鸡传染性法氏囊病超强毒VP1基因的原核表达及兔抗血清的制备

以鸡传染性法氏囊病超强毒Gx株基因组RNA为模板,通过RT-PCR扩增VP1基因,经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切处理后与经相同酶切处理的pET-30a原核表达载体连接,将酶切、PCR及测序鉴定正确的阳性重组子转化BL21(DE3)感受态细胞,融合蛋白His-VP1经IPTG诱导表达后主要以包涵体形式存在。Western blot检测到约97ku的目的蛋白能够与特异性的VP1单克隆抗体反应。将纯化的目的蛋白免疫新西兰白兔后获得了抗VP1蛋白的血清。该血清能够与重组杆状病毒rBacGxVP1感染的sf9细胞发生特异性反应,而且其ELISA抗体效价达到1∶25600。鸡传染性法氏囊病超强毒VP1基因的表达与兔抗血清的制备为病毒的检测及VP1功能的研究提供了有效工具。

鸡传染性法氏囊病超强毒LX株的分离鉴定

从一免疫失败鸡场中分离到 1株鸡传染性法氏囊病野毒株 ,命名为 LX株。经血清学、鸡胚接种、病毒形态、外源病毒 (CAA、NDV和 IBV)排除试验等证实该分离物为纯净的 IBDV。人工感染试验表明 ,该L X株接种 8周龄 SPF鸡后第 2天鸡只精神沉郁 ,拉白色或绿色粪便 ,发病率为 10 0 % ,第 3～ 4天出现死亡高峰 ,而后很少引起死亡 ,死亡率达 92 .3% ,剖检可见全身性出血素质 ,法氏囊呈“紫葡萄样”外观 ,脾脏肿大 ,胸腺萎缩 ,骨髓脂肪化 ,肝脏稍见脂肪变等病变 ,表现了超强毒株的特点。接种鸡胚后 72～ 96 h引起鸡胚几乎全部死亡的规律性死亡特征。从而表明 ,该 L X分离株为 IBDV超强毒 。

鸡传染性法氏囊病超强毒感染后SPF鸡免疫器官病理学观察

IBDV超强毒株LX株接种 2周龄SPF雏鸡后 ,其致病性不同于经典强毒株CJ80 1株 ,它主要引起接种鸡全身性炎症反应 ,法氏囊、脾脏、盲肠扁桃体等免疫器官中大量异嗜性白细胞、巨噬细胞浸润 ,淋巴细胞严重坏死崩解 ,胸腺皮质严重萎缩、坏死 ,骨髓中造血细胞减少、巨噬细胞和脂肪细胞增生。在接种后 14d法氏囊淋巴滤泡严重萎缩、淋巴细胞排空形成囊腺样结构 ,未见恢复正常 ,其它免疫器官形态基本恢复正常。电镜观察 ,接种后 2和4d可见胸腺淋巴细胞胞浆浓集、染色质周边化形成新月形 ,表现细胞凋亡特征 ;在法氏囊坏死淋巴细胞胞浆中可见6 0nm大小呈晶格排列或散在的病毒粒子。研究初步探明了鸡传染性法氏囊病病毒超强毒的致病机理。

鸡传染性法氏囊病超强毒Gx及其致弱株基因组B节段的克隆和序列分析

用蛋白酶K法分离提取了鸡传染性法氏囊病病毒强毒株Gx及其致弱株Gt的病毒核酸dsRNA ,应用随机引物将RNA反转录成cDNA ,以此为模板用长距离一步法扩增出全长基因B节段 ,将其克隆入PMD18_T载体 ,进行了测序 ,并用DNAStar软件进行序列分析。测序结果表明 ,克隆的Gx株B节段全长为 2 82 7bp ,与超强毒参考株UK6 6 1的同源性为 88 2 % ,与强毒参考株Harbin_1株的同源性达 96 3% ;克隆的Gt株B节段全长为 2 82 7bp ,与弱毒参考株P2的同源性达 99 5 %。而Gx株与Gt株B节段的核苷酸的同源性只有 89 8% ;vvIBDV_Gx。

鸡传染性法氏囊病超强毒的感染与防制

鸡传染性法氏囊病超强毒的感染与防制张存，范坤晓，陈如玉，刘蔓雯（浙江省农科院畜牧兽医研究所３１００２１）鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）自１９５７年在美国甘布罗镇（Ｇｕｍｂｏｒｏ）首次发生后，几十年来，已遍及几乎所有的养鸡国家。其病原为双股ＲＮＡ病毒科（Ｂ...

