HPLC法测定不同产地鸡屎藤叶中鸡屎藤苷、鸡屎藤苷酸含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定不同产地鸡屎藤叶中鸡屎藤苷、鸡屎藤苷酸含量。方法:采用HPLC法对13批鸡屎藤叶进行测定,色谱柱:Shim-pack GIST C18-AQ(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱,检测波长240 nm,流速1.0 m L/min,柱温30℃。结果:鸡屎藤苷和鸡屎藤苷酸在标准曲内线均有较好的线性关系(r^(2)>0.999 5),且该方法具有良好的精密度、灵敏度、重复性和准确度;同时测定了13批不同产地鸡屎藤叶中鸡屎藤苷、鸡屎藤苷酸的含量。结论:该方法快速、可靠,适用于鸡屎藤药材及其制剂的质量控制。

柞蚕丝绸的鸡屎藤苷酸染色性能

为开发具有良好染色性能的天然环烯醚萜类染料,增加蓝色天然染料的种类,选用鸡屎藤苷酸对柞蚕丝绸进行染色。利用UV-vis分析了染色过程,测试了染色柞蚕丝绸的色牢度、防紫外线性能和抗菌性能,并初步探讨了染色机理。结果表明:鸡屎藤苷酸质量分数为4%(omf),pH=5,染色温度45℃,保温时间2.0 h时,柞蚕丝绸染色效果最好,色牢度可达4级以上,经20次水洗后UPF值仍大于40,对大肠埃希菌、金黄葡萄球菌的抗菌率仍高于20%。

鸡屎藤苷酸与鸡屎藤苷酸甲酯二聚体对小鼠的镇痛作用研究

鸡屎藤具有明确的镇痛作用,鸡屎藤苷酸与鸡屎藤苷酸甲酯是最近被分离出来的两种活性成分。考察鸡屎藤苷酸(paederosidic acid)与鸡屎藤苷酸甲酯(paederosidic acid methyl ester)二聚体不同浓度下的镇痛作用,并初步探讨其作用机制。采用ICR小鼠,以小鼠福尔马林实验进行镇痛作用评价,以热板实验确定镇痛机制。福尔马林实验结果显示,鸡屎藤苷酸与鸡屎藤苷酸甲酯二聚体有镇痛效果。利用热板实验,确定鸡屎藤苷酸与鸡屎藤苷酸甲酯二聚体有中枢镇痛作用,40 mg/kg是镇痛的最大效应浓度。

鸡屎藤苷酸对IL-1β诱导关节软骨细胞炎症反应的影响

目的探讨鸡屎藤苷酸对IL-1β诱导关节软骨细胞炎症反应的影响。方法体外培养人关节软骨细胞CH8,经IL-1β(10 ng/mL)处理24 h,分别加入10、20、40、80μg/mL鸡屎藤苷酸处理24 h。MTT检测细胞增殖,ELISA检测NO水平;RT-PCR检测iNOS、MMP-3、MMP-13 mRNA表达;Western blot测定MMP-3、MMP-13、p-IκBα、IκBα、p-p65、p65蛋白表达。结果鸡屎藤苷酸(10~150μg/mL)可促进IL-β诱导的CH8细胞增殖(P<0.05)。鸡屎藤苷酸(10、20、40、80)抑制IL-1β诱导的CH8细胞MMP-3、MMP-13表达(P<0.05),降低NO水平(P<0.05),下调iNOS mRNA表达(P<0.05),抑制IL-1β诱导CH8细胞p-p65、p-IκBα表达上调(P<0.05)。结论苦鸡屎藤苷酸通过抑制人软骨细胞NF-κB信号通路抑制IL-1β诱导CH8细胞产生NO,以及抑制MMP-3、MMP-13、iNOS表达。

HPLC法测定白花蛇舌草中反式6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯的含量

目的:建立高效液相色谱法测定白花蛇舌草中反式6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯的含量。方法:分析柱为 DiamonsilODS(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(45:55),检测波长为310nm,流速为1.0mL·min^(-1),柱温25℃,进样量为20μL。结果:该法线性关系与回收率结果良好,精密度和重复性试验5次测定的 RSD 分别为0.63%和1.2%。结论:方法准确可靠,适用于白花蛇舌草中反式6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯的定量分析。

