计学意义(χ^(2)=6.57,P<0.05);而TAP1、TAP2、HLA、P16的表达与临床病理因素无关。Spearman关联性分析结果提示TAP1表达与TAP2、CD8呈正相关(r=0.295、0.232,均P<0.05),HLA的表达与CD8的表达呈正相关(r=0.232,P<0.05)。结论TAP1、TAP2、HLA、CD8在喉鳞状细胞癌组织中低表达,提示肿瘤可能通过下调TAP1、TAP2导致HLA表达异常,从而抑制CD8免疫应答过程,进而抑制机体免疫反应,为肿瘤免疫逃逸机制提供理论支持。

鳞状细胞癌抗原在非恶性妇科疾病中的表达及意义

目的探讨鳞状细胞癌抗原(SCCAg)在妇科常见非恶性疾病中的表达情况及临床意义。方法按纳入、排除标准共收集病例722例,采用化学发光免疫分析法检测血清SCCAg浓度。结果 SCCAg浓度高于正常参考值2.00 ng/ml的病例有155例,涉及宫颈、输卵管、盆腔、子宫、卵巢及阴道等部位的良性病变。结论 SCCAg浓度升高及升高幅度不能作为诊断宫颈癌的依据,需结合其它检查确诊。

人白细胞抗原G在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:检测人白细胞抗原G(HLA-G)在口腔鳞状细胞癌组织中的表达,探讨其在口腔鳞状细胞癌发生发展中的意义。方法:用免疫组织化学法检测口腔鳞状细胞癌及正常口腔黏膜组织HLA-G的表达情况,观察其与临床病理参数间的关系。结果:HLA-G分子在口腔鳞状细胞癌组织中的阳性表达率为55.77%(29/52),在正常口腔黏膜组织中无表达(0/20)。HLA-G分子表达与口腔鳞状细胞癌临床TNM分期有相关性(P<0.05),但与年龄、性别、肿瘤分化程度之间尚不能明确其相关关系(P>0.05)。结论:HLA-G分子在口腔鳞状细胞癌组织中表达明显高于正常口腔黏膜组织。HLA-G分子与口腔鳞状细胞癌细胞的免疫逃避有密切关系进而促进了口腔鳞状细胞癌的发生发展。

肺鳞状细胞癌中PTHLH基因表达与抗肿瘤免疫的相关性研究

目的:分析甲状旁腺激素样激素(PTHLH)基因与肺鳞状细胞癌(LSCC)患者预后及其与肿瘤微环境(TME)免疫细胞浸润的相关性。方法:通过UALCAN、TIMER、c Bio Portal数据库在泛癌水平分析PTHLH在泛癌中的表达情况,运用KaplanMeier Plotter数据库分析PTHLH在LSCC中的表达及其与患者的预后关联。选用2017年1月至2020年12月在甘肃省肿瘤医院手术切除的24例LSCC患者的癌及癌旁组织标本,用qPCR和WB法分别检测LSCC组织中PTHLH mRNA和蛋白的表达,用qPCR法检测各种趋化因子和MHC分子的表达水平。采用TIMER数据库联合CIBERSORT反卷积法分析PTHLH基因表达和LSCC的TME中免疫细胞浸润的关系。结果:LSCC组织中PTHLH mRNA和蛋白的表达水平均显著高于癌旁组织(均P<0.05),且PTHLH高表达LSCC患者的OS明显缩短(P<0.01)。PTHLH的表达与LSCC患者TME密切相关(P<0.01)。PTHLH的表达与B细胞、CD8~+T细胞、CD4~+T细胞、中性粒细胞和DC等免疫浸润呈显著负相关(r=-0.142、-0.123、-0.224、-0.166、-0.213,均P<0.01)。PTHLH高表达抑制趋化因子、MHC分子的表达,从而抑制炎症反应、免疫浸润、抗肿瘤免疫反应等。PTHLH的表达与免疫检查点分子CTLA-4、PDCD1、TIGIT呈负相关(r=-0.340、-0.441、-0.38,均P<0.01)。结论:PTHLH与肿瘤免疫抑制相关,有望成为预测LSCC患者预后和免疫治疗效果的潜在生物标志物。

HLA-A抗原在喉癌鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的检测人类白细胞抗原-A抗原(HLA-A)在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法和流式细胞术,观察20例正常喉组织和58例喉鳞状细胞癌组织中HLA-A抗原的表达,并结合患者的临床病理资料对其结果进行分析。结果①HLA-A抗原在后鳞状细胞癌和正常喉组织中的阳性表达率分别为72.4%(42/58),100%(20/20),二者之间差异有统计学意义。(<0.01)。②HLA-A抗原在各级喉鳞状细胞癌中均有表达,且表达的阳性率随喉癌分化程度的下降而下降,在不同病理分级之间的阳性率有显著性差异(<0.05),且与淋巴结转移及临床分期有关(<0.05)。③喉鳞状细胞癌组与正常喉组织组HLA-A抗原的平均荧光指数分别为(±)(4.53±0.85)和(8.24±1.30),两组比较具有显著性差异(<0.01)。结论 HLA-A抗原可能作为喉鳞状细胞癌发生,发展不同时期的一个标志物,并对判断喉鳞状细胞癌的预后有一定的价值,为临床诊断治疗提供一定的理论依据。

染色体组装因子1亚基A(CHAF1A)和增殖细胞核抗原在宫颈鳞状细胞癌组织高表达并与恶性程度正相关

目的探讨染色体组装因子1亚基A(CHAF1A)和增殖细胞核抗原(PCNA)在宫颈鳞状细胞癌(CSCC)组织中的表达和临床意义。方法荧光定量PCR检测CSCC组织和对应癌旁组织中CHAF1A和PCNA的mRNA的水平,免疫组织化学染色法检测正常宫颈上皮、宫颈上皮内瘤变(CIN)以及CSCC组织中CHAF1A和PCNA蛋白的表达,分析其与临床病理参数的关系,并探讨相关性。结果 CHAF1A和PCNA在CIN及CSCC组织中表达明显高于正常宫颈组织,CHAF1A和PCNA呈正相关。CHAF1A与CSCC的分化程度、肿瘤大小、浸润深度及有人乳头瘤病毒(HPV)感染有关,PCNA与CSCC的分化程度、国际妇产科联盟(FIGO)分期、淋巴结转移、浸润深度及有HPV感染有关。结论 CHAF1A和PCNA在CSCC中高表达并且与恶性程度相关,二者呈正相关。

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4的生物学功能及其在头颈部鳞状细胞癌治疗中的应用

细胞毒性T淋巴细胞(T细胞)相关抗原-4(CTLA-4)是一种白细胞分化抗原,是T细胞上的一种跨膜受体,与CD28竞争性结合B7分子配体。CTLA-4与B7分子结合后发生T细胞无反应性,参与免疫反应负调节,与头颈部鳞状细胞癌的免疫逃逸密切相关。本文就CTLA-4的基本结构、功能与抗CTLA-4免疫疗法在头颈鳞状细胞癌中的应用做一综述。