鸡传染性法氏囊病超强毒Gx株感染性分子克隆的构建

本研究以鸡传染性法氏囊病超强毒Gx株(野毒株)基因组为模板,用蛋白酶K法提取病毒基因组核酸dsRNA,在cDNA克隆的5'端上游引入了T7启动子序列,采用Long-accurateRT-PCR(LA-PCR)一步法扩增并克隆了病毒基因组A节段与B节段全长cDNA。序列测定结果表明,基因组A节段全长共3267个核苷酸,包括5'及3'端的非编码区和两个部分重叠的开放阅读框,基因组B节段全长共2843个核苷酸,包括5'及3'端的非编码区和一个开放阅读框。将IBDV-Gx株的A节段全长基因组及B节段全长基因组分别克隆入pMD18-T载体,构建成pMD-A、pMD-B两个带有T7启动子的重组质粒。两个重组质粒线性化后,进行体外转录,然后共电转染于鸡胚成纤维细胞37℃培养72h并传代。收获的细胞传代培养物分别用RT-PCR、间接免疫荧光、蚀斑试验等方法进行鉴定,结果用RT-PCR扩增出了VP3及VP5基因片段,间接免疫荧光检测到了特异性的荧光抗体,蚀斑试验结果表明蚀斑形成单位为3×103PFU/mL。

鸡传染性法氏囊病超强毒901株的分离和鉴定

从暴发鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）死亡率６３．５１％的病死鸡中，分离出一株ＩＢＤ病毒（ＩＢＤＶ）９０１株。经检测，９０１株是一株ＩＢＤＶ超强毒株，可使３１日龄健康雏鸡７１．４％死亡，１０日龄ＳＰＦ鸡胚和３０日龄ＳＰＦ雏鸡１００％死亡。死亡鸡再现了自然暴发ＩＢＤ的典型病变。

鸡传染性法氏囊病超强毒Gx与疫苗毒Gt在鸡体内的复制研究

本试验利用鸡传染性法氏囊病超强毒Gx及其致弱疫苗毒Gt为对象,研究超强毒与弱毒株在鸡体主要免疫器官内的复制情况,以探讨两类毒株表现不同生物特性的原因。分别利用鸡胚半数致死量和鸡胚成纤维细胞半数感染量对超强毒Gx和疫苗株Gt进行病毒滴度的测定;再利用荧光定量RT-PCR对两类毒株进行病毒量的校准。以相同量的病毒对2周龄SPF鸡进行攻毒。攻毒试验表明超强毒Gx能造成47.5%的死亡,法氏囊、脾脏、胸腺等免疫器官均严重损伤;而疫苗毒Gt无致死,且未能造成任何病理可见的损伤。病毒的体内复制情况表明超强毒相对于疫苗毒复制更为迅速,病毒载量更高。

鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒的初步应用

为建立鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒,该研究以灭活纯化的鸡传染性法氏囊病病毒作为包被抗原,连续制备了3批次鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒中试产品。结果表明:该试剂盒对IBDV阳性血清检测的灵敏度可达1∶6400;对鸡新城疫病毒、鸡减蛋下降综合征病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡抗网状内皮组织增生症病毒、鸡马立克氏病病毒、禽流感病毒H5亚型、鸡传染性贫血病毒阳性血清和SPF鸡阴性血清均无交叉反应;批内和批间重复性的变异系数分别在4.21%和5.07%以内。应用该试剂盒和某进口同类ELISA试剂盒对258份临床白羽肉鸡血清样品同时进行对比检测,相对敏感性、相对特异性和符合率分别为98.44%、96.97%和98.06%。可见,该试验建立的鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒具有有操作简便、特异性强、灵敏度高的特点。

鸡传染性法氏囊病的诊断及防控

鸡传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病毒感染鸡导致的一种高接触性传染病。该病对感染的青年鸡和雏鸡危害较大。该病发病急,病程短,具有2~3天的潜伏期,发病率高达60%以上,致死率高。病毒主要通过损害法氏囊,造成机体免疫力下降,从而继发其他疾病,给我国养鸡业带来巨大的经济损失。为降低该病的发病率,本文主要从该病的病原特性、流行特点、临床诊断及防治措施等方面进行归纳总结,以供养殖人员参考。

