检测鸡传染性鼻气管炎病毒抗体的间接ELISA方法的研究

分别用绿猴肾细胞和鸡胚成纤维细胞增殖鸡传染性鼻气管炎病毒NL 7784株 ,提纯抗原建立了检测鸡传染性鼻气管炎病毒抗体的间接酶联免疫吸附试验 (ELISA)。试验的最佳反应条件为 :抗原最佳稀释度为 1∶16 0 ,酶标抗体为 1∶10 0 0稀释 ,待检血清为 1∶16 0稀释 ,包被液为pH9.6的碳酸盐缓冲液 ,6 %犊牛血清 (CS)作封闭液 ,稀释液用含 10 %CS的Tween_2 0磷酸盐缓冲液 ,洗涤液用含 0 .5 %Tween_2 0的磷酸盐缓冲液 ,抗原与抗体的最佳反应时间为 30分钟 ,底物的反应时间为 15分钟。与中和试验进行了比较 ,证明所建立的方法具有良好的特异性、稳定性、可重复性和较高的敏感性。

应用间接ELISA检测鸡传染性鼻气管炎病毒抗体

采用增殖的鸡传染性鼻气管炎病毒 (ARTV) NL7784株 ,经 PEG- 2 0 0 0 0浓缩液提纯抗原和纯化羊抗鸡 Ig G抗体 ,建立了检测 ARTV抗体的间接酶联免疫吸附试验。该试验的最佳反应条件为 :包被液为 p H9.6的 0 .0 5 mol/ L碳酸盐缓冲液 ,抗原最佳稀释度为 1∶ 16 0 ,以含 6 %犊牛血清 (CS)的磷酸盐缓冲液作为封闭液 ,稀释液用含 10 %CS、0 .5 %Tween- 2 0的磷酸盐缓冲液 ,抗原与血清结合的最佳反应时间为 30 min;酶标抗体的最佳稀释倍数为 1∶ 10 0 0 ,酶联反应的最佳时间为 30 min,底物的最佳反应时间为 15 min。本方法具有良好的特异性、稳定性、可重复性和较高的敏感性。

火鸡传染性鼻气管炎病毒对鸡致病性的研究

作者对火鸡传染性鼻气管炎病毒( ARTV)对鸡致病性进行了初步的研究 ,发现大肠杆菌在本病的发生过程中起着重要的协同作用。首先对鸡的肝、肾进行攻毒 ,然后分离病毒 ,经鸡胚多次传代后 ,鸡胚出现矮小 ,头部出血 ,有时全身出血。取鸡胚尿囊液 ,经负染 。

鸡传染性鼻气管炎病毒致病性的研究

作者对鸡传染性鼻气管炎病毒(ARTV)致病性进行了初步的研究,发现大肠杆菌在本病的发生过程中起着重要的协同作用。首先对鸡的肝、肾进行攻毒,然后病毒分离,经鸡胚多次传代后,鸡胚出现矮小,头部出血,有时全身出血,取鸡胚尿囊液,经负染,在电子显微镜下观察发现有密集的呈球形的病毒颗粒。

