生物被膜对鸡源肠外致病性大肠埃希氏菌耐药表型的影响

探讨鸡源肠外致病性大肠埃希氏菌(ExPEC)生物被膜(BF)形成能力及BF与耐药性之间的相关性,采用96孔微量板法和正交试验测定10株鸡源ExPEC的BF形成能力和BF强阳性菌株的最佳成膜条件,使用二倍倍比稀释法测定β-内酰胺类抗生素对生物被膜态与浮游态鸡源ExPEC的最小抑菌浓度(MIC)。结果显示,10株鸡源ExPEC的BF阳性率为90%,E-26、E-28、E-43为弱阳性菌株(+);E-27、E-30、E-42为中等阳性菌株(++),E-39、E-40、E-41为强阳性菌株(+++),E-20为阴性菌株;3株强阳性菌株BF最佳成膜条件不相同;3株BF强阳性鸡源ExPEC的BF形成后,对β-内酰胺类抗生素耐药性有不同程度增加,同种抗生素对不同菌株的MIC变化可能不同,不同抗生素对同一菌株变化也不同。因此,鸡源ExPEC的BF阳性率较高,但各菌株形成BF的能力存在差异,不同菌株形成BF所需的条件不完全相同,BF形成会使鸡源ExPEC对抗生素的耐药水平增强,但同为BF阳性鸡源ExPEC,形成BF后β-内酰胺类抗生素耐药水平变化存在差异。

中药对鸡致病性大肠埃希菌的体外抑菌试验

为研究25种中药对秦皇岛地区鸡致病性大肠埃希菌(Escherichia coli)地方流行株QH1(O78)、QH2(O89)、QH4(O1)的体外抑菌效果,以E.coli标准株ATCC25922作为质控菌株。利用水提法制备中药药液,使终浓度为1g/mL;用平板琼脂打孔法和改良微量二倍稀释-平板法分别测定25种中药的抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,金银花、黄连、乌梅、五味子4种中药对鸡致病性E.coli地方株极度敏感,抑菌圈直径在20.3mm^22.7mm之间,其MIC在15.65mg/mL^31.25mg/mL之间;其他药物对鸡致病性E.coli地方株有不同程度的敏感性,为鸡致病性E.coli地方株中药防治提供理论基础。

猪源肠外致病性大肠埃希氏菌的分离鉴定与药敏试验

为对陕西某猪场仔猪肺炎病例进行确诊,无菌采集患病仔猪肺脏,并进行细菌分离培养、生化试验、16S rRNA基因测序、小鼠致病性试验、药敏试验以及耐药基因检测。结果表明,分离到的菌株其培养特性和生化试验与大肠埃希氏菌一致,16S rRNA基因测序与大肠埃希氏菌的同源性为98%;小鼠致病性试验验证了该菌株的致病性;药敏试验显示该菌对氨苄西林、复方阿莫西林、庆大霉素、四环素、头孢噻呋钠、头孢他啶、恩诺沙星、氟苯尼考和磺胺异恶唑等9种抗菌药物表现耐药,对替加环素、美罗培南和多黏菌素B敏感;耐药基因检测结果发现该菌携带sul3、tetA和TEM等耐药基因。研究结果确定了引起某猪场仔猪肺炎的病原菌,并对其生物学特性、耐药情况进行了研究,为临床诊断治疗提供参考。

肠外致病性大肠埃希菌多重耐药性及氨基糖苷类耐药基因分析

目的检测临床分离猪、鸡源肠外致病性大肠埃希菌的耐药性,分析其携带的氨基糖苷类耐药基因,以指导临床用药,探究细菌对氨基糖苷类抗生素的抗性机制。方法应用K-B法测定分离株对19种常用抗生素的耐药情况。用双纸片法检测产ESBLs菌株并进行基因分型。用PCR和测序方法检测氨基糖苷类抗性基因aadA1,aadA2,strA-strB,aadB,aacC2,aac(3)-IV,aph(3′)-Ia,aph(3′)-IIa。结果临床分离株表现多重耐药性,对头孢菌素类药物和阿米卡星的敏感性最高(63%～97%),93%的菌株耐药谱值≥10。共检测到两株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株,基因型属TEM-1+CTX-M-14。耐药菌株与相应的氨基糖苷类耐药基因符合率高(≥74%)且序列保守。结论猪、鸡源肠外致病性大肠埃希菌呈多重耐药性,其对氨基糖苷类抗生素的抗性机制以产生针对该类抗生素的修饰酶为主。