鸡传染性法氏囊病的分析诊断和防控

传染性法氏囊病是一种急性、高度接触性、发病率高的病毒性传染病,这种疾病不仅导致鸡的生产性能下降,还可引发免疫抑制和缺陷,加大了鸡的淘汰率,给养殖场(户)带来较大的经济损失,危害性极强。因此,对疾病进行鉴别与诊断,做好疫病的防控工作。1鸡传染性法氏囊病的分析1.1法氏囊病毒的基本特征法氏囊病毒是一种引起鸡法氏囊病变的病原体,因其具有强烈的传染性也被叫做传染性法氏囊病毒。

鸡传染性法氏囊病及防控要点

鸡传染性法氏囊病是由鸡传染性法氏囊病毒引起的常见病毒病,该病以地方流行性为主,具有较强的传染性、较快的传播速度和较高的致死率,严重危害鸡的健康生长及养鸡业的稳定发展。基于此,本文着重对鸡传染性法氏囊病的发病趋势及防控要点进行了探讨。

鸡传染性法氏囊病的诊断与治疗研究

随着畜禽养殖行业的规模化发展,有关于传染性疾病的诊断方法、治疗方法愈发丰富。传染性法氏囊病是常见的传染性疾病。基于此,为提高鸡群养殖效果,避免此类疾病的大范围暴发,本文简单介绍鸡传染性法氏囊病的流行病学,深入研究该疾病的诊断方法和治疗方法,包括临床诊断、鉴别诊断、实验室诊断,西药治疗和中医治疗,以期促进养鸡行业的健康发展。

一例蛋鸡传染性贫血与法氏囊病混合感染的诊治报告

鸡传染性贫血病(CAV)是由鸡传染性贫血病毒引起的一种鸡免疫抑制病,病鸡表现为贫血、鸡肉髯、面部皮肤及可视黏膜颜色苍白,鸡胸、腿部肌肉出血。该病具有较强的免疫抑制作用,可导致疫苗免疫失败,患有传染性贫血的鸡群很容易混合感染法氏囊病,降低鸡群的生产性能。临夏县某蛋鸡养殖场,饲养罗曼褐蛋鸡1500羽,3周龄时先出现鸡传染性贫血病例,后又继发感染鸡法氏囊病。通过诊断分析,结合各种治疗与防控措施,有效控制了病情蔓延,病鸡恢复健康。现将诊治过程报告如下。

鸡传染性法氏囊病的诊断与防治

鸡传染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease,IBD)是一种具有高度传染性的病毒性疾病,主要侵害幼龄鸡只的法氏囊,严重损害其免疫系统。IBD不仅导致鸡只生长受阻、死亡率上升,还常常与其他传染病并发,进一步增加了防治难度。本文详细阐述了鸡传染性法氏囊病的流行特点、症状表现、剖检变化、诊断方法等,提出了优选健康鸡苗、严格落实鸡场消毒制度、改进免疫程序、减少应激刺激、优化饲养管理模式、提高鸡群抗病能力等对策,以期为养鸡场制定科学合理的防治措施提供依据。

鸡传染性法氏囊病的诊断与防治措施

鸡传染性法氏囊病又名鸡传染性腔上囊病,致病原为传染性法氏囊病毒,多发于雏鸡群,成年鸡偶发,属于一种免疫抑制性病毒病。该病在我国鸡养殖区呈现地方性流行特征,一旦发病,在鸡群中传播迅速,严重影响鸡养殖经济效益。为有效防控鸡传染性法氏囊病的发生与危害,本文将结合笔者多年实践养殖经验对该病的致病原、临床病症、诊断方式等进行分析,并提出几点高效综合防控措施,以供参考。

鸡传染性法氏囊病的治疗与预防措施

在养殖业中,法氏囊病的暴发不仅影响单个鸡场的经济效益,还可能对整个地区的家禽生产造成严重影响。基于此,本文就鸡传染性法氏囊病的兽医治疗进行了深入分析,旨在为基层养殖业的发展提供科学参考依据。

一例鸡传染性法氏囊病的诊疗体会

鸡传染性法氏囊病(infectious bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)引起的一种高度接触性传染病,目前已成为危害养鸡业的重要传染病。本文介绍了IBD的发病情况、临床症状、病理变化、诊断和综合防治,并结合自身实践经验提出了诊疗体会,以期为养鸡生产者提供参考。