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鸡白细胞介素18成熟蛋白全长基因的克隆与序列测定 被引量:8
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作者 胡敬东 崔治中 +2 位作者 范伟兴 刘文强 赵宏坤 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期119-121,共3页
根据已发表的鸡白细胞介素 18(IL- 18)成熟蛋白的 c DNA序列 ,设计 1对特异性引物 ,应用 RT- PCR从脂多糖(L PS)刺激 10 h活化的 MDCC- MSB1细胞中克隆到编码鸡 IL - 18成熟活性蛋白的完整基因片段 ,其大小为 5 10 bp。经序列测定证实 ... 根据已发表的鸡白细胞介素 18(IL- 18)成熟蛋白的 c DNA序列 ,设计 1对特异性引物 ,应用 RT- PCR从脂多糖(L PS)刺激 10 h活化的 MDCC- MSB1细胞中克隆到编码鸡 IL - 18成熟活性蛋白的完整基因片段 ,其大小为 5 10 bp。经序列测定证实 ,所获得的 c DNA基因序列与文献报道的结果完全一致 ,从而为进一步研究鸡 IL- 18的基因表达、生物学活性以及应用奠定了基础。 展开更多
关键词 白细胞介素18 基因 克隆 序列测定
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海兰鸡白细胞介素18成熟蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量:4
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作者 赵丽 崔保安 +3 位作者 陈红英 宋凌云 方忠意 郑兰兰 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期88-91,共4页
通过RT-PCR方法从用植物血凝素(PHA)活化60日龄海兰鸡的脾脏淋巴细胞中扩增出海兰鸡白细胞介素18(IL-18)成熟蛋白基因的cDNA,并将其克隆到pGEM-T Easy Vector载体上,DNA序列测定表明,克隆得到的海兰鸡ChIL-18 cDNA基因全序列包括终止密... 通过RT-PCR方法从用植物血凝素(PHA)活化60日龄海兰鸡的脾脏淋巴细胞中扩增出海兰鸡白细胞介素18(IL-18)成熟蛋白基因的cDNA,并将其克隆到pGEM-T Easy Vector载体上,DNA序列测定表明,克隆得到的海兰鸡ChIL-18 cDNA基因全序列包括终止密码子在内其编码区大小为510 bp,编码169个氨基酸多肽.将该基因片段克隆到原核表达载体pQE30构建重组质粒pQE30-ChIL-18,转化大肠杆菌M15,并用IPTG诱导.重组菌菌体裂解物SDS-PAGE可检测到相对分子质量为19 000的重组蛋白. 展开更多
关键词 白细胞介素18 成熟蛋白 克隆 原核表达
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鸡白细胞介素18成熟蛋白在昆虫细胞/杆状病毒系统中的表达 被引量:2
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作者 韩宗玺 刘胜旺 +1 位作者 孔宪刚 冉多良 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第4期59-62,共4页
将编码鸡的白细胞介素 1 8(chickeninterleukine 1 8,ChIL 1 8)成熟蛋白的基因亚克隆到杆状病毒转移载体pMelBacB上 ,构建真核转移载体pMelBacBChIL 1 8,经限制性内切酶消化、ChIL 1 8特异引物PCR鉴定和确证性序列测定 ,证明目的基因正... 将编码鸡的白细胞介素 1 8(chickeninterleukine 1 8,ChIL 1 8)成熟蛋白的基因亚克隆到杆状病毒转移载体pMelBacB上 ,构建真核转移载体pMelBacBChIL 1 8,经限制性内切酶消化、ChIL 1 8特异引物PCR鉴定和确证性序列测定 ,证明目的基因正确克隆到载体的预期位点。将纯化的pMelBacBChIL 1 8质粒与杆状病毒DNA(Bac N BlueTM DNA)共转染sf9昆虫细胞 ,经四轮蓝斑筛选纯化 ,获得了重组杆状病毒 ,命名为rBaculovirusChIL 1 8。提取病毒染色体DNA ,经ChIL 1 8特异引物和重组杆状病毒特异引物PCR鉴定 ,证明获得了纯化的重组杆状病毒。用该重组病毒接种sf9昆虫细胞 ,收获接种后不同时间的细胞进行SDS PAGE电泳。结果表明ChIL 1 8基因在昆虫细胞中获得了表达 ,表达的重组蛋白分子量约为 2 3kDa。应用在大肠杆菌原核表达系统中表达的重组蛋白制备的兔抗ChIL 1 8多克隆抗体进行Westernblot分析 ,表明本研究真核系统表达的ChIL 1 8成熟蛋白和前期原核系统表达的ChIL 1 8成熟蛋白均具有生物学活性。 展开更多
