miR-1187靶向调控Arhgef9在七氟醚致海马神经元凋亡中的作用

目的探讨miR-1187靶向调控Rho鸟苷交换因子-9(Arhgef9)在七氟醚致小鼠海马神经元凋亡中的调控作用。方法通过基因芯片技术测定小鼠海马miRNA。利用miR Walk数据库对差异miRNA的靶基因进行预测。为验证预测结果与实际情况是否相符,同步进行mRNA水平的表达谱芯片实验,筛选出与差异miRNA确有互作关系的m RNA。为说明miRNA与m RNA的互作关系,进一步利用David数据库对靶基因进行注释,最终形成miRNA与m RNA共表达网络。采用RT-PCR法检测海马神经元miR-1187mRNA相对表达量,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测miR-1187转染后海马神经元存活率,荧光素酶实验检测Arhgef9是否为miR-1187的靶基因。结果海马神经元凋亡主要与9个miRNA相关,即miR-101b-3p、miR-1187、miR-188-5p、miR-219a-5p、miR-338-3p、miR-425-5p、miR-467a-3p、miR-705、miR-92a-3p。miR-1187在七氟醚诱导海马神经元损伤模型中的相对表达量明显降低(P<0.05),miR-1187高表达质粒(miR-1187 mimics)转染后,海马神经元存活率明显升高(P<0.05)。miR-1187与Arhgef9存在靶向关系,miR-1187通过与Arhgef9基因m RNA的3′非翻译区互补配对来发挥作用。结论 miR-1187是海马神经元抗细胞凋亡的抑制因子;高表达miR-1187通过靶向调节Arhgef9 m RNA表达来抑制海马神经元凋亡的发生。