黄芪多糖对鸡免疫禽传染性支气管炎弱毒疫苗免疫效果的影响

试验探究黄芪多糖(APS)对禽传染性支气管炎弱毒疫苗的免疫调节作用,以期发掘黄芪多糖用作疫苗佐剂的应用潜力。将120只14日龄蛋鸡随机分为3组,每组4个重复,每个重复10只蛋鸡,分别设置为APS+H120联合免疫组、H120疫苗组以及PBS阴性对照组。各组蛋鸡共进行3次免疫,每次间隔2周,每次鼻腔接种100μL/只。最后一次免疫14 d后经鼻腔攻毒禽传染性支气管炎病毒M41株,观察鸡的临床症状,检测肺脏和肝脏载毒量。结果显示,与H120疫苗组相比,APS+H120疫苗联合免疫能够诱导14日龄蛋鸡产生传染性支气管炎病毒(IBV)特异性免疫球蛋白G(IgG)和分泌型免疫球蛋白A(sIgA),有效保护蛋鸡抵抗同种异源毒株的攻击,蛋鸡存活率为100%。攻毒后APS+H120组蛋鸡未出现禽传染性支气管炎典型临床症状,蛋鸡生产性能未受到影响。研究表明,APS对禽传染性支气管炎H120弱毒疫苗的免疫效果具有促进作用。

鸡传染性支气管炎(IB)H_(120)细胞弱毒疫苗研究

通过近三年试验,研制出鸡传染性支气管炎毒株IB H_(120)细胞弱毒苗,经室内外近40万羽雏鸡免疫试验表明:该苗以每羽0.01ml滴鼻、点眼或口服免疫4～12日龄雏鸡,7d后产生免疫力;免疫后17d、32d、60d抗标准强毒攻击的免疫保护率分别为88.7%、87.5%、87.5%,免疫期可达二个月;其最小免疫量为0.001ml/羽;以10个免疫剂量接种雏鸡无任何不良反应,安全性能良好;-20℃保存半年、4℃保存一个月效力不变.

鸡传染性支气管炎(IB)弱毒疫苗H_120和H_52对不同血清型IB野毒株的保护试验

用鸡传染性支气管炎弱毒疫苗H_(120)和H_(52)免疫20日龄SPF鸡,8天后,用不同血清型IB野毒株攻毒。结果,攻击毒与疫苗株血清型相同(NPZ,沈-(6),免疫组均得到100％的保护;攻击毒与疫苗株血清型不同(NB_(-90),HV,余桃,天津_(-(1)))免疫组均不能完全保护。

鸡传染性支气管炎(肾型)活疫苗研究报告 Ⅱ.鸡传染性支气管炎(肾型)弱毒W93株的繁殖与鉴定

鸡传染性支气管炎弱毒Ｗ９３株经鸡胚培养繁殖后，制成湿毒，或冻干毒，经鉴定结果表明，纯净，病毒含量均不低于１０＾７ＥＩＤ５０／０．１毫升，且对雏鸡安全。

鸡传染性支气管炎(肾型)活疫苗研究报告 Ⅰ、鸡传染性支气管炎(肾型)弱毒W93株的鉴定

经检验,鸡传染性肾型支气管炎(NIB)弱毒株(W93)纯净,特异性强,病毒含量不低于10^(8.0)EID_(50)/0.1毫升,具有良好的安全性和免疫原性。

鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病三联弱毒疫苗的试制

用同胚培养的鸡新城疫Lasota株和传染性支气管炎H120(或H52)株以及用鸡胚成纤维细胞增殖的传染性法氏囊弱毒株以适当比例混合为抗原,用蔗糖脱脂乳作保护剂,经真空冷冻干燥制成三联弱毒疫苗。通过三批疫苗室内外各项指标的测试,表明该三联疫苗安全性能可靠,免疫效果确实,使用方法简便。在实验室进行的物理性状检验、无菌检验、支原体检验、剩余水分检验、真空度检查均符合国家标准;用10倍大剂量接种15日龄雏鸡无不良反应;以常规量颈部皮下接种免疫后,7 d产生免疫力,免疫后14 d抗鸡新城疫、鸡传染性支气管炎、鸡传染性法氏囊病三株强毒攻击的保护率均为100%。对15日龄雏鸡首免,其免疫期至少为30 d,在-25℃保存期为1年。

