克罗恩病患者血浆中鸟甘与尿鸟苷水平的临床研究

目的评价克罗恩病(CD)患者血浆鸟苷前体激素(ProGN)和尿鸟苷前体激素(ProUGN)水平在临床中的价值。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对克罗恩病患者和健康对照者血浆ProGN和ProUGN水平进行检测,并分析其与临床疾病活动性及24 h大便次数的相关性。结果与健康对照者相比,CD患者血浆ProGN与ProUGN水平均明显降低(均P<0.05)。亚组分析显示,缓解期与活动期患者血浆ProGN水平均显著低于健康对照组(均P<0.001),活动期患者水平低于缓解期患者,但差异无统计学意义(P=0.121);缓解期患者血浆ProUGN水平显著低于健康对照组(P<0.001),活动期患者低于健康对照组,但差异无统计学意义(P=0.266);缓解期患者显著低于活动期患者,差异有统计学意义(P=0.011)。Pearson相关性分析显示,血浆ProGN及ProUGN水平与患者24 h大便次数均呈显著负相关(r=-0.804与r=-0.767,均P<0.001)。血浆ProGN水平与Best克罗恩病活动指数呈显著负相关(r=-0.561,P<0.001);而ProUGN水平与Best克罗恩病活动指数无线性相关(r=-0.155,P=0.314)。结论克罗恩病患者疾病临床活动性和腹泻可能是血浆ProGN水平的决定因素。

鸟苷酸环化酶C在大肠癌患者外周血中的表达及其临床意义

目的探讨鸟甘酸环化酶C(GCC)在大肠癌患者外周血中的表达及其临床意义。方法采用RT-PCR法对32例大肠癌患者、25例大肠良性病变患者、30例健康体检者外周血中GCC表达情况进行检测,并对大肠癌病理指标与GCC mRNA表达阳性率之间关系进行研究。结果 32例大肠癌患者中,GCC mRNA的阳性检出率为65.63%(21/32),良性组中GCC mRNA的阳性检出率为20.00%(5/25),而对照组中未见GCC mRNA表达;三组外周血中表达阳性率差异具有统计学意义(P<0.05)。大肠癌患者GCC mRNA表达水平与Duke分期、淋巴结转移和肝转移密切相关(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤大小等无关(P>0.05)。结论 GCC mRNA在大肠癌患者外周血中阳性表达率较高,特别是复发或转移病例,可作为大肠癌术后复发、转移的早期检测指标之一。

氧化苦参碱的血管舒张作用及其机制研究

目的观察氧化苦参碱(Oxymatrine)的血管舒张作用及其机制。方法采用大鼠离体血管功能实验装置,描记张力变化,每组血管来自6只同批大鼠,分别保留或去除内皮,各阻断剂预处理25min之后做Oxymatrine舒张曲线;Oxymatrine预处理10min之后做钙离子收缩曲线。结果Oxymatrine(0.9mmol/L～34.2mmol/L)剂量依赖性地舒张苯肾上腺素(PE)预收缩的内皮完整或去除内皮的大鼠胸主动脉环,内皮去除前后最大舒张效应Emax分别为(95.00±1.22)%和(95.90±1.17)%,而EC50由完整内皮的9.98mmol/L到12.79mmol/L(P<0.05);亚硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)0.1mmol/L、鸟苷酸环化酶抑制剂(ODQ)0.01mmol/L预处理可抑制Oxymatrine对内皮完好血管的舒张效应(P<0.05);Oxymatrine(4.37mmol/L、8.63mmol/L)不能抑制无钙高钾液中Ca2+收缩曲线。钾通道阻断剂四乙胺(TEA)3mmol/L、氯化钡(BaCl2)0.1mmol/L预处理可显著减弱Oxymatrine对内皮完好血管的舒张效应,药物处理前后最大舒张效应Emax分别为:对照组(96.00±1.02)%、TEA组(53.90±1.22)%、BaCl2组(39.90±2.01)%,EC50分别为:对照组12.79mmol/L、TEA组32.74mmol/L和BaCl2组36.22mmol/L(P<0.01)。结论Oxymatrine具有舒张血管作用,其机制与内皮NO-cGMP途径和血管平滑肌大电导钙激活钾通道和内向整流钾通道有关。

脑利钠肽对心力衰竭患者心血管保护作用的研究

心力衰竭(HF)是众多心血管疾病发展的终末阶段,神经体液紊乱及心室重构是HF患者重要的病理生理改变。研究发现,HF患者血浆脑利钠肽(BNP)水平明显升高。BNP主要由心室合成分泌,作为循环激素,BNP通过利钠肽受体-鸟甘酸环化酶(NPR-cGMP)系统,可排钠、利尿,扩张血管,增强迷走神经活性及拮抗交感神经活性,从而明显改善HF患者的血流动力学状态,且不伴有血浆肾素活性的激活。BNP还可作用于心脏,具有抗心肌肥大、抗纤维化作用,作为局部调节因子在心室重构中发挥重要作用。通过远距分泌及旁分泌或自分泌作用,BNP在HF的发展及预后中发挥重要保护作用。