关键词 ChIL-18 白细胞介素18 成熟蛋白 昆虫细胞/杆状病毒系统 表达 生物学活性
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鸡白细胞介素18成熟蛋白的原核表达及抗体间接ELISA方法的建立
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作者 苏倩倩 李恩扩 +2 位作者 张海滨 周霞 胡敬东 《山东农业科学》 2012年第4期5-9,共5页
将鸡白细胞介素18的成熟蛋白(chicken interleukin 18 mature protein,mChIL-18)基因在原核系统表达,采用Ni-NTA亲和层析方法纯化得到该重组蛋白。纯化后重组蛋白包被反应板,通过方阵滴定确定最佳抗原包被浓度、血清稀释倍数、羊抗鼠酶... 将鸡白细胞介素18的成熟蛋白(chicken interleukin 18 mature protein,mChIL-18)基因在原核系统表达,采用Ni-NTA亲和层析方法纯化得到该重组蛋白。纯化后重组蛋白包被反应板,通过方阵滴定确定最佳抗原包被浓度、血清稀释倍数、羊抗鼠酶标二抗稀释倍数,建立检测ChIL-18成熟蛋白抗体的间接ELISA方法。经方阵滴定结果确定最佳抗原包被质量浓度为4μg/ml,阳性血清稀释比例为1∶104,羊抗鼠IgG辣根过氧化物酶结合物最佳稀释比例为1∶12 000,抗原抗体最佳结合时间是1.5 h,血清与二抗最适反应时间为1 h。阴性、阳性血清的判定标准为:被检样本的OD值是一组阴性样本OD值的2或3倍且OD450≥0.5,即为阳性,比值以P/N表示1,.5<P/N<2.0为可疑,P/N<1.5为阴性。本试验结果证明该方法具有良好的稳定性、重复性和特异性,为下一步单抗的筛选鉴定奠定了必要的基础。 展开更多
关键词 白细胞介素 18成熟蛋白(mChIL-18) 原核表达 蛋白纯化 间接ELISA
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鸡白细胞介素18成熟蛋白的原核表达及抗体间接ELISA方法的建立
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作者 苏倩倩 李恩扩 张海滨 《中国畜牧兽医文摘》 2013年第3期103-103,共1页
将鸡白细胞介素18的成熟蛋白(chickeninterleukin18matureprotein,mChIL-18)基因在原核系统表达,采用Ni~NTA亲和层析方法纯化得到该重组蛋白。纯化后重组蛋白包被反应板,通过方阵滴定确定最佳抗原包被浓度、血清稀释倍数、羊抗鼠... 将鸡白细胞介素18的成熟蛋白(chickeninterleukin18matureprotein,mChIL-18)基因在原核系统表达,采用Ni~NTA亲和层析方法纯化得到该重组蛋白。纯化后重组蛋白包被反应板,通过方阵滴定确定最佳抗原包被浓度、血清稀释倍数、羊抗鼠酶标二抗稀释倍数, 展开更多
关键词 白细胞介素18 间接ELISA方法 原核表达 成熟蛋白 抗体 重组蛋白 稀释倍数 亲和层析
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外周血核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3/白细胞介素-1β、白细胞介素-18通路与重症肺炎支原体肺炎患儿预后关系及应用价值
6
作者 葛宾 崔慧贤 +3 位作者 梁坤 赵静维 邸翔 李淑娟 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第12期1658-1662,共5页
目的:探讨外周血核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)通路与儿童重症肺炎支原体肺炎(SMPP)预后的关系及应用价值。方法:前瞻性选取SMPP患儿113例,根据30 d预后分为预后良好组(81例... 目的:探讨外周血核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)通路与儿童重症肺炎支原体肺炎(SMPP)预后的关系及应用价值。方法:前瞻性选取SMPP患儿113例,根据30 d预后分为预后良好组(81例)与预后不良组(32例),比较两组一般资料及外周血NLRP3、IL-1β、IL-18水平。Pearson法分析外周血NLRP3、IL-1β、IL-18与急性生理与慢性健康评价系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分的关系;Logistic回归分析SMMP患儿预后不良的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线评价外周血NLRP3、IL-1β、IL-18对SMMP患儿预后的预测价值。