鸡传染性支气管炎和禽衣原体病的多表位DNA疫苗构建及其免疫原性研究

试验旨在设计和构建基于鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1蛋白和鹦鹉热衣原体(Cps)主要外膜蛋白(MOMP)的抗原多表位DNA疫苗,并分析其免疫原性。研究利用免疫信息学方法筛选出IBV S1蛋白和Cps MOMP蛋白的优势抗原表位,设计多表位基因M,并利用多种生物信息学软件对其进行预测分析;将M基因、S1和MOMP串联基因分别连接至真核表达载体pEGFP-N1并转染至DF-1细胞,利用Western blot检测目标蛋白的表达情况。将上述重组质粒肌内注射7日龄雏鸡,四免后检测免疫鸡血清中特异性抗体IgG、细胞因子及T淋巴细胞含量。结果显示:构建的表位蛋白结构稳定、免疫原性较好且无副作用;重组质粒pEGFP-M和pEGFP-S1-MOMP与预期大小相符;与pEGFP-N1组和PBS组相比,四免后,pEGFP-M免疫组鸡血清中抗IBV IgG和抗Cps IgG抗体水平极显著升高(P<0.01),与pEGFP-S1-MOMP组相当;pEGFP-M组鸡血清中细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平,T淋巴细胞抗原CD3+、CD4+和CD8+含量均极显著高于pEGFP-N1组和PBS组(P<0.01)。结果表明,构建的多表位DNA疫苗pEGFP-M能够激发鸡的体液免疫和细胞免疫反应,为研制同时预防鸡传染性支气管炎和禽衣原体病的多表位疫苗奠定基础。

鸡肾型传染性支气管炎弱毒活疫苗的研究

从山东省某发病鸡群中分离到一株病毒，经实验室检查，确定为肾型传染性支气管炎病毒。该毒株在鸡胚上繁殖，并可产生典型气管环组织病变，经５次传代，效价稳定，对非免疫的雏鸡安全，经过三批近百万羽份的区域试验，效果确实、可靠。

鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病三联弱毒疫苗与各自单苗的对比试验研究

用实验室自制的鸡新城疫(La Sota株),鸡传染性支气管炎(H120株),鸡传染性法氏囊病(B87株)单苗和三联疫苗分别免疫14日龄非免疫健康雏鸡研究其免疫效力。结果表明,用三联疫苗免疫雏鸡后,鸡新城疫La Sota株、鸡传染性支气管炎H120株与鸡传染性法氏囊B87株之间不产生明显的相互干扰作用,第14和21天的抗体效价与各自的单苗相比无明显差异(P>0.05)。