滑液囊支原体与鸡传染性支气管炎病毒共感染对SPF鸡的致病性研究

为比较滑液囊支原体(MS)和鸡传染性支气管炎病毒(IBV)共感染对SPF鸡的致病性,本研究将144只28日龄SPF鸡随机均分为阴性对照组、MS感染组、IBV-M41感染组、IBV-M41+MS共感染组、IBV-QX感染组、IBV-QX+MS共感染组共6组,采用50μL/只剂量按相应分组点眼感染MS (106CCU50)、IBV(105EID50),阴性对照组以50μL/只点眼KM2培养基(左眼)和PBS (右眼)。感染后每天观察临床症状,在感染后7 d、14 d、21 d和28 d每组随机剖检6只鸡,观察气囊炎和气囊损伤评分,并采集气管进行病原再分离,其中MS经支原体液体培养基培养后进行PCR鉴定,IBV接种SPF鸡胚后进行RT-PCR鉴定。此外,各组鸡气管均经10%甲醛固定后进行粘膜厚度检测以及病理损伤评分。结果显示:除阴性对照组和MS感染组,其他组鸡在感染后4 d均出现一过性呼吸道症状。剖检结果显示MS感染组鸡在感染后21 d出现气囊炎,28 d仍可见气囊炎;而IBV-M41感染组和IBV-QX感染组鸡在感染后7 d或14 d出现气囊炎,且气囊炎的发生率均未超过50%。感染后14 d IBV-QX+MS共感染组鸡气囊炎发生率达100%(6/6),直至21 d并且大部分鸡气囊炎可持续至感染后28 d (5/6),而IBV-M41+MS共感染组鸡气囊炎仅可持续至感染后21 d,且气囊炎的发生率最高在感染后14 d (5/6)。IBV-QX+MS共感染组鸡平均气囊损伤评分在感染后14 d、21d和28 d均极显著高于单一感染组(P<0.001),而IBV-M41+MS共感染组鸡仅在感染后14 d极显著高于单一感染组(P<0.001)。病原再分离结果显示,各感染组鸡均在气管中再分离到MS(感染后28 d内)或IBV(感染后7 d内)。病理损伤检测结果显示,共感染组鸡较各单一感染组鸡气管粘膜增厚持续时间更长以及病理损伤更为严重。IBV-M41+MS共感染组鸡在感染后14 d平均气管粘膜厚度显著低于IBV-QX+MS共感染组(P<0.05),而在感染后21 d极显著低于IBV-QX+MS共感染组(P<0.001),其余各组鸡在感染后14 d和21 d均极显著低于IBV-QX+MS共感染组鸡(P<0.001)。IBV M41+MS共感染组鸡最早14 d出现气管病变,而IBV QX+MS共感染组鸡在共感染后7 d就可见气管病理损伤,且共感染组鸡的平均气管损伤评分均极显著高于单一MS或IBV感染组(P<0.01或P<0.001)。上述结果证实MS和IBV共感染较单一感染对28日龄SPF鸡的致病性更强,IBV M41或QX株与MS共感染对SPF鸡的致病性存在差异,本研究为临床IB和MS的防控提供科学参考依据。

抗鸡传染性支气管炎病毒中药的筛选

【目的】对鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)进行抗病毒中药的筛选,并验证其治疗效果,为临床用药提供一定参考。【方法】采用鸡胚培养法,通过预防和治疗2个角度对24味单一中药、6种市售复方中药进行抗IBV的有效成分或方剂筛选试验,即在SPF鸡胚中先注射中药2 h后再接种病毒和先接种病毒2 h后再注射中药。使用SPSS 20.0软件对鸡胚重量进行方差分析,利用实时荧光定量PCR法辅助判定治疗效果。【结果】对鸡胚净重进行方差分析显示,桔梗组与阳性对照组差异显著(P<0.05),与阴性对照组差异不显著(P>0.05),表明预防和治疗均有效果。实时荧光定量PCR检测鸡胚尿囊液病毒滴度结果显示,桔梗、鱼腥草、宣肺败毒方、绞股蓝、蒲公英、甘草对IBV增殖均有抑制作用,其中桔梗抑制效果最佳。【结论】桔梗对IBV有显著的预防及抑制效果,结果为深入研究桔梗作用机理提供了依据。

牛传染性鼻气管炎病毒的生物学特性、诊断方法和流行现状

牛传染性鼻气管炎是影响奶牛养殖业健康发展的传染性疾病,不仅导致产奶量下降,还引发脑膜炎、子宫炎、鼻窦炎等并发症,易导致母牛流产或发生死胎。该病在全世界广泛流传,,给奶牛养殖业造成较严重危害和巨大经济损失。本文综合概述牛传染性鼻气管炎病毒的形态结构、理化性质和基因组特征,阐述现有诊断方法,介绍该病流行现状,以期为该病防控和诊断提供理论参考。

鸡传染性喉气管炎病毒微滴式数字PCR定量检测方法的建立

旨在建立检测鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)绝对定量方法。根据已发表的鸡ILTV的TK基因序列,针对其保守区域分别设计1对特异引物和1条探针,建立检测鸡ILTV的微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)方法,并评价其特异性、敏感性和重复性。结果显示,建立方法的最佳引物浓度为20μmol/μL,最佳探针浓度为10μmol/μL,最佳退火温度为56℃。特异性检测结果显示,建立的方法只检出ILTV,没有检出其他病原株。敏感性检测结果显示,采用建立的方法定量检出ILTV重组质粒标准品的最低限为4.6拷贝/μL。对3个连续稀释的pMD18-ILTV重组质粒DNA进行检测,3次重复检测结果的变异系数均小于5%。对83份病鸡喉拭子、肺及脾组织样品进行检测,采用建立的ddPCR检出ILTV阳性样品10份,荧光定量PCR检出ILTV阳性样品9份,ddPCR的阳性检出率(12.05%)高于荧光定量PCR的阳性检出率(10.84%)。结果表明,建立的ddPCR方法定量检测ILTV特异性强、敏感性高、重复性好,为绝对定量检测ILTV提供更好的技术支撑。

