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基因重组鸡α-干扰素在肉鸡体内的药代动力学研究
被引量:
2
1
作者
张伟
于忠娜
+2 位作者
邹本革
朱凤华
朱连勤
《山东畜牧兽医》
2017年第12期18-19,共2页
选择40只32日龄健康AA肉鸡按1万IU/0.6ml基因重组鸡α-干扰素0.6ml肌肉注射给药后,不同时间点采血。用基因重组鸡α-干扰素检测试剂盒检测血清中浓度,研究其在血清中的药代动力学。通过3P97药动学软件分析主要药物动力学参数:分布半衰期...
选择40只32日龄健康AA肉鸡按1万IU/0.6ml基因重组鸡α-干扰素0.6ml肌肉注射给药后,不同时间点采血。用基因重组鸡α-干扰素检测试剂盒检测血清中浓度,研究其在血清中的药代动力学。通过3P97药动学软件分析主要药物动力学参数:分布半衰期(T_(1/2α))、消除半衰期(T_(1/2β))、药物清除率(CL)、药时曲线下面积(AUC)等。结果表明,肌肉注射1万单位基因重组鸡α-干扰素后肉鸡吸收迅速,达峰时间短,吸收较完全,能在体内较快的消除。
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关键词
基因
重组
鸡α
-
干扰素
肉
鸡
药代动力学
下载PDF
职称材料
鸡α干扰素基因的原核表达及其活性测定
被引量:
4
2
作者
戴华
郑佳玉
+2 位作者
陈俊华
潘志明
焦新安
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第10期804-807,共4页
应用RT-PCR技术,从被刺激诱导的鸡脾脏淋巴细胞中扩增鸡α-干扰素(ChIFN-α)基因cDNA,经克隆和测序后,构建原核表达重组质粒pGEX-proChIFN-α(全长序列)和pET-ChIFN-α(不含信号肽序列),并分别转化相应的表达菌。重组菌经IPTG诱导,SDS-P...
应用RT-PCR技术,从被刺激诱导的鸡脾脏淋巴细胞中扩增鸡α-干扰素(ChIFN-α)基因cDNA,经克隆和测序后,构建原核表达重组质粒pGEX-proChIFN-α(全长序列)和pET-ChIFN-α(不含信号肽序列),并分别转化相应的表达菌。重组菌经IPTG诱导,SDS-PAGE结果表明,ChIFN-α基因均获得表达,重组蛋白大小分别为45ku、26ku左右,表达的蛋白以包涵体形式存在。表达产物经变性、提纯、复性,重组蛋白的含量约为1mg/mL。复性后的ChIFN-α能够在鸡胚成纤维细胞上抑制H5N1禽流感病毒的复制;用水泡性口炎病毒检测结果表明,重组ChIFN-α具有较高的抗病毒作用,其生物学活性达到2×106u/mg。
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关键词
鸡α-干扰素基因
原核表达
抗病毒活性
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职称材料
ASP-ChIFN-α融合基因的构建及表达
3
作者
李丽
周学章
+1 位作者
李敏
王玉炯
《宁夏大学学报(自然科学版)》
CAS
北大核心
2008年第2期157-160,共4页
利用PCR技术从宁夏地方三黄肉鸡肝组织中扩增出α干扰素基因,构建成原核重组表达质粒pET-28a/ChIFN-α.从埃希氏菌属大肠杆菌(Escherichia coli)中扩增出L-天(门)冬酰胺酶Ⅱ(L-Asparaginase,ASP)信号肽基因,并与原核重组质粒pET-28a/ChI...
利用PCR技术从宁夏地方三黄肉鸡肝组织中扩增出α干扰素基因,构建成原核重组表达质粒pET-28a/ChIFN-α.从埃希氏菌属大肠杆菌(Escherichia coli)中扩增出L-天(门)冬酰胺酶Ⅱ(L-Asparaginase,ASP)信号肽基因,并与原核重组质粒pET-28a/ChIFN-α连接,构建成分泌型表达重组质粒pET-28a/ASP-ChIFN-α.将重组质粒经IPTG诱导5 h,用SDS-PAGE分析表达蛋白含量,并用鸡α-干扰素ELISA(Western-blot)试剂盒检测表达的重组蛋白的特异性.结果表明,包涵体型重组质粒pET-28a/ChIFN-α和分泌型重组质粒pET-28a/ASP-ChIFN-α在23 kD处均表达出目的蛋白,蛋白含量分别为27%和38%,pET-28a/ASP-ChIFN-α的蛋白表达含量比pET-28a/ChIFN-α的蛋白表达含量要高出11%,表达的重组蛋白具有特异性.实验实现了鸡α-干扰素成熟蛋白基因的高效表达,筛选出了可应用于临床的鸡α-干扰素高效表达菌株BL21(DE3)(pET-28a/ASP-ChIFN-α).