减毒鼠伤寒沙门氏菌运送的鸡传染性支气管炎病毒s1基因DNA疫苗及其免疫效力研究

为研制鸡传染性支气管炎新型基因工程疫苗,构建和表达了运送鸡传染性支气管炎病毒(IBV)DNA疫苗的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌。首先将鸡传染性支气管炎病毒M41株的全长s1基因插入到嵌合CpG DNA的真核表达质粒pVAX1中,构建出重组真核表达质粒pVAX1-S1-CpG。然后将重组质粒转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建出运送DNA疫苗的重组减毒沙门氏菌SL7207(pVAX1-S1-CpG)。将重组菌SL7207(pVAX1-S1-CpG)分别以1×109CFU,5×109CFU,1×1010CFU的剂量滴鼻和口服接种4日龄雏鸡,2周内所有试验鸡均无任何不良反应,试验结果表明重组菌SL7207(pVAX1-S1-CpG)具有良好的安全性。在免疫后35 d,商品鸡体重测定结果表明重组菌免疫不影响鸡体增重。以5×109CFU重组菌滴鼻和口服两次接种4日龄商品代伊莎褐蛋鸡,二免3周后,血清抗体和小肠黏膜抗体测定结果表明,SL7207(pVAX1-S1-CpG)免疫组抗体水平与空白对照组、空载体对照组之间分别存在极显著性差异(P<0.01)。攻毒试验结果表明,重组菌SL7207(pVAX1-S1-CpG)免疫组有较高的免疫保护效力,与灭活苗和减毒苗效力相当,显示出一定的应用前景。

鸡传染性支气管炎病毒CK/CH/LHLJ/04V的分离鉴定及致弱的初步研究

从黑龙江省某鸡场发病鸡群的肾脏中分离到一株病毒,通过病毒致SPF鸡胚病变特征、对鸡外周血红细胞凝集特性、病毒粒子形态学特征以及RT-PCR鉴定等方面的研究,表明该病毒为鸡传染性支气管炎病毒,并命名为CK/CH/LHLJ/04V。通过对该病毒基因型分析以及对SPF鸡致病性试验发现该病毒为我国近年来流行的一类重要IBV的代表。将该毒株在SPF鸡胚连续传代110代(P110),取不同代次毒进行动物实验。结果显示,该毒株对SPF雏鸡的致病力随鸡胚传代次数的增加而逐渐降低。P110代毒以105.0 EID50/0.1 mL的剂量通过点眼滴鼻接种15日龄SPF雏鸡,鸡群发病率和死亡率均为0。不同代次毒接种SPF鸡对同源毒株P3代强毒的攻击均具有100%保护性。实验表明,IBV毒株CK/CH/LHLJ/04V P110对SPF雏鸡已无致病性,但仍具有良好的免疫原性,可作为研制IB弱毒疫苗的候选毒株。

鸡传染性支气管炎疫苗株与广西流行野毒株鉴别方法的建立

根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)3′端非编码区和S1基因保守区域设计两对特异性引物,对H120、Ma5和4/91、M41等常用疫苗株以及26株广西田间分离株进行二重RT-PCR扩增,并进行该方法的特异性和敏感性试验,同时进行了初步应用。结果表明,经RT-PCR扩增后,M41毒株得到约160bp的目的片段,Mass型毒株得到约370bp的目的片段,4/91型IBV毒株得到约480bp和345bp 2条目的片段,其他24株广西分离株得到1条大小在260bp^345bp的目的片段。特异性试验表明此二重RT-PCR方法不能扩增NDV、AIV、MDV、IBDV、ALV等,敏感性试验表明最低检测量达到100pg。该方法的临床应用表明,攻毒鸡病料阳性率达90%。研究结果表明了所建立的二重RT-PCR方法可以鉴别IBV疫苗株与广西流行野毒株,且特异性强,敏感度高。

腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒(IBV-D971株)致弱的研究

将IBV_D971株病毒在SPF鸡胚上连续传至 12 0代 ,培育出了一株毒力明显减弱 ,并且具有良好免疫原性的腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒弱毒株 (IBV_D971株 )。IBV_D971F10 5代毒力明显下降 ,以 10 9.2 5EID50 接种 1日龄SPF鸡 5 / 5无不良反应。IBV_D971F10 5代毒连续通过 1日龄SPF鸡体 5代 ,未见毒力返强。以 10 3EID50 免疫 1日龄SPF鸡 ,攻毒后 5 / 5保护 ,对照 5 /