肠外致病性大肠埃希菌毒力与耐药的相关性分析

目的:通过检测不同来源肠外致病性大肠埃希菌(ExPEC)多种毒力因子基因检出情况及耐药情况,初步探讨两者相关性,了解Ex PEC毒力与耐药相互关系。方法:187株分离自尿液及其他部位的菌株,分别检测其毒力因子基因的存在情况及耐药情况,χ~2检验比较不同来源菌株毒力因子基因检出率及耐药率有否差异,Logistic回归模型分析菌株毒力因子检出率与菌株耐药率相关性。结果:ExPEC中毒力基因kpsMT Ⅱ、pap C、PapEF、papG allele II(Internal)、papA、cnf1、sfa/focDE、K5和rfc在非尿液来源比尿液来源检出率更高;尿液来源环丙沙星、左旋氧氟沙星和哌拉西林/他唑巴坦的耐药情况均显著高于非尿液来源菌株;Logistic回归模型分析表明共有11种毒力基因与其相对应的抗菌药物耐药有相关性,其中9种毒力基因抑制菌株耐药发生,1种毒力基因促进菌株耐药发生,另有1种毒力基因在不同药物中有相反作用。结论:ExPEC由于受到环境与抗菌药物的选择压力不同,其毒力因子检出情况及耐药情况也会有差异,ExPEC毒力因子与菌株耐药情况关系密切。

肠外致病性大肠埃希菌毒力因子研究进展

近年来,在人类饲养的伴侣宠物、猪、牛、羊、家禽以及林麝等动物体内均已分离到一种能够引发肠外组织感染的大肠埃希菌--肠外致病性大肠埃希菌(extraintestinal pathogenic Escherichia coli,ExPEC)。ExPEC所具有的毒力特征使其能够在消化道以外的组织脏器中定殖增殖,在临床上能引起人和动物的严重感染甚至导致死亡。由于ExPEC导致的疾病存在治疗困难且易复发的特点,给医疗事业和畜牧业造成了巨大的经济损失。ExPEC较强的致病性与其携带的众多毒力因子密不可分。论文就已发现的ExPEC主要毒力因子研究进展进行分类阐述,并介绍了不同毒力因子在ExPEC感染宿主过程中的致病机制。

鸡源大肠埃希菌质粒介导的喹诺酮耐药基因的检测与分析

为了解安徽省合肥地区鸡源致病性大肠埃希菌对氟喹诺酮类药物(fluoroquinolones,FQs)的耐药性及质粒介导的喹诺酮耐药基因(plasmid-mediated quinolone resistance,PMQR)的流行情况,对从合肥地区多个规模化养鸡场病鸡病料中分离保存的37株疑似大肠埃希菌进行细菌分离培养、生化编码鉴定和致病性测定。利用K-B纸片琼脂扩散法检测鸡源致病性大肠埃希菌对4种FQs的耐药性,设计并合成4对特异性引物通过菌液PCR法对所分离细菌进行PMQR基因(qnrA、qnrB、qnrS、qepA)扩增。结果显示,所检测的37份疑似病料均为致病性大肠埃希菌;37株大肠埃希菌中对FQs呈3耐以上(包括3耐)菌株占67.57%(25/37);37株大肠埃希菌中检测到qnrA基因,检出率为56.77%(21/37),而qnrB、qnrS、qepA基因均未检出。提示合肥地区鸡源致病性大肠埃希菌对FQs耐药性严重,PMQR基因以qnrA基因为主,且qnrA基因的流行与FQs耐药性具有相关性。

临沂市鸡源致病性大肠杆菌的优势血清型监测

禽大肠杆菌病是由致病性大肠埃希氏菌引起的不同类型疾病的总称,包括脐炎、败血症、肉芽肿、卵黄性腹膜炎、气囊炎、肝周炎、肺炎、全眼球炎等一系列疾病,它是家禽中最常见的一类细菌性疾病,给养禽业造成严重的经济损失.由于禽源性大肠杆菌的血清型众多,耐药性广泛,小区域之间也存在较大差异,为了能准确的防治禽大肠杆菌病,应在尽可能小的区域内对其进行病原血清型调查,为此对临沂市三区九县范围内的禽大肠杆菌病进行了血清学调查,查清本地的主要流行菌株,为疫苗研制和选用提供理论依据.