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关键词
鸡α-干扰素基因
L
-
天(门)冬酰胺酶Ⅱ信号肽
克隆
表达
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职称材料
低温胁迫对转ChIFN-α基因百脉根抗寒生理生化的影响
被引量:
4
4
作者
广巧
宋莉
赵德刚
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期2849-2853,共5页
为研究转Ch IFN-α基因百脉根的低温生长特性,对其进行4℃低温离体水培和可溶性蛋白(SP)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和脯氨酸(Pro)的测定分析,探讨低温胁迫对转Ch IFN-α基因百脉根的影响及机制。研究发现,25 d低温处理期间,百...
为研究转Ch IFN-α基因百脉根的低温生长特性,对其进行4℃低温离体水培和可溶性蛋白(SP)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和脯氨酸(Pro)的测定分析,探讨低温胁迫对转Ch IFN-α基因百脉根的影响及机制。研究发现,25 d低温处理期间,百脉根植株均生长迟缓,野生型(WT)还出现叶片枯黄和茎基部腐烂等冻害现象。转基因百脉根(TP)植株同期的MDA含量比WT低1.03倍(p<0.01),WT的MDA下降幅度仅为TP植株的86%。TP同期的SP、SOD、Pro含量均较WT高(p<0.01),且出现的降幅小。TP同期的SP、SOD和Pro含量分别是WT的1.21倍、1.27倍和1.72倍(p<0.01),WT同期的SP和SOD降幅分别是TP的2.26倍和1.93倍(p<0.01),TP植株的SOD含量峰值比WT提前5 d,TP的Pro在中后期增至WT植株的150%和129%。结果表明,转基因百脉根具有较好的低温耐受性和耐受生理基础,这对其在高寒山区的进一步应用及管理提供了基础依据。
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关键词
百脉根
鸡α-干扰素基因
转
基因
百脉根
低温胁迫
生理生化特性
原文传递
题名
基因重组鸡α-干扰素在肉鸡体内的药代动力学研究
被引量:
2
1
作者
张伟
于忠娜
邹本革
朱凤华
朱连勤
机构
青岛农业大学海都学院
青岛农业大学动物科技学院
青岛农业大学动物医学院
出处
《山东畜牧兽医》
2017年第12期18-19,共2页
文摘
选择40只32日龄健康AA肉鸡按1万IU/0.6ml基因重组鸡α-干扰素0.6ml肌肉注射给药后,不同时间点采血。用基因重组鸡α-干扰素检测试剂盒检测血清中浓度,研究其在血清中的药代动力学。通过3P97药动学软件分析主要药物动力学参数:分布半衰期(T_(1/2α))、消除半衰期(T_(1/2β))、药物清除率(CL)、药时曲线下面积(AUC)等。结果表明,肌肉注射1万单位基因重组鸡α-干扰素后肉鸡吸收迅速,达峰时间短,吸收较完全,能在体内较快的消除。
关键词
基因
重组
鸡α
-
干扰素
肉
鸡
药代动力学
分类号
S852.43 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
鸡α干扰素基因的原核表达及其活性测定
被引量:
4
2
作者
戴华
郑佳玉
陈俊华
潘志明
焦新安
机构
扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第10期804-807,共4页
基金
国家自然科学基金(304225031)
教育部高校科技创新工程重大项目培育资金项目(706032)
FANEDD(200358)
文摘
应用RT-PCR技术,从被刺激诱导的鸡脾脏淋巴细胞中扩增鸡α-干扰素(ChIFN-α)基因cDNA,经克隆和测序后,构建原核表达重组质粒pGEX-proChIFN-α(全长序列)和pET-ChIFN-α(不含信号肽序列),并分别转化相应的表达菌。重组菌经IPTG诱导,SDS-PAGE结果表明,ChIFN-α基因均获得表达,重组蛋白大小分别为45ku、26ku左右,表达的蛋白以包涵体形式存在。表达产物经变性、提纯、复性,重组蛋白的含量约为1mg/mL。复性后的ChIFN-α能够在鸡胚成纤维细胞上抑制H5N1禽流感病毒的复制;用水泡性口炎病毒检测结果表明,重组ChIFN-α具有较高的抗病毒作用,其生物学活性达到2×106u/mg。
关键词
鸡α-干扰素基因
原核表达
抗病毒活性
Keywords
chicken interferon
-
alpha gene
prokaryotic expression
antiviral activity
分类号
Q789 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
ASP-ChIFN-α融合基因的构建及表达
3
作者
李丽
周学章
李敏
王玉炯
机构
宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室