鸡传染性支气管炎病毒变异机制及致弱方法研究进展

因鸡传染性支气管炎病毒(IBV)基因组RNA聚合酶缺乏校正功能和其特有的套式转录方式,IBV容易发生变异,导致新的变异毒株不断出现,使现有的疫苗难以完全满足预防的需要,这就要求根据流行特点不断研究新的疫苗。根据IBV的变异机制,利用鸡胚连续传代、改变生长温度和基因工程方法可人工获得致弱的IBV毒株,为研究IBV弱毒疫苗毒株奠定基础。论文就近几年来IBV的变异情况及致弱方法研究进展做一综述,为更好的预防IBV提供参考。

用冷适应的方法致弱鸡肾型传染性支气管炎病毒

用冷适应的方法 (病毒经囊液接种鸡胚后于 32℃孵化 48h) ,将已鉴定的北京地区鸡肾型传染性支气管炎病毒 (IBV)分离株 Tu,Da,Xi和 Hu分别通过鸡胚传代减毒致弱 ,在一定代次时接种敏感鸡作毒力测定试验 ,结果表明 ,Tu株在传至 46代时 ,Xi株在传至 5 1代时对雏鸡的毒性已大为降低 ,并且分别回归 SPF雏鸡 5代和 3代后不出现返强现象。毒价测定 Tu46和 Xi51 的 EID50 值分别为 10 - 6.3 6/ 0 .2 m l和 10 - 6.70 / 0 .2 m l,而且 Tu株出现稳定增高的趋势。它抵抗同源强毒攻击的最小免疫剂量为 10 - 2 × 0 .5 m l。此外 ,对弱毒株免疫后的雏鸡用标准强毒株Gray攻击以衡量其免疫原性 ,结果 Tu46具有 90 %的保护率。间接 EL ISA对免疫后的抗体水平检测结果反映 ,Tu46免疫鸡体内血清抗体的消长呈规律性变化 ,并在免疫后 2 0天出现最高峰。综合结果表明 ,作者培育的 IBV- Tu46株具有对雏鸡安全、毒价高及较好的免疫原性的特点 ,有希望成为供生产使用的疫苗。

鸡传染性支气管炎病毒变异机理及疫苗研究现状

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)具有高度变异的特点,在养鸡业中不断发生变异,产生较多的血清型和基因型,且不同血清型之间缺乏交叉保护,常常导致养鸡生产中的免疫失败,防控难度较大,给我国养鸡业造成巨大经济损失。论文从IBV变异的分子机制(基因点突变、插入和缺失以及同源重组)、变异的理论基础(基因突变、基因重组)等方面阐述了IBV的变异机理,同时对IBV疫苗研究现状进行了综述,为鸡传染性支气管炎的免疫防控及相关研究提供参考。

鸡传染性支气管炎肾型弱毒株J9的免疫原性试验

以不同剂量 (1 0 3 .8～ 1 0 4 .9TOCID50 /只 )的IB肾型弱毒株J9免疫接种 1 5～ 70日龄SPF鸡 ,然后用部分国内分离的IBV肾型强毒株HV、NB90、L_1、TJ和国外肾型标准强毒株T攻击。三次试验初步表明 ,J9株具有对这些强毒株攻击的不同程度的免疫保护作用。

肾型鸡传染性支气管炎病毒疫苗免疫机制初探——鸡抗肾型鸡传染性支气管炎病毒(IBV)IgG的分禽纯化及特异性鉴定

采用肾型IBV毒株抗原研制成油佐剂灭活苗接种鸡群,结果表明,血清中抗体形成快、抗体水平较高,维持时间较长且具有较高的免疫保护力。为此我们进行本试验,经高度纯化的鸡抗肾型IBV IgG,采用免疫荧光试验、间接阻断Dot-ELISA和细胞中和试验对其特异性和中和作用加以研究,结果表明,鸡抗肾型IBV抗体成分主要是免疫球蛋白IgG.本文阐明了肾型IBV与支气管炎型IBV疫苗免疫机制的不同,为肾型IBV油佐灭活苗的推广应用提供了参考。