结果:预后不良组患儿发病至入院时间>3 d比例、胸腔积液比例、APACHEⅡ评分以及外周血NLRP3、IL-1β、IL-18水平高于预后良好组(均P<0.05)。外周血NLRP3、IL-1β、IL-18水平与APACHEⅡ评分呈正相关(均P<0.05)。外周血NLRP3、IL-1β、IL-18预测SMPP患儿预后的最佳截断值分别为738.62、68.44、269.27 pg/ml,此时三者的曲线下面积(AUC)分别为0.815、0.806、0.817,敏感度分别为87.50%、84.37%、71.87%,特异度分别为64.20%、71.60%、77.78%。在校正其他因素前后,外周血NLRP3、IL-1β、IL-18高表达是SMPP患儿预后不良的独立危险因素(均P<0.05)。外周血NLRP3、IL-1β、IL-18联合预测SMPP患儿预后不良的AUC为0.923,敏感度为84.37%,特异度为90.12%,三项联合预测价值较单项指标更高(均P<0.05)。结论:外周血NLRP3/IL-1β、IL-18通路与SMPP患儿预后关系密切,NLRP3、IL-1β、IL-18高表达是患儿预后的独立危险因素,三项联合预测SMMP患儿预后不良的效能较高,可为临床降低预后不良风险提供帮助。 展开更多
关键词 重症肺炎支原体肺炎 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 白细胞介素-1Β 白细胞介素-18 预后 预测价值 儿童
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颅脑损伤患者外周血白细胞介素-18、基质金属蛋白酶-9水平与迟发性颅内脑血肿的相关性
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作者 易宇光 刘昌平 何佳佳 《医疗装备》 2024年第5期9-11,15,共4页
目的探讨颅脑损伤(TBI)患者外周血白细胞介素-18(IL-18)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平与迟发性颅内脑血肿(DTIH)的相关性。方法选取2021年4月至2022年8月医院收治的88例TBI患者作为研究对象。所有患者治疗后经2次及以上头颅CT平扫,根... 目的探讨颅脑损伤(TBI)患者外周血白细胞介素-18(IL-18)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平与迟发性颅内脑血肿(DTIH)的相关性。方法选取2021年4月至2022年8月医院收治的88例TBI患者作为研究对象。所有患者治疗后经2次及以上头颅CT平扫,根据是否发生DTIH分成DTIH组(45例)和非DTIH组(43例)。收集患者的一般资料,采用酶联免疫吸附法检测患者IL-18、MMP-9,采用单因素分析及Logistic多因素回归分析法分析影响发生DTIH的因素。结果单因素分析结果提示,DTIH组的舒张压、血浆凝血酶时间(TT)、IL-18及MMP-9水平高于非DTIH组,而格拉斯哥昏迷指数(GCS)评分低于非DTIH组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析结果提示,IL-18(β=0.294,OR=1.342,95%CI=1.044~1.724)及MMP-9(β=0.298,OR=1.347,95%CI=1.093~1.659)是TBI患者发生DTIH的危险因素(P<0.05)。结论IL-18和MMP-9表达异常升高与TBI患者治疗后发生DTIH相关,两者均为TBI患者发生DTIH的危险因素。 展开更多
关键词 颅脑损伤 白细胞介素-18 基质金属蛋白酶-9 迟发性颅内脑血肿
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血清炎症因子白细胞介素⁃18、高敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子⁃α与2型糖尿病患者颈动脉粥样硬化的关系 被引量:8
8
作者 孙蔚 王慧丽 +1 位作者 岳媛媛 徐风霞 《临床内科杂志》 CAS 2023年第4期265-267,共3页