鸡传染性支气管炎和禽衣原体病的多表位DNA疫苗构建及其免疫原性研究

试验旨在设计和构建基于鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1蛋白和鹦鹉热衣原体(Cps)主要外膜蛋白(MOMP)的抗原多表位DNA疫苗,并分析其免疫原性。研究利用免疫信息学方法筛选出IBV S1蛋白和Cps MOMP蛋白的优势抗原表位,设计多表位基因M,并利用多种生物信息学软件对其进行预测分析;将M基因、S1和MOMP串联基因分别连接至真核表达载体pEGFP-N1并转染至DF-1细胞,利用Western blot检测目标蛋白的表达情况。将上述重组质粒肌内注射7日龄雏鸡,四免后检测免疫鸡血清中特异性抗体IgG、细胞因子及T淋巴细胞含量。结果显示:构建的表位蛋白结构稳定、免疫原性较好且无副作用;重组质粒pEGFP-M和pEGFP-S1-MOMP与预期大小相符;与pEGFP-N1组和PBS组相比,四免后,pEGFP-M免疫组鸡血清中抗IBV IgG和抗Cps IgG抗体水平极显著升高(P<0.01),与pEGFP-S1-MOMP组相当;pEGFP-M组鸡血清中细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平,T淋巴细胞抗原CD3+、CD4+和CD8+含量均极显著高于pEGFP-N1组和PBS组(P<0.01)。结果表明,构建的多表位DNA疫苗pEGFP-M能够激发鸡的体液免疫和细胞免疫反应,为研制同时预防鸡传染性支气管炎和禽衣原体病的多表位疫苗奠定基础。

GI-19型(QX型)鸡传染性支气管炎病毒的病原特性分析

为了解GI-19型(QX型)鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)的病原特性,筛选6株GI-19型IBV进行EID_(50)测定以及鸡胚致病力和雏鸡致病性试验,并应用高通量测序技术进行基因组测序,分析病毒基因组和主要结构蛋白编码基因生物特性。结果显示:IBV/Chicken/Hubei/S1402/2021分离株对鸡胚有致病性,导致鸡胚表现胚体蜷缩、矮小等典型病变特征,经SPF鸡胚传代至第5代,表现较为稳定的EID_(50)(10^(-5.33)/0.1 mL),但其对雏鸡无致病性;IBV/Chicken/Sichuan/C1452/2021分离株对鸡胚没有致病性,但将其接种1日龄雏鸡,可导致雏鸡出现33.33%(5/15)的发病率,引起的典型病变为雏鸡肾脏尿酸盐沉积。对6株GI-19型IBV分离株的基因组和主要结构蛋白编码基因进行系统进化分析和生物特性分析,发现IBV/Chicken/Hubei/S1402/2021分离株与其他分离株存在明显差异,且在1a和1b基因区域存在重组现象。结果表明:我国流行的部分IBV毒株对鸡胚和雏鸡的致病性存在差异;IBV毒株S1基因的变异可能会影响其致病力,而N基因的变异可能会影响其感染细胞的能力。本研究分析了部分GI-19型IBV毒株的病原学特征,为揭示IBV的致病机理和免疫机制奠定了基础,为制定鸡传染性支气管炎防控策略提供了依据。

不同毒力传染性支气管炎病毒诱导SPF鸡炎症反应的免疫机制

以specific pathogen-free(SPF)鸡为研究对象,通过滴鼻点眼方式感染传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)强毒株(CK/CH/LDL/140520)和IBV弱毒株(γCoV/ck/China/I0718/17)。分别在感染后12、36 h和3、7、14 d,采集法氏囊、脾脏、肾脏和气管,运用实时荧光定量PCR法,检测感染不同毒力IBV后,SPF鸡各脏器组织中免疫相关因子表达差异,初步探讨SPF鸡对不同毒力IBV免疫反应机制。结果表明,IBV弱毒株感染早期主要上调Toll样受体15(Toll-like receptors 15,TLR15)基因表达水平,提高白细胞介素(Interleukin,IL-1β)、IL-8基因表达量。法氏囊是介导启动获得性免疫反应的主要器官;脾脏是介导调控获得性免疫反应的主要器官,IBV强毒株在感染后期持续诱导提高TLR7、TLR15、TLR21基因和IL-6基因表达水平。可知,不同毒力IBV诱导SPF鸡炎症反应的免疫活化机制及介导调控获得性免疫反应的器官存在一定差异,为进一步揭示IBV强弱毒株致病性差异及诱导宿主不同免疫反应激活机理提供新的参考依据。

鸡传染性喉气管炎的临床症状及防治方法

鸡传染性喉气管炎(Avian Infectious laryngo Tracheitis,AILT)是由传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV)引发的一种呼吸道疾病,主要在鸡群中流行,主要感染鸡的呼吸道,导致气管和喉部黏膜肿胀和水肿,进一步发展为糜烂和出血[1],临床特征为呼吸困难、持续咳嗽、咳出血样渗出物或黄色干酪状假膜等,影响鸡的正常生长和生产性能,如造成蛋鸡产蛋量显著降低。鸡传染性喉气管炎属于急性高度接触性传染病,病鸡、康复后的带毒鸡和无症状的带毒鸡是主要传染来源,主要通过直接接触传播给其他健康鸡,感染率可达90%~100%.

