鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)分离纯化的研究

对鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的分离纯化进行了研究。工艺流程为:卵黄→8倍水稀释并搅拌10min→用HCl调pH至5.2后在4℃静置2h去沉淀→在上清夜中加入95%冰乙醇(-20℃)使终浓度为60%(v/v)→4℃搅拌20min后离心(22000r/min,4℃,25min)→收集沉淀并加入0.028mol/LNaCl溶液在4℃下过滤除去脂蛋白沉淀→收集的滤液用SDS-PAGE法进行纯化得纯度为98%的lgY。用大肠杆菌(E.coli)对其活性进行测定,效果良好,此方法能保持免疫球蛋白的活性。

鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响

目的观察鸡蛋卵黄免疫球蛋白IgY对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响。方法用鸡卵黄免疫球蛋白IgY经口灌胃,观察小鼠单核吞噬细胞碳粒廓清率和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬能力。结果鸡卵黄免疫球蛋白IgY具有提高小鼠单核吞噬细胞碳粒廓清率及增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬能力。结论鸡卵黄免疫球蛋白IgY能提高小鼠单核吞噬细胞吞噬功能,具有增强小鼠免疫功能的作用。

鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)分离、纯化方法研究进展

鸡卵黄免疫球蛋白 ( Ig Y)作为一种高产量高效的抗体 ,已被广泛应用于医学各个领域。近几年来 ,各国学者就如何提高 Ig Y的产量及纯度作了大量研究工作。

鸡卵黄免疫球蛋白-IgY对小鼠免疫功能的影响

目的观察鸡蛋卵黄免疫球蛋白-IgY对小鼠免疫功能的影响。方法鸡蛋卵黄免疫球蛋白-IgY经口灌胃,观察小鼠单核吞噬细胞碳粒廓清率和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡蛋红细胞的吞噬能力。结果鸡卵黄免疫球蛋白-IgY具有提高小鼠单核吞噬细胞碳粒廓清率及增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡蛋红细胞的吞噬能力。结论鸡卵黄免疫球蛋白-IgY能提高小鼠单核吞噬细胞吞噬功能,具有增强小鼠免疫功能的作用。

特异性鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)抗SARS-CoV作用的研究

制备了抗SARS CoVIgY ,探讨了该IgY中和SARS CoV的作用。灭活的SARS CoV免疫产蛋母鸡 ,水稀释法提取IgY。建立ELISA检测IgY结合SARS CoV的效价 ,采用病毒中和试验测定IgY的抗SARS CoV的作用。灭活SARS CoV免疫的母鸡可产生高效价的抗SARS CoVIgY ,该IgY中和SARS CoV的中和效价为 1∶5 12。因此 ,抗SARS CoVIgY可用于预防SARS CoV的感染及阻止SARS病毒的传播。

鸡卵黄免疫球蛋白的研究进展

用抗原免疫鸡，并从鸡卵黄中获取大量持异多克隆抗体IgY已越来越受到人们的重视。与哺乳动物抗体IgG相比，鸡IgY具有许多突出而重要的优点，这些优点使IgY可广泛应用于免疫检测、生化检测及口服防治某些疾病。近年来，人们对IgY的分子结构、功能及性质进行了深入研究，对IgY的分离、纯化方法作了许多探索，并在应用研究领域做了大量工作。

离子交换色谱法分离纯化鸡卵黄免疫球蛋白

建立了高效、经济、大规模获得鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的生产方法。在对传统的水稀释法改良的基础上,结合聚乙二醇沉淀与离子交换色谱进行IgY的分离纯化。结果显示,用8倍无菌水稀释蛋黄液,用0.1 mol/L HCl调节pH为5.2,在4℃下静置8 h,于5 000×g力离心可得上清粗IgY液,经测定回收率可达93.47%。然后用6%聚乙二醇沉淀后经DEAE-Toyopearl 650 M离子交换纯化,最佳的纯化条件:0.05 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7)平衡上样,0.075 mol/L PBS(pH 7)洗脱。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析结果显示所得的IgY的纯度为95.02%,活性保持率高达73.77%。本研究弥补了传统分离方法不能同时达到高纯度和高回收率的缺点,且可用于大规模生产。

低温乙醇除脂法纯化鸡卵黄中免疫球蛋白

采用低温乙醇除脂法提取鸡卵黄免疫球蛋白 (immunoglobulinyolk,IgY)。通过低温乙醇沉淀、透析和葡聚糖凝胶等不同方法逐步纯化免疫球蛋白。研究了卵黄稀释倍数、乙醇浓度、NaCl浓度以及离心转速对纯化效果的影响。分离纯化后所得的冷冻干燥制品 ,经SDS PAGE和抑菌试验检测可知 :可溶性蛋白质得率为每毫升蛋黄 1 2 6mg ,可溶性蛋白质含量占总蛋白质量的 97% 。

抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)卵黄免疫球蛋白(IgY)的制备与性质研究

目的观察鸡卵黄中抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)抗体的含量、纯度、来源及稳定性。方法用耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)作为抗原免疫Leghorn鸡;通过改良水稀释法提取卵黄中的IgY;双紫外光波长测定抗体含量,SDS-PAGE电泳检测抗体纯度;Western blot免疫印迹法测定该抗体来源;ELISA检测IgY对温度、酸碱度的稳定性。结果抗体含量13.3 mg/mL蛋黄液,抗体纯度达96%;免疫印迹证明IgY与鸡血清中的IgG具有相同的分子量和抗原性;IgY具有良好的热稳定性,对酸碱具有一定的耐受力。结论改良水稀释法能得到高产量、高纯度的特异性IgY,而且有良好的生物学活性。