目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清炎症因子白细胞介素⁃18(IL⁃18)、高敏C反应蛋白(hs⁃CRP)、肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)与颈动脉粥样硬化的关系。方法根据有无颈动脉粥样硬化将128例T2DM患者分为T2DM合并颈动脉粥样硬化组[颈动脉内中膜厚度... 目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清炎症因子白细胞介素⁃18(IL⁃18)、高敏C反应蛋白(hs⁃CRP)、肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)与颈动脉粥样硬化的关系。方法根据有无颈动脉粥样硬化将128例T2DM患者分为T2DM合并颈动脉粥样硬化组[颈动脉内中膜厚度(CIMT)≥1 mm,A组]66例和单纯T2DM组(CIMT<1 mm,B组)62例。再根据CIMT将A组患者分为A1组(1 mm≤CIMT<1.1 mm)21例、A2组(1.1 mm≤CIMT<1.2 mm)25例及A3组(CIMT≥1.2 mm)20例。根据有无颈动脉粥样斑块将A组分为有斑块组(20例)及无斑块组(46例)。收集所有患者的临床资料、测定CIMT并分组进行比较。采用多因素logistic回归分析评估T2DM患者颈动脉粥样硬化的影响因素。采用Pearson相关分析评估血清炎症因子与CIMT的相关性。结果A组患者空腹素(FINS)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL⁃C)依次升高、IL⁃18、hs⁃CRP、TNF⁃α水平均高于B组(P<0.05)。A1组、A2组及A3组患者IL⁃18、hs⁃CRP、TNF⁃α水平依次升高;有斑块组患者上述指标水平均高于无斑块组(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,T2DM病程、LDL⁃C、TG、IL⁃18、hs⁃CRP、TNF⁃α均为T2DM患者颈动脉粥样硬化的独立影响因素(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,IL⁃18、hs⁃CRP、TNF⁃α与T2DM患者CIMT均呈正相关(P<0.01)。结论T2DM患者颈动脉粥样硬化与IL⁃18、hs⁃CRP、TNF⁃α水平升高有关,T2DM病程、LDL⁃C、TG、IL⁃18、TNF⁃α与T2DM患者颈动脉粥样硬化独立正相关,提示血清炎症因子IL⁃18、hs⁃CRP、TNF⁃α可能是T2DM患者大血管病变的标志物,其水平升高可能是动脉粥样斑块形成的机制之一。 展开更多
关键词 白细胞介素18 高敏C反应蛋白 肿瘤坏死因子⁃α 2型糖尿病 颈动脉粥样硬化
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鸡白细胞介素18成熟蛋白的表达、纯化及其单克隆抗体的制备与特性鉴定 被引量:1
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作者 苏倩倩 王肖祎 +2 位作者 李恩扩 彭志成 胡敬东 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期684-688,共5页
将鸡白细胞介素18成熟蛋白(mature chicken interleukin 18,mChIL-18)基因亚克隆至原核表达载体pET-28a(+),并在大肠杆菌中高效表达,采用Ni-NTA亲和层析方法纯化重组蛋白,免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性单克隆抗体(mAb),并通过... 将鸡白细胞介素18成熟蛋白(mature chicken interleukin 18,mChIL-18)基因亚克隆至原核表达载体pET-28a(+),并在大肠杆菌中高效表达,采用Ni-NTA亲和层析方法纯化重组蛋白,免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性单克隆抗体(mAb),并通过间接ELISA、间接免疫荧光(IFA)和Western blot等方法对mAb做初步鉴定。结果表明,试验成功表达了mChIL-18蛋白,并获得2株持续且稳定分泌抗体的杂交瘤细胞(1G9、2E6),其腹水ELISA效价分别为1:5.12×105和1:3.2×104,亚类鉴定结果均为IgM。Western blot结果显示,2株单抗均能特异性识别原核表达的mChIL-18蛋白,IFA分析表明它们均能与真核表达的mChIL-18发生特异性反应,ELISA叠加试验证实1G9与2E6针对2个不同的抗原表位。本研究所获单抗可以用于建立鸡IL-18的检测方法,为进一步开展其生物学功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 白细胞介素18 单克隆抗体 特异性鉴定
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结直肠癌肝转移患者白细胞介素-18、促肝再生磷酸酶蛋白3表达与PI3K及AKT蛋白的关系 被引量:1