鸡传染性支气管炎的综合防控

鸡传染性支气管炎是由传染性支气管炎病毒引起的呼吸道疾病,在鸡养殖中会造成严重经济损失。为了减少疫情的发生和传播,综合防控鸡传染性支气管炎至关重要。1鸡传染性支气管炎概述1.1传播途径传染性支气管炎病毒通过气溶胶、直接接触以及被污染饲料、水源和引起污染的设备等途径传播。饲养密度高、环境条件差的鸡群更容易受到感染。

牛传染性鼻气管炎的科学防治

牛传染性鼻气管炎是由甲型疱疹病毒感染而引发的一种高度接触性传染病,可通过多种途径传播,根据具体症状表现不同,临床分为呼吸型、生殖型、流产型、脑炎型、肠炎型和结膜角膜炎型等多种类型。预防该病需对传染源进行严格控制,做好场内全方位消毒工作,提升生物安全管理水平。此外,该病目前无特效化学药物能够治疗,对症治疗可降低病死率。

鸡传染性支气管炎的诊断和控制

传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus)是一种RNA病毒,其高突变率和重组率使其快速进化,从而阻碍了对病毒分子流行病学的理解,影响了诊断分析的准确性,限制了疫苗的效力,并有助于病毒的免疫逃逸。这些因素共同导致了家禽业面临的疾病和经济损失,使之成为主要原因之一。传染性支气管炎病毒的诊断和控制策略在实际应用中存在一些优点和缺点,而其实施效果很大程度上取决于个体的敏感性。笔者旨在综述这种病毒的生物学特征和进化,重点介绍它们在诊断和控制方面的相关性以及潜在应用。

鸡传染性支气管炎的流行现状与防控措施

鸡传染性支气管炎是由冠状病毒引起的急性、高度传染性呼吸道疾病,主要影响禽类。该病毒属于冠状病毒科。该疾病首次在1925年被描述,并在全球范围内广泛分布。近年来,随着家禽业的快速发展,鸡群密度的增加和人类对家禽产品的需求增长,鸡传染性支气管炎的暴发频率也呈上升趋势,导致了巨大的经济损失。临床症状包括呼吸困难、咳嗽、喷嚏和鼻腔排泄物;感染的鸡会出现采食减少、减重、产蛋率下降等症状。尽管存在多种疫苗和防控措施,但由于病毒变异的快速性和复杂的流行病学特点,使得预防和控制变得困难。鉴于此,本研究旨在分析鸡传染性支气管炎的当前流行现状,以及探讨有效的防控策略,以期为家禽业提供有力的科学依据,降低经济损失并确保家禽产品的安全与质量。

蛋鸡传染性支气管炎的现状与防控策略

蛋鸡传染性支气管炎是一种由传染性支气管炎病毒引起的高度传染性疾病,该病毒对全球家禽业构成了严重威胁,尤其影响蛋鸡的呼吸系统和生殖系统,导致生产性能显著下降。据世界动物卫生组织报告,蛋鸡传染性支气管炎每年在全球范围内造成的经济损失高达数亿美元。近年来,由于该病毒的高变异性,新的血清型和基因型不断出现,加剧了防控的难度,疫苗保护的局限性逐渐显现。

鸡传染性喉气管炎的中医疗法

鸡喉气管炎是由喉气管炎病毒引起的-种记性呼吸道传染病。临床上以发病急、传染快、呼吸困难、咳出血样渗出物为特征。本病尚无特效药物治疗。如采用中医治疗可取得较好疗效。

鸡传染性支气管炎的预防和防治

鸡传染性支气管炎是一种由禽传染性支气管炎病毒引起的禽类呼吸系统疾病。该病的症状包括呼吸困难、倦怠、食欲不振、腹泻和咳嗽等,患病的鸡群体会出现减产和死亡率增加等现象。笔者重点介绍鸡传染性支气管炎的发病原因以及临床症状,并提出具体的防治措施,以期为现代鸡类养殖中鸡传染性支气管炎的防治提供参考。