鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子基因在小鼠发育过程中的作用

目的探索鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子基因在小鼠发育过程中的功能。方法用特殊的基因诱捕载体（genetrapping vector）制作了鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子基因敲除小鼠。用Western印迹、RT-PCR、X-gal染色方法分析该基因在突变小鼠体内的表达。PCR法鉴定小鼠不同发育时期的基因型。结果鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子基因在纯合型突变小鼠体内被抑制后，纯合型突变小鼠在出生后死亡。结论鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子基因是致死基因，对小鼠生存有不可缺少的作用。

精胺对Nup98基因的调控研究

利用基因芯片比较鸟氨酸脱羧酶抑制子基因敲除小鼠和正常小鼠肝组织的表达差异;高效液相色谱法测定鸟氨酸脱羧酶抑制子基因敲除小鼠和正常小鼠肝组织中的精胺含量;构建Nup98的启动子-虫荧光素酶报告基因质粒;脂质体Lipofectamine 2000TM转染小鼠细胞(NIH3T3),在含有精胺或正常培养条件下,测定虫荧光素酶活性。结果显示,Nup98基因在鸟氨酸脱羧酶抑制子基因敲除小鼠肝组织表达增强;鸟氨酸脱羧酶抑制子基因敲除小鼠肝组织中,精胺含量增高;成功构建Nup98的启动子-虫荧光素酶报告基因质粒pGL3-Nup98-P;精胺能在体外培养的条件下,增强虫荧光素酶的活性。这些结果证明精胺能激活Nup98基因的启动子活性,增强其在NIH3T3细胞中的表达。