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作者 罗振凌 顾群浩 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2023年第6期609-614,共6页
目的探讨结直肠癌肝转移患者癌组织中白细胞介素-18(IL-18)、促肝再生磷酸酶蛋白3(PRL-3)表达与临床病理特征及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝苏氨酸蛋白激酶B(AKT)蛋白水平的关系。方法选取2019年10月至2021年10月于上海中医药大学附属岳... 目的探讨结直肠癌肝转移患者癌组织中白细胞介素-18(IL-18)、促肝再生磷酸酶蛋白3(PRL-3)表达与临床病理特征及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝苏氨酸蛋白激酶B(AKT)蛋白水平的关系。方法选取2019年10月至2021年10月于上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院行同期切除术的85例结直肠癌肝转移患者(肝转移组)的癌组织样本及癌旁正常组织(距肿瘤切缘4 cm),以及同期65例未发生肝转移结直肠癌患者(未肝转移组)的癌组织为研究对象。免疫组织化学S-P法检测不同组织中IL-18、PRL-3阳性表达率,Western blot检测癌组织中PI3K、p-AKT相对表达水平,分析IL-18、PRL-3与患者临床病理的关系及其与PI3K、p-AKT表达的相关性。结果与未肝转移组比较,肝转移组TNM分期IV期、低分化程度比例较高(P<0.05)。肝转移患者癌组织中IL-18、PRL-3、PI3K、p-AKT蛋白阳性表达率高于其癌旁正常组织和未肝转移患者癌组织,且未肝转移患者癌组织中IL-18、PRL-3、PI3K、p-AKT蛋白阳性表达率高于肝转移患者癌旁正常组织(P<0.05)。相关性分析示,肝转移患者癌组织中IL-18、PRL-3表达与PI3K、p-AKT均呈正相关(P<0.05);未转移癌组织中IL-18表达与PI3K、p-AKT均呈正相关(P<0.05),PRL-3表达与p-AKT均呈正相关(P<0.05),且IL-18与PRL-3呈显著正相关(P<0.05)。结论IL-18、PRL-3可能通过激活PI3K/AKT信号通路从而参与结直肠癌肝转移过程。 展开更多
关键词 结直肠癌 肝转移 白细胞介素-18 促肝再生磷酸酶蛋白3 磷脂酰肌醇3-激酶 丝苏氨酸蛋白激酶B
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苁蓉益肾颗粒对多囊卵巢综合征患者内分泌功能、血清淀粉样蛋白P及白细胞介素-18水平的影响 被引量:4
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作者 任凤兰 雷娜 李宾玲 《世界中西医结合杂志》 2023年第3期597-600,共4页
目的 探讨苁蓉益肾颗粒对多囊卵巢综合征(Polycystic Ovary Syndrome, PCOS)患者内分泌功能、血清淀粉样蛋白P(Serum Amyloid P,SAP)、白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)水平的影响。方法 选取2018年6月—2020年6月期间河南省周口市... 目的 探讨苁蓉益肾颗粒对多囊卵巢综合征(Polycystic Ovary Syndrome, PCOS)患者内分泌功能、血清淀粉样蛋白P(Serum Amyloid P,SAP)、白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)水平的影响。方法 选取2018年6月—2020年6月期间河南省周口市中医院收治的90例多囊卵巢综合征患者,采用随机摸球法分为对照组和观察组,每组各45例。对照组采用氯米芬治疗,观察组在治疗组的基础上加用苁蓉益肾颗粒治疗。治疗2个疗程后,观察比较两组患者临床疗效、卵巢B超结果、内分泌功能指标、SAP及IL-18水平。结果 治疗后观察组总有效率93.33%(42/45)明显优于对照组73.33%(33/45),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗3个周期后两组患者平均卵泡数、平均卵巢体积均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组平均卵泡数、平均卵巢体积均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。