出处
《宁夏大学学报(自然科学版)》
CAS
北大核心
2008年第2期157-160,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30560110)
文摘
利用PCR技术从宁夏地方三黄肉鸡肝组织中扩增出α干扰素基因,构建成原核重组表达质粒pET-28a/ChIFN-α.从埃希氏菌属大肠杆菌(Escherichia coli)中扩增出L-天(门)冬酰胺酶Ⅱ(L-Asparaginase,ASP)信号肽基因,并与原核重组质粒pET-28a/ChIFN-α连接,构建成分泌型表达重组质粒pET-28a/ASP-ChIFN-α.将重组质粒经IPTG诱导5 h,用SDS-PAGE分析表达蛋白含量,并用鸡α-干扰素ELISA(Western-blot)试剂盒检测表达的重组蛋白的特异性.结果表明,包涵体型重组质粒pET-28a/ChIFN-α和分泌型重组质粒pET-28a/ASP-ChIFN-α在23 kD处均表达出目的蛋白,蛋白含量分别为27%和38%,pET-28a/ASP-ChIFN-α的蛋白表达含量比pET-28a/ChIFN-α的蛋白表达含量要高出11%,表达的重组蛋白具有特异性.实验实现了鸡α-干扰素成熟蛋白基因的高效表达,筛选出了可应用于临床的鸡α-干扰素高效表达菌株BL21(DE3)(pET-28a/ASP-ChIFN-α).
关键词
鸡α-干扰素基因
L
-
天(门)冬酰胺酶Ⅱ信号肽
克隆
表达
Keywords
chicken's interferon
-
α gene, L
-
asparaginase Ⅱ signal peptide; cloning, expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
低温胁迫对转ChIFN-α基因百脉根抗寒生理生化的影响
被引量:
4
4
作者
广巧
宋莉
赵德刚
机构
贵州大学生命科学学院农业生物工程研究院山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室
贵州省农业生物工程重点实验室
出处
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期2849-2853,共5页
基金
国家转基因生物新品种培育重大专项子项目(2014ZX08010-003)
贵州省科技厅农业攻关项目(黔科合NY字(2012)3015号)
贵州省优秀科技教育人才省长基金项目(黔省专合字(2012)59号)共同资助
文摘
为研究转Ch IFN-α基因百脉根的低温生长特性,对其进行4℃低温离体水培和可溶性蛋白(SP)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和脯氨酸(Pro)的测定分析,探讨低温胁迫对转Ch IFN-α基因百脉根的影响及机制。研究发现,25 d低温处理期间,百脉根植株均生长迟缓,野生型(WT)还出现叶片枯黄和茎基部腐烂等冻害现象。转基因百脉根(TP)植株同期的MDA含量比WT低1.03倍(p<0.01),WT的MDA下降幅度仅为TP植株的86%。TP同期的SP、SOD、Pro含量均较WT高(p<0.01),且出现的降幅小。TP同期的SP、SOD和Pro含量分别是WT的1.21倍、1.27倍和1.72倍(p<0.01),WT同期的SP和SOD降幅分别是TP的2.26倍和1.93倍(p<0.01),TP植株的SOD含量峰值比WT提前5 d,TP的Pro在中后期增至WT植株的150%和129%。结果表明,转基因百脉根具有较好的低温耐受性和耐受生理基础,这对其在高寒山区的进一步应用及管理提供了基础依据。
关键词
百脉根
鸡α-干扰素基因
转
基因
百脉根
低温胁迫
生理生化特性
Keywords
Lotus corniculatus L.
ChIFN
-
α gene
Transgenic Lotus corniculatus L.
Cold stress
Physiological character
分类号
S541.6 [农业科学—作物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基因重组鸡α-干扰素在肉鸡体内的药代动力学研究
张伟
于忠娜
邹本革
朱凤华
朱连勤
《山东畜牧兽医》
2017
2
下载PDF
职称材料
2
鸡α干扰素基因的原核表达及其活性测定
戴华
郑佳玉
陈俊华
潘志明
焦新安
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
4
下载PDF
职称材料
3
ASP-ChIFN-α融合基因的构建及表达
李丽
周学章
李敏
王玉炯
《宁夏大学学报(自然科学版)》
CAS
北大核心
2008
0
下载PDF
职称材料
4
低温胁迫对转ChIFN-α基因百脉根抗寒生理生化的影响
广巧
宋莉
赵德刚
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2015
4
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