鸡屎藤苷酸诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡并抑制细胞恶性增殖和侵袭

目的:初步探索鸡屎藤苷酸(PA)诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡并抑制细胞恶性增殖和侵袭的可能机制。方法:选取SGC-7901胃癌细胞为研究对象,利用CCK-8法进行浓度梯度实验确定后续实验浓度,利用流式细胞术检测0、20、40、80μg/mL的PA处理后SGC-7901胃癌细胞凋亡率以及线粒体膜电位变化情况,BrdU法和Transwell小室实验SGC-7901胃癌细胞的增殖活性以及侵袭能力,qRT-PCR检测抑癌基因P53、P21的mRNA相对表达水平,Western Blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、c-Myc和转移相关蛋白VEGF、波形蛋白表达水平。结果:CCK-8梯度浓度试验发现PA浓度从40μg/mL开始对SGC-7901胃癌细胞活性产生了明显抑制作用(P<0.05),后续以20、40、80μg/mL为试验浓度;与0μg/mL的PA处理比较,40、80μg/mL的PA处理后SGC-7901胃癌细胞凋亡率、Bax/Bcl-2、Cleaved-Caspase-3/Caspase-3蛋白表达水平以及P53、P21相对表达量升高,线粒体膜电位、细胞增殖活性、侵袭率、c-Myc、VEGF、波形蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:PA可能通过降低线粒体膜电位促进线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡,促进抗癌基因表达抑制细胞的恶性增殖,并抑制上皮间质转化降低侵袭能力。

鸡屎藤苷酸对肝癌HepG2细胞炎症因子水平、生长、凋亡、侵袭和血管生成的影响

[目的]探讨鸡屎藤苷酸对肝癌细胞系炎症因子水平、生长、凋亡、侵袭和血管生成的影响。[方法]CCK8法检测肝癌细胞系的活力;流式检测细胞凋亡;ELISA检测相关炎症因子的含量;Western blot检测B细胞淋巴2(Bcl2)、Bcl2相关X(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase3)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、E-钙黏蛋白(E-cad)、波形蛋白(Vimentin)、纤维粘连蛋白(FN)、血管内皮生长因子(VEGF);Transwell检测细胞侵袭;内皮细胞成管实验检测肿瘤小管的形成。[结果]当鸡屎藤苷酸溶液的浓度小于20μg/mL时,对肝癌细胞系活力的抑制作用不具有明显差异;48 h当浓度大于40μg/mL时,对HepG2抑制作用明显(P<0.05),且呈剂量依赖性抑制;选择HepG2细胞处理48 h,鸡屎藤苷酸分成3个剂量组(0、20、40μg/mL),厄洛替尼(0.86 ng/mL)为阳性对照。与空白对照组相比,40μg/mL组的细胞凋亡率、抗炎因子水平(IL-10)、Bax/Bcl-2、Cleaved Caspase-3/Caspase-3和E-cad蛋白表达显著升高(P<0.05);促炎因子水平(IFN-γ、IL-6)、侵袭细胞数量及相关蛋白表达(FN)、小管形成数量及血管内皮生长因子表达显著降低(P<0.05)。[结论]鸡屎藤苷酸通过抗炎、抑制肝癌细胞HepG2生长、侵袭、肿瘤血管形成并促进其凋亡,缓解肝癌的发生发展。

鸡屎藤苷对牛奶蛋白纤维织物的染色

开发天然环烯醚萜类活性染料鸡屎藤苷代替部分有毒的合成染料,用于牛奶蛋白纤维织物染色。研究鸡屎藤苷在牛奶蛋白纤维织物上的染色性能,分析了呈色机理,测试了染色织物的色牢度和抗菌性。结果表明:鸡屎藤苷对牛奶蛋白纤维织物具有良好的染色性能,染色牢度可以达到3级以上,染色织物的抗菌性能较好,具有很好的应用前景。

HPLC同时测定白花蛇舌草有效部位中对香豆酸和反式6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯的含量

目的:建立白花蛇舌草有效部位中对香豆酸和反式6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱采用InertsilODS-3(250 mm×4.6 mm,5μm);检测波长为310 nm;进样量为10μL;流速为1.0 mL.min-1;柱温为30℃;以乙腈为流动相A,以0.05%甲酸水溶液为流动相B,进行梯度洗脱。结果:对香豆酸在0.003 33～0.099 9μg范围内成线性关系(r=0.999 9,n=5),平均回收率为99.21%(n=6);反式6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯在0.020 9～0.627μg范围内成线性关系(r=0.999 9,n=5),平均回收率为99.54%(n=6)。结论:本实验方法可靠,操作简便,重现性好,专属性强,可用于白花蛇舌草有效部位中对香豆酸和反式6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯的含量测定,以控制白花蛇舌草有效部位的质量。