停药后第3个周期观察组平均卵泡数及平均卵巢体积与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者血清雌二醇(Estradiol, E2)、睾酮(Testosterone, T)、黄体生成素(Luteinizing hormone, LH)水平均较治疗前降低,FSH水平均较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组E2、T、LH水平均低于对照组,FSH水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者血清IL-18、SAP水平均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组血清IL-18、SAP水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 苁蓉益肾颗粒治疗PCOS的效果显著,能明显纠正患者内分泌失调,降低血清IL-18及SAP水平。 展开更多
关键词 苁蓉益肾颗粒 多囊卵巢综合征 内分泌功能 血清淀粉样蛋白P 白细胞介素-18
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猪白细胞介素18成熟蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量:22
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作者 郑敏 金宁一 +2 位作者 张洪勇 李昌 尹革芬 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期430-432,共3页
通过 RT- PCR方法从用 PHA和 L PS刺激的猪脾脏细胞中扩增出猪白细胞介素 18(p IL - 18)成熟蛋白基因的c DNA,克隆到 T载体 p UCm- T后 ,序列测定表明 ,p IL- 18成熟蛋白基因核苷酸长度为 4 74 bp,编码 15 7个氨基酸。将该基因片段克隆... 通过 RT- PCR方法从用 PHA和 L PS刺激的猪脾脏细胞中扩增出猪白细胞介素 18(p IL - 18)成熟蛋白基因的c DNA,克隆到 T载体 p UCm- T后 ,序列测定表明 ,p IL- 18成熟蛋白基因核苷酸长度为 4 74 bp,编码 15 7个氨基酸。将该基因片段克隆到大肠杆菌表达载体 p ET- 2 8a构建重组质粒 p ETIL 18m,转化大肠杆菌 BL 2 1(DE3) ,并用 IPTG诱导。重组菌菌体裂解物 SDS- PAGE可检测到相对分子质量为 190 0 0的重组蛋白 ,免疫印迹法证实该重组蛋白可以与人 IL- 展开更多
关键词 白细胞介素18 成熟蛋白 基因克隆 原核表达 RT-PCR 大肠杆菌 免疫佐剂 免疫调节剂
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血清单核细胞趋化蛋白-1、γ干扰素、白细胞介素-18表达情况及其在肺结核患者诊断和治疗评估中的价值 被引量:2
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作者 陈洁 叶海明 张菊芳 《新发传染病电子杂志》 2023年第6期52-57,共6页
目的分析肺结核患者血清单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、γ干扰素(interferon-γ,INF-γ)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)表达情况,探讨其在肺结核诊治中的临床价值。方法选择2019年1月至2021年... 目的分析肺结核患者血清单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、γ干扰素(interferon-γ,INF-γ)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)表达情况,探讨其在肺结核诊治中的临床价值。方法选择2019年1月至2021年6月期间在深圳市福田区慢性病防治院接受治疗的85例活动性肺结核患者,根据病情程度分为轻度组(51例)和重度组(34例),比较不同临床特征患者血清INF-γ、IL-18、MCP-1水平,并比较轻度组、重度组治疗前后血清INF-γ、IL-18、MCP-1水平;病灶不同吸收程度患者血清INF-γ、IL-18、MCP-1水平。分析肺结核患者血清INF-γ、IL-18、MCP-1水平和急性生理与慢性健康状况评分系统(acute physiology and chronic health evaluation,APACHE)Ⅱ评分的相关性。85例患者均接受药物治疗,将治疗2个月时血清INF-γ、IL-18、MCP-1值与治疗前的浓度比值绘制受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线),分析血清INF-γ、IL-18、MCP-1的比值对肺结核疗效的评价效能。