西地那非通过上调电压依赖性钾通道抗低氧刺激的人肺动脉平滑肌细胞增殖

目的探讨西地那非抗低氧刺激的人肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增殖的机制与电压依赖性钾通道(voltage-dependent potassium channels,Kv)及环鸟甘酸依赖性蛋白激酶(cGMP-dependent protein kinase,PKG)的关系。方法采用MTT法及细胞免疫荧光法等检测细胞增殖情况;应用膜片钳技术记录低氧刺激PASMCs前后及西地那非或KT-5823干预前后的Kv通道电流,运用Kv1.5抗体透析细胞后的Kv通道电流;应用siRNA干扰技术沉默Kv1.5基因。结果低氧下西地那非组的细胞增殖水平较低氧对照组明显降低;西地那非反转了低氧对细胞K +通道电流,尤其Kv1.5通道电流的降低作用;siRNA组的Kv1.5蛋白表达明显减低,沉默Kv1.5通道基因逆转了西地那非抗低氧刺激的细胞增殖作用;PKG抑制剂KT-5823阻断了西地那非抗低氧刺激的细胞增殖作用,并且反转了西地那非对低氧下的Kv通道电流的上调作用。 结论 西地那非可通过上调Kv通道亚型主要是Kv1.5通道,抑制低氧刺激的人PASMCs增殖,且可能与PKG有关。

榄绿粗叶木茎甲醇提取物对人食管癌EC-9706细胞增殖的影响及其机制探讨

目的探讨榄绿粗叶木茎甲醇提取物(以下简称MESLL)对人食管癌EC-9706细胞增殖的影响及其机制。方法体外培养EC-9706细胞。1观察MESLL对细胞增殖的影响:取对数生长期EC-9706细胞,随机分为MESLL组、环磷酰胺组(CTX)组和空白组。MESLL组分别给予0.01、0.05、0.1、0.2、0.4 mg/m L MESLL干预,CTX组给予1 mg/m L CTX干预,空白组不干预。干预24、48、72 h,检测各组细胞增殖抑制率。2观察MESLL对细胞NO活性及NOS、c GMP含量的影响:取对数生长期细胞,随机分为实验组及对照组。实验组分别置入含0.01、0.05、0.1、0.2、0.4 mg/m L MESLL的培养液培养48 h,对照组常规培养48 h。检测两组细胞上清液NO活性及细胞NOS、c GMP含量。结果 1MESLL对细胞增殖的影响:干预24 h,仅MESLL组0.2、0.4 mg/m L细胞增殖抑制率高于CTX组(P均<0.05);干预48、72 h,MESLL组细胞增殖抑制率随MESLL浓度升高而增加,MESLL组0.1、0.2、0.4mg/m L细胞增殖抑制率均高于CTX组(P均<0.05)。2 MESLL对细胞NO活性及NOS、c GMP含量的影响:随MESLL浓度增加,EC-9706细胞NO活性及NOS、c GMP含量呈降低趋势(P<0.05)。结论 MESLL能抑制食管癌EC-9706细胞增殖,其机制可能与抑制NO/NOS-c GMP通路有关。

DNA传感器及其免疫信号传导通路的研究新进展

DNA于哺乳动物细胞质中的存在是一个危险信号,提示机体内微生物感染的存在。近五年来的研究显示,细胞质DNA的传导机制是免疫系统产生免疫应答的分子基础。迄今为止已报道多种DNA传感器,其中STING是一个关键的衔接蛋白,参与大部分DNA信号传导途径。最近,c GAS-c GAMP第二信使通路、IFI16及其他传感器的发现为解析胞质DNA识别的分子机制提供了新见解。这些重要的发现有助于了解宿主防御系统,提高疫苗免疫原性,为感染性疾病的预防与治疗提供新思路。

TLR9与先天性免疫反应

TLR9（Toll-likereceptor9）是一种微生物病原相关分子结构模式识别受体，TLR9能够识别CpG—ODN（胞嘧啶磷酸鸟甘-寡聚脱氧核苷酸），使病原相关受体在先天性免疫细胞上表达，并激活下游炎性通路。研究表明，TLR9在先天性免疫反应中产生了重要作用，如脓毒血症、自身免疫性疾病、刀豆体球蛋白A介导肝炎性肝脏损伤、炎性泡沫细胞形成、缺血再灌注损伤等，并且与多种致病因子相关联，如肝x受体、甲酰多肽受体、线粒体DNA等。