HPLC法测定肠炎宁糖浆中鸡屎藤苷甲酯的含量

目的:建立高效液相色谱法测定肠炎宁糖浆中鸡屎藤苷甲酯的含量。方法:采用Agilent Eclipse XDB-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-水(13∶87),流速1.0mL.min-1,检测波长235nm。结果:鸡屎藤苷甲酯浓度在0.09～1.84mg·mL-1范围内,与峰面积呈良好线性关系;鸡屎藤苷甲酯平均回收率(n=6)为103.5%,RSD为1.9%。结论:本方法准确、简便,可用于测定肠炎宁糖浆中鸡屎藤苷甲酯的含量。

鸡屎藤次苷在大鼠体内的药动学研究

目的:测定大鼠血浆中鸡屎藤次苷的含量,并研究其在大鼠体内的药动学过程。方法:采用HPLC-UV法测定大鼠尾静脉注射给药后血浆中鸡屎藤次苷的血药浓度。色谱条件为:DiamonsilTM C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-乙腈-0.1%冰醋酸(3∶2∶95,v/v/v),流速:1.0 mL.min-1,检测波长:230 nm。通过BAPP2.0软件求算其药动学参数。结果:鸡屎藤次苷血浆浓度在0.2～40μg.mL-1(Y=0.07321X-0.00939,r=0.9940)范围内线性关系良好。日内精密度不大于7.1%,日间精密度不大于13.5%,准确度RE值在-4.5%～1.8%之间。鸡屎藤次苷提取回收率为64.5%～73.1%,内标物提取回收率为74.5%。主要药动学参数为t1/2=(33.5±4.39)min,AUC0-180min=(922±129)μg.min.mL-1。结论:该法专属、准确、灵敏,适用于鸡屎藤次苷在大鼠体内的药动学研究,为进一步研究鸡屎藤次苷体内药动学行为提供了依据。

猪殃殃中环烯醚萜苷和蒽醌苷类化学成分的研究

采用硅胶、反相硅胶和凝胶柱色谱进行分离、纯化，研究茜草科植物猪殃殃全草甲醇洗脱部位的化学成分。化合物经质谱和核磁等波谱分析方法确定结构得到8个化合物，分别为6-O-乙酰鸡屎藤次苷（1），6α-羟基京尼平苷（2），京尼平苷酸（3），6β-羟基京尼平苷（4），交让木苷（5），6α-甲氧基京尼平苷酸（6），去乙酰基车叶草苷酸（7），光泽汀-3-O-葡萄糖苷（8）。化合物1—6为首次从拉拉藤中分离得到，其中化合物4，6是从该属中首次分到。

鸡屎藤中2个新的环烯醚萜苷

文献报道，鸡屎藤(Paederia scandens)含有含硫的环烯醚萜苷类成分鸡屎藤甘。在对其化学成分的进一步研究中，从地上部分分离得到1个新的环烯醚萜苷和1个新的二聚环烯醚萜苷，并得到2个已知化合物鸡屎藤苷和鸡屎滕次苷甲酯。

HPLC法测定白花蛇舌草注射液中去乙酰基车叶草苷酸和鸡屎藤次苷

目的建立白花蛇舌草注射液中去乙酰基车叶草苷酸和鸡屎藤次苷的测定方法。方法采用HPLC法测定,色谱柱为Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.1%冰醋酸(3∶2∶95),检测波长230nm,体积流量1.0mL/min。结果去乙酰基车叶草苷酸和鸡屎藤次苷的浓度分别在7.50～90.0μg/mL(r=0.9997)和6.00～72.0μg/mL(r=0.9999)线性关系良好;平均加样回收率分别为98.1%、99.0%,RSD分别为1.2%、1.1%。结论本法快速、简便、准确,可用于同时测定白花蛇舌草注射液中上述两种环烯醚萜类成分。

应用UPLC-Orbitrap质谱分析鸡屎藤次苷甲酯在4个种属肝微粒体中代谢差异性研究

鸡屎藤次苷甲酯是中药栀子中含量较高的环稀醚萜类成分之一,目前对其在肝微粒中的代谢研究较少。为更好的阐明鸡屎藤次苷甲酯在不同种属肝微粒体中的代谢差异,本研究应用超高效液相色谱串联高分辨静电场轨道阱质谱技术(UPLC-Oribitrap MS/MS),结合鸡屎藤次苷甲酯的电喷雾电离源质谱裂解规律,快速鉴定并比较了鸡屎藤次苷甲酯在大鼠、比格犬、恒河猴和人4种肝微粒体中的代谢产物及主要代谢产物的生成比例差异。通过代谢产物的一级及二级碎片的精确分子量信息,共鉴定出5个代谢产物。结果显示,鸡屎藤次苷甲酯在肝微粒体中的主要代谢途径为水解、氧化和还原反应,且种属间存在一定的差异性,该研究为进一步阐明环稀醚萜类成分的体内代谢途径提供了研究基础。