抗加特纳杆菌卵黄免疫球蛋白(IgY)的研究

目的观察鸡卵黄中抗加特纳杆菌抗体的产量、纯度、来源及稳定性。方法用阴道加特纳杆菌作为抗原免疫Leghorn鸡。通过改良水稀释法提取卵黄中的IgY。双紫外光波长测定抗体含量 ,SDS -PAGE电泳检测抗体纯度。Westernblot免疫印迹法测定该抗体来源。ELISA检测IgY对温度、酸碱度的稳定性。结果抗体含量 12 .8mg/mL蛋黄液 ,抗体纯度达 95 %。免疫印迹证明IgY与鸡血清中的IgG具有相同的分子量和抗原性。IgY具有良好的热稳定性 ,对酸碱具有一定的耐受力。结论WD水稀释法能得到高产量、高纯度的特异性IgY 。

鸡卵黄抗IBD免疫球蛋白的提取与应用研究

对商品代蛋鸡进行强化免疫，获得抗鸡传染性法氏囊病琼扩效价为１∶１２８～２５６的高免卵黄原液。将免疫球蛋白海藻酸钠提取法与蛋白质中性盐盐析分离法合并起来，用于上述卵黄原液中免疫球蛋白Ｇ的提取。先后对三批各１０００ｍＬ卵黄原液进行了提取，分别获得９．８５，１１．８４和１１．９５ｇ冻干ＩｇＧ，平均为１０．８８ｇ。将提取的冻干ＩｇＧ用生理盐水按１∶１００比例（Ｗ／Ｖ）稀释配制成治疗用ＩｇＧ液，经测定其抗ＩＢＤ琼扩效价为１∶１２８。按０．２ｍＬ／只的剂量肌注治疗人工发病ＩＢＤ病鸡，治愈率为９３．３％，自然发病鸡的治愈率为９６．８％。

牛珀至宝丹和鸡卵黄免疫球蛋白对内毒素休克大鼠IL-1、IL-10的影响

目的 :观察牛珀至宝丹 (NPZBD)与鸡卵黄免疫球蛋白 (IgY)以及两药合用 (CNI)对内毒素休克大鼠IL - 1、IL - 1 0的影响 ,并探讨其机理。方法 :采用外源性内毒素休克模型 ,分组观测NPZBD、IgY、CNI对大鼠平均动脉压 (MAP)、IL - 1、IL - 1 0的影响。结果 :除假手术组外 ,其余各组血压都明显下降 ,而牛珀组、免鸡组、牛免组的血压下降幅度明显低于其他组 ;血清中IL - 1含量模型组、普鸡组相接近 ,均显著高于对照组 (P <0 0 1 ) ,其余各组较模型组均显著降低 (P <0 0 5～ 0 0 1 ) ,且接近对照组 ;血清中的IL - 1 0含量除对照组外 ,其余各组均显著上升 (P <0 0 5) ,但免鸡组、牛珀组、牛免组较模型组均明显降低 (P <0 0 5～ 0 0 1 )。结论 :IgY、NPZBD、CNI均能抑制内毒素所诱导IL - 1的生成 ,同时调节大鼠血清中的IL - 1 0水平 ,减轻内毒素对机体的损害 。

牛珀至宝丹合鸡卵黄免疫球蛋白抗内毒素休克的实验研究

为研究牛珀至宝丹 (主药 :水牛角、羚羊角、郁金、琥珀等 )合鸡卵黄免疫球蛋白抗内毒素休克的作用与机理 ,6 0只SD大鼠均分为 6组 :空白对照组 (A)、模型组 (B)、普通鸡卵黄对照组 (C)、鸡卵黄免疫球蛋白组 (D)、牛珀至宝丹组 (E)、牛珀至宝丹合鸡卵黄免疫球蛋白 (F)。除A组外 ,其余 5组大鼠均以粗制大肠杆菌内毒素制成内毒素休克 ,并应用相应药物 (B组以生理盐水代替 )。观察各组大鼠的血压与淋巴细胞亚群的变化。结果 :除A组外 ,其余 5组大鼠的血压均明显下降 ,但三个用药组下降的程度低于其他组。T细胞亚群中 ,CD3 各组间无明显差异 ;B、C组的CD4、CD8低于A组 ,而三个用药组均高于B组 ,并与A组接近 ;E、F组的CD4/CD8比值高于B组 ,并与A组接近。提示 ,调整淋巴细胞亚群含量和比值 ,可能是牛珀至宝丹、鸡卵黄免疫球蛋白抗内毒素休克的作用机理之一 。

鸡卵黄免疫球蛋白的提取及体外抑菌活性研究

本研究采用水稀释法脱脂、分步盐析法分离纯化对鸡卵黄免疫球蛋白进行了提取,结果表明,当卵黄作7倍无菌水稀释、pH值为5、4℃条件下温浴5 h时,可得到较纯的卵黄水溶性组分(W SF),再经过多步盐析,可获得纯度为68.4%的IgY,其回收率为82%。体外抑菌活性实验表明,提取的IgY对大肠杆菌具有明显的抑制作用,而对金黄色葡萄球菌抑制作用较弱。研究结果为IgY的分离提取及临床应用提供了参考数据。

鸡卵黄免疫球蛋白分离纯化方法的研究进展

鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)用于免疫学检测有许多优点,要求对IgY在去脂后进行纯化。作者在本文中就已建立的IgY分离纯化方法(离子交换色谱、疏水作用色谱、嗜硫色谱和亲和色谱等)作了综述。