零售食品中耐药性和肠外致病性大肠埃希菌的检测

美国有数百万泌尿道感染（UTI）是由大肠埃希菌（简称大肠杆菌）所致的肠外感染。由于肠外致病性大肠杆菌株（ExPEC）的耐药，其治疗变得更加困难，这种特殊的大肠杆菌还可产生导致肠外感染的特殊毒力因子（VF）。

2011年我国部分地区鸡源大肠杆菌耐药性分析

鸡大肠杆菌病是指部分或全部由鸡致病性大肠埃希氏菌所引起的局部或全身性感染的疾病,其抗原性复杂,血清型多样,临床症状和病理变化多变。上世纪80年代以来,随着我国养鸡业集约化程度的不断提高,鸡大肠杆菌病不断在我国各地蔓延和扩散,全国大部分省、市、自治区皆有报道。鸡大肠杆菌病除引起鸡死亡造成的直接损失外,还能导致饲料利用率、

贵阳市部分地区食品中大肠埃希菌污染调查

大肠埃希菌（escherichia coli,E.coli）是一类在自然界中广泛存在的微生物,也是食源性疾病的主要病原菌之一。大肠埃希菌所致食品安全事件中,患者以腹泻为主要临床表现,这些引起肠道内疾病的大肠埃希菌分为肠致病性大肠埃希菌（EPEC）、肠出血性大肠埃希菌（EHEC）、肠毒素性大肠埃希菌（ETEC）、肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）、肠凝集性大肠埃希菌（EAEC）五类。

自一起食物中毒患者粪便中检出致病性大肠杆菌O_（44）∶K_（74）（L）型

自一起食物中毒患者粪便中检出致病性大肠杆菌Ｏ_（４４）∶Ｋ_（７４）（Ｌ）型荆成宝（陕西安康地区医院微生物室７２５０００）１９９３年１１月，我室从一起因食用变质的卤鸡爪引起的食物中毒患者粪便中，分离出致病性大肠杆菌Ｏ４４：Ｋ７４（Ｌ）型。７例患者均系一...

猪源肠外致病性大肠埃希氏菌的生物膜形成能力及耐药性

[背景]猪源肠外致病性大肠埃希氏菌(extraintestinal pathogenic Escherichia coli,ExPEc)是一种严重危害养猪业的病原菌,有关其生物膜形成能力与耐药性的研究报道很少。[目的]探讨从病猪肺脏中分离鉴定的3株ExPEc的生物膜形成能力及耐药性,为从抗生物膜形成角度防治猪肠外大肠埃希氏菌病提供参考。[方法]采用96孔板结晶紫染色法结合正交实验优化猪源ExPEc分离株的生物膜形成最佳条件与成膜能力;通过扫描电镜观察各菌株生物膜的形态结构;利用PCR方法检测其携带的生物膜形成相关基因;采用微量肉汤稀释法测定抗生素对生物膜态与浮游态下猪源ExPEc分离株的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。[结果]3株猪源ExPEc的最佳成膜条件并不一致,但在各自最佳条件下均能形成很强的生物被膜且同时携带10个生物膜形成相关基因(pgaA,pgaB,pgaC,pgaD,luxS,fimA,hipA,iha,flhC,flhD)。扫描电镜观察显示,菌株SE-1聚集后可形成片状生物膜,菌株SE-2和SE-3聚集后可形成多层结构的生物膜,且聚集体间有明显空隙。部分受试抗菌药物对生物膜态SE-1、SE-2和SE-3菌株的MIC值较对应浮游菌提高了2-32倍,药物敏感性由原来的敏感转为中敏或耐药。[结论]实验结果为从抗生物膜形成角度防治猪肠外大肠埃希氏菌病奠定了基础。

产新德里金属β-内酰胺酶肠外致病性大肠埃希菌的分子分型

目的对产新德里金属β-内酰胺酶(NDM)的肠外致病性大肠埃希菌(ExPEC)进行多位点序列分型(MLST)和系统发育分群研究。方法收集2016年2月至2018年2月分离自武汉大学人民医院临床送检标本中对亚胺培南和(或)美罗培南敏感性降低(MIC≥2μg/ml)的ExPEC菌株。改良Hodge试验(MHT)对碳青霉烯酶进行表型确证。PCR检测碳青霉烯酶编码基因blaNDM。Sanger测序法检测各碳青霉烯酶基因亚型。采用MLST分型和系统发育分群对PCR检测出的产NDM ExPEC菌株的分子流行病学特征进行分析。结果共收集到对碳青霉烯类抗菌药物敏感性降低的ExPEC菌株20株,其中产NDMExPEC菌株15株。MHT检测产NDMExPEC菌株的敏感度和特异度分别为93.3%(14/15)和80.0%(12/15)。15株产NDM ExPEC菌株中11株(73.3%)产NDM-5型,4株(26.7%)产NDM-1型。系统发育分群结果显示,15株产NDM ExPEC菌株中,13株属于A群,2株属于D群。MLST分型结果显示,ST410是产NDM ExPEC菌株中检出率最高的ST型(5株,33.3%)。结论本院绝大多数产NDM ExPEC菌株属于毒力较小的系统发育群,应加强院感监测,防止高危克隆ST型的暴发流行。

