小样本探讨黄嘌呤脱氢酶和鸟苷酸合成酶基因多态性对硫唑嘌呤所致骨髓抑制和脱发的影响

目的研究黄漂呤脱氢酶(xanthine dehydrogenase,XDH)和鸟苷酸合成酶(guanosine monophosphate synthetase,GMPS)基因多态性对硫唑嘌呤(azathioprine,AZA)所致骨髓抑制和脱发的影响,探讨上述位点联合NUDT15 rs116855232检测对预测AZA所致骨髓抑制的价值。方法回顾性分析曾经服用或正在服用AZA治疗自身免疫性疾病患者,收集静脉血采用直接测序法测定GMPS rs61750368、rs61750369,XDH rs2295475、rs1884725、rs17011368、rs566362和NUDT15rs116855232基因型。依据不良反应分为2组,分析上述基因型与AZA所致骨髓抑制和脱发的相关性,NUDT15 rs116855232作为对照位点。结果共纳入80例患者,2组在年龄、日剂量、疗程、BMI以及6-硫鸟嘌呤核苷酸浓度均无显著性差异。Logistic回归分析表明,AZA所致骨髓抑制与XDH rs2295475突变相关(P=0.003,OR=3.10,95%CI:1.45-6.25),该基因预测骨髓抑制敏感度为69.6%,特异度为63.2%,ROC曲线AUC为0.66;NUDT15 rs116855232突变也和AZA所致骨髓抑制相关(P=0.008,OR=3.46,95%CI:1.21~9.93);其余位点基因型暂未发现与骨髓抑制和脱发相关。rs116855232野生型且rs2295475突变型的患者对比两位点野生型的患者,其骨髓抑制的危险值升高(OR=6.53,P=0.004),而两位点同时突变者骨髓抑制的危险值更高(OR=51.67,P<0.001)。结论在中国自身免疫性疾病患者中XDHrs2295475突变可能为AZA诱导骨髓抑制的独立危险因素,尽管预测准确度较低但仍有预测价值。尤其XDH联合NUDT15 rs116855232监测,可能会弥补NUDT15野生型者对骨髓抑制预测不足的风险,提高NUDT15突变型对骨髓抑制预测的准确性,但以上结果还需更多临床研究验证。

基于cGAS-STING通路探讨参白扶正颗粒调节肿瘤免疫应答的作用机制

目的 基于鸟苷酸-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子(cGAS-STING)通路探讨参白扶正颗粒调节肿瘤免疫应答的作用机制。方法 取KM小鼠60只,建立人胃癌MGC803细胞移植瘤模型,将42只成模小鼠按照随机数字表法分为模型组10只、参白扶正低剂量组10只、参白扶正中剂量组11只、参白扶正高剂量组11只,分别给予生理盐水和5 mg/g、10 mg/g、20 mg/g参白扶正颗粒溶液灌胃,均2次/d,连续灌胃15 d。末次灌胃结束后,剥离瘤体组织,称重并计算肿瘤抑制率,采用HE染色法观察肿瘤组织病理形态,流式细胞术检测肿瘤组织中免疫活化指标[CD4^(+)、CD8^(+)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、CD45^(+)CD11c^(+)MHC-Ⅱ^(+)、CD40^(+)、CD70^(+)、CD4^(+)Foxp3^(+)Treg]水平,酶联免疫吸附法检测肿瘤组织中cGAS-STING通路相关细胞因子[β干扰素(IFN-β)、C-C类趋化因子22(CCL22)、C-C类趋化因子17(CCL17)、白细胞介素-10(IL-10)]水平,Western blot法检测肿瘤组织中cGAS-STING通路相关蛋白[STING、TANK结合激酶1(TBK1)、干扰素调节因子3(IRF3)]表达情况。结果 参白扶正各组瘤重均明显低于模型组(P均<0.05),且瘤重随参白扶正颗粒剂量增加而降低,肿瘤抑制率随参白扶正颗粒剂量增加而升高,两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。参白扶正各组小鼠胃黏膜炎症浸润、细胞间质充血水肿较模型组不同程度减轻,异型性不明显。参白扶正各组小鼠肿瘤组织中CD4^(+)、CD8^(+)、IFN-γ、CD45^(+)CD11c^(+)MHC-Ⅱ^(+)、CD40^(+)、CD70^(+)水平及cGAS、STING、TBK1、IRF3蛋白相对表达量均明显高于模型组(P均<0.05),且上述各指标随参白扶正颗粒剂量增加而升高(P均<0.05);参白扶正各组小鼠肿瘤组织中TNF-α、CD4^(+)Foxp3^(+)Treg、IFN-β、CCL22、CCL17、IL-10水平均明显低于模型组(P均<0.05),且上述因子水平随参白扶正颗粒剂量增加而降低(P均<0.05)。结论 参白扶正颗粒可抑制胃癌移植瘤小鼠肿瘤生长,可通过调节肿瘤免疫应答而增强小鼠免疫功能,减轻炎症反应,其机制可能与调控cGAS-STING通路有关。

电针干预经cGAS/STING通路对帕金森综合征大鼠神经功能的影响

目的 探讨电针干预对帕金森综合征(PD)大鼠神经功能的影响及其干预机制。方法 大鼠设置对照组、PD组(造模)、电针干预组(造模+电针)、pcDNA3.1组(造模+电针+尾静脉注射pcDNA3.1空载体)和cGAS-pcDNA3.1组(造模+电针+尾静脉注射cGAS-pcDNA3.1重组载体),造模采用羟多巴胺(6-OHDA)。旷场试验及转棒试验测试大鼠行为学功能,HE染色检测脑组织病理状态,试剂盒检测脑组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,Western印迹检测脑组织中环腺苷酸鸟苷酸合成酶(cGAS)、干扰素刺激基因(STING)蛋白表达。结果 与对照组相比,PD组水平运动得分、垂直运动得分及脑组织中GSH-Px、SOD水平明显降低,跌落潜伏期明显缩短,脑组织中MDA、IL-1β、TNF-α水平及cGAS、STING蛋白水平明显升高(均P<0.05),脑组织有明显病理改变;与PD组相比,电针干预组水平运动得分、垂直运动得分及脑组织中GSH-Px、SOD水平明显升高,跌落潜伏期明显延长,脑组织中MDA、IL-1β、TNF-α水平及cGAS、STING蛋白水平明显降低(P<0.05),脑组织病理改变减轻;与pcDNA3.1组相比,cGAS-pcDNA3.1组水平运动得分、垂直运动得分及脑组织中GSH-Px、SOD水平明显降低,跌落潜伏期明显缩短,脑组织中MDA、IL-1β、TNF-α水平及cGAS、STING蛋白水平明显升高(均P<0.05),脑组织病理改变加重。结论 电针干预经抑制cGAS/STING通路,降低脑组织炎症、氧化应激状态,改善PD大鼠神经行为学功能。

cGAS-STING通路的调控机制及其相关药物研究进展

鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)、干扰素基因刺激因子(STING)均为细胞内受体,参与细胞对双链DNA的识别。由cGAS激活的STING通路是近年来研究较为热门的信号通路,可介导细胞自噬、细胞死亡,发挥促炎、抗病毒、抗肿瘤等多种效应。随着研究深入,对cGAS-STING通路相关分子机制的了解逐渐增多,调控该通路有了较强的理论基础。鉴于cGAS-STING通路参与多种病理生理学功能,故针对cGAS-STING通路相关抑制剂、激动剂的研发具有潜在的临床应用价值。文章就cGAS-STING通路的各调控位点及其相关抑制剂、激动剂进行综述。