HPLC法同时测定白花蛇舌草注射液中2种成分的含量

目的:建立反相高效液相色谱法同时测定白花蛇舌草注射液中对香豆酸(Ⅰ)和反式6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯(Ⅱ)的含量。方法:色谱柱为 Hypersil C_8柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水(20:80,v/v),含0.3%醋酸;流速为1.0 mL·min^(-1);检测波长为310 nm。结果:Ⅰ和Ⅱ的浓度分别在14.4～115.2μg·mL^(-1)(r=0.9999)和5.2～41.4μg·mL^(-1)(r=0.9999)范围内线性关系良好;方法回收率分别为99.9%(RSD=1.5%,n=6)和99.8%(RSD=1.8%,n=6)。结论:本法准确可靠,可用于白花蛇舌草注射液的质量控制。

白花蛇舌草2种主要香豆酸类化学成分的含量测定

目的建立同时测定白花蛇舌草中(E)-6-0-P-香豆酰鸡屎藤苷甲酯和香豆酸的方法。方法采用反相高效液相色谱法,Kromasil ODS柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.1%冰醋酸梯度洗脱(0 min,20∶80;30 min,30∶70;35 min,60∶40)。检测波长:303 nm,柱温30℃,流速1 mL.min-1。结果白花蛇舌草中(E)-6-0-P-香豆酰鸡屎藤苷甲酯和香豆酸在该条件下有较好的线性关系,当提取溶剂不同时,两者的提取率有较大差异。结论测定方法简便、准确,为白花蛇舌草质量控制提供了可靠的依据;不同提取溶剂试验研究对确立白花蛇舌草最佳提取工艺有一定的参考价值。

反相HPLC同时测定白花蛇舌草口服液中4种组分含量

目的：建立反相HPLC同时测定白花蛇舌草口服液中3，4-二羟基苯甲酸甲酯（Ⅰ）、对香豆酸（Ⅱ）、阿魏酸（Ⅲ）和反式6-0-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯（Ⅳ）的含量。方法：采用Diamonsil^TM C18柱（4．6mm×250mm，5μm）；流动相A乙腈，B甲醇-水-冰醋酸（5：95：0.25），梯度洗脱：0～20min，1％～16％A；20～42min，16％A；42～46min，16％～20％A；46～65min，20％A。检测波长265nm；流速1．0mL·min^-1。结果：Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ与Ⅳ分别在2．1～105（r=0．9998），3．5～175（r=0．9998），1．72～86（r=0．9999），4．0～200mg·L^-1（r=1．0000）线性关系良好，方法平均回收率分别为99．9％，97．9％，98．6％，98．1％。结论：方法简便快速、准确度高，可用于白花蛇舌草口服液中4种组分的同时测定。

基于UPLC-MS的白花蛇舌草化学成分大鼠体内代谢产物研究

目的：分析大鼠灌胃白花蛇舌草环烯醚萜类提取物后尿液中的E-6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯（M0）及其代谢产物.方法：健康雄性Wistar大鼠按60 mg/kg的剂量灌胃给予白花蛇舌草环烯醚萜类提取物,收集给药后0～8h尿液并制备样品,采用UPLC-Q-TOF-MS技术分析代谢产物.结果：在大鼠尿液中检测到M0（原药E-6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯）,M1（E-6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯葡萄糖醛酸化产物）,M2（对香豆酸）,M3（对香豆酸硫酸化产物）,其中M1和M3均为首次发现.结论：M0在大鼠体内以葡萄糖醛酸形式代谢,最终以对香豆酸及对香豆酸硫酸化产物排出体外.

乌饭树叶的化学成分研究

目的:研究乌饭树叶的化学成分。方法:运用多种色谱技术对乌饭树叶的化学成分进行系统性研究,采用波谱技术和理化性质确定了化合物的结构。结果:分离得到12个化合物,分别鉴定为柯伊利素(1),东莨菪亭(2),对羟基肉桂酸(3),对羟基肉桂酸乙酯(4),咖啡酸乙酯(5),β-谷甾醇(6),木犀草素(7),槲皮素(8),七叶亭(9),咖啡酸(10),异落叶松脂素-9-O--βD-木糖苷(11),10-O-对羟基肉桂酰-鸡屎藤次苷(12)。结论:其中化合物4,5,11,12为首次从越橘属植物中分离得到,化合物1,2,9,10为首次从该植物中分离得到。