肠侵袭性大肠埃希菌O抗原多糖的致病作用

目的研究肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)O抗原多糖(OPS)的特异性致病作用。方法提取并纯化大肠埃希菌O29———EIEC的脂多糖(LPS)亚单位分子———OPS进行体内外试验,观察其毒性作用并与LPS作对比。结果EIECOPS可引起HeLa细胞病变;致兔回肠袢肠黏膜出血,但不引起肠腔积液;电镜观察OPS致病变的HeLa细胞,明显可见细胞的超微病理损害。结论EIECOPS有特异的致病作用,与其LPS的内毒素作用不同;大肠埃希菌O29(致病菌株)OPS毒性作用比大肠埃希菌HB101(非致病菌株)OPS毒性强烈。

不同遗传谱系肠外大肠埃希菌毒力因子检测

目的通过检测肠外致病性大肠埃希菌（ExPEC）30种毒力因子了解其基因的检出情况及遗传谱系分型情况，并初步探讨两者关系，探究ExPEC的分子流行病学特点。方法210株分离自血液、尿液及其他部位的菌株参与研究，采用多重PCR方法检测临床分离菌株毒力因子基因的存在情况并进行遗传谱系分型，比较菌株遗传谱系分型各组间毒力因子基因的检出情况是否有差异。结果ExPEC中毒力基因fimH,fyuA、traT、iutA、kpsMTⅡ、PAI，的检出率较高；遗传谱系分型表明4组百分比分别为24％、11％、29％和36％。在各组之间进行毒力因子基因检出情况比较显示，毒力因子中有8种仅与B2组联系密切，4种仅与D组联系密切，6种与B2组和D组均有关。结论ExPEC遗传潜系分型主要属于B2组和D组，ExPEC毒力因子基因检出情况与菌株遗传谱系分型关系密切。

食源性疾病所致持续性危害的新观察

本文中的两项研究根据不同的发现对重要的食源性疾病所造成的威胁进行了探讨。对潜在的食源性埃希氏大肠杆菌(Escherichia coli)所致的许多肠外疾病通常都没有得到充分的认识。Johnson等人提供的大量资料提示，抗生素耐药的大肠杆菌和肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)是一类被重新认识的食源性致病菌。Helms等人描述了由食物所致的抗生素耐药弯曲菌株感染对健康更有害。

复合型菌剂对鸡白痢菌的抑制作用及其各菌在鸡体内定居情况

利用由鸡粪肠球菌、鸡非致病性大肠埃希菌、芽胞杆菌、酵母菌和乳酸菌组成的复合菌剂在体外与鸡白痢沙菌门作用 ,结果表明 ,鸡白痢沙门菌生长明显受到抑制 ,抑制率达 90 %以上。并且还测定其各菌的有关生物特性以及雏鸡体内的定居情况 :胆盐耐受范围在 1 2 %～ 1 4%之间 ;苯酚耐受范围在0 1 %～ 0 2 %之间 ;耐酸范围在pH3 0～ 2 5之间 ;在雏鸡体内除芽胞杆菌为过路菌外 ,其他菌均可定居于盲肠、中肠、肌胃。

产NDM ExPEC毒力与其耐药性和分子分型的关系研究

目的对产新德里金属β-内酰胺酶(NDM)肠外致病性大肠埃希菌(ExPEC)菌株进行分子分型,研究产NDM ExPEC毒力与其对碳青霉烯类抗菌药物的耐药性和分子分型之间的关系。方法选取分离自该院的15株产NDM ExPEC菌株(实验组)和28株不产NDM ExPEC菌株(对照组)作为研究对象,对产NDM ExPEC菌株进行系统发育分群和多位点序列分型(MLST)研究,PCR方法检测7种毒力基因在这两组菌株中的分布,χ2检验比较分布差异。结果系统发育分群结果显示,15株产NDM ExPEC菌株中,13株属于A群,2株属于D群;MLST分型结果显示,ST410是检出率最高的ST型;实验组毒力基因fimH检出率最高;对照组毒力基因sat、fyuA和ompT检出率高于实验组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论该院绝大多数产NDM ExPEC菌株的毒力较弱,表明细菌耐药性强并不意味着其致病性也强。