结果病灶累及≥2个肺野、有空洞病变、重度肺结核患者血清INF-γ、IL-18、MCP-1水平分别高于病灶累及1个肺野、无空洞病变和轻度肺结核患者(P<0.001);轻度组、重度组治疗后空洞数量、痰检查转归及临床症状评分均显著降低,与本组治疗前比较差异有统计学意义(P<0.001);轻度组、重度组治疗后血清INF-γ、IL-18、MCP-1水平均显著降低(P<0.001);轻度组、重度组病灶明显吸收、吸收、不吸收患者血清INF-γ、IL-18、MCP-1水平依次逐渐升高(P<0.001);Pearson相关分析显示活动性肺结核患者血清INF-γ、IL-18、MCP-1水平与APACHEⅡ均呈正相关(r=0.428、0.505、0.581,均P<0.001);ROC曲线显示,血清INF-γ、IL-18、MCP-1的比值联合应用评价肺结核治疗效果的曲线下面积(area under the curve,AUC)达到0.808,敏感度和特异度分别为85.4%和72.9%。结论血清INF-γ、IL-18、MCP-1水平高低、浓度变化,可在一定程度反映肺结核患者病情严重程度及其抗结核治疗效果。 展开更多
关键词 肺结核 单核细胞趋化蛋白-1 Γ干扰素 白细胞介素-18 病情 疗效
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猪白细胞介素18成熟蛋白基因克隆及在不同原核表达系统中的表达
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作者 郑兰兰 崔保安 +3 位作者 陈红英 贾云飞 陈瑞亮 方忠意 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期75-79,共5页
RT-PCR方法直接从猪脾脏淋巴细胞中扩增出猪白细胞介素18成熟蛋白基因的cDNA,克隆到pGEM-T载体,构建重组质粒pGEM-TpIL18,转化E.coliJM109感受态细胞,取PCR和酶切鉴定为阳性的重组质粒进行序列测定.测序结果表明,pIL-18成熟蛋白基因核... RT-PCR方法直接从猪脾脏淋巴细胞中扩增出猪白细胞介素18成熟蛋白基因的cDNA,克隆到pGEM-T载体,构建重组质粒pGEM-TpIL18,转化E.coliJM109感受态细胞,取PCR和酶切鉴定为阳性的重组质粒进行序列测定.测序结果表明,pIL-18成熟蛋白基因核苷酸长度为474 bp,编码157个氨基酸.将其分别克隆到表达载体pQE30、pET-28a、pGEX6P-1中,构建重组表达质粒pQE-mpIL18、pET-mpIL18、pGEX-mpIL18.用IPTG诱导表达,重组菌菌体裂解物SDS-PAGE可检测到相对分子质量分别为19 000、21 000、45 000的重组蛋白.经薄层扫描分析,pQE-mpIL18、pET-mpIL18、pGEX-mpIL18菌体裂解物分别占菌体总蛋白的17%、28%、27%,均以包涵体形式存在. 展开更多
关键词 白细胞介素18 成熟蛋白 原核表达
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重组鸡白细胞介素18对不同基因型新城疫病毒HN基因表达蛋白免疫活性的影响
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作者 张立娜 华彦 +1 位作者 柴洪亮 贾竞波 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第6期85-86,共2页
白细胞介素18(IL-18)是被广泛研究的细胞因子佐剂之一。研究选择了IL-18作为纯化蛋白多肽的佐剂,观察其对多肽疫苗的免疫应答作用,从而为研制新型的多肽疫苗奠定一定的理论基础。
关键词 白细胞介素18 蛋白多肽 新城疫病毒 免疫活性 基因表达 基因型 重组 IL-18
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人工分子伴侣辅助鸡白细胞介素18重组蛋白的复性 被引量:1
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作者 王新华 胡敬东 +2 位作者 孔娜 李宏梅 赵宏坤 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期344-347,共4页
目的:研究表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和β-环糊精(β-CD)组成的人工分子伴侣系统辅助鸡IL-18重组蛋白的复性,以提高鸡IL-18重组蛋白复性率,获得更多具有良好活性的蛋白。方法:将重组原核表达质粒pGEX-mChIL-18转化宿主细胞... 目的:研究表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和β-环糊精(β-CD)组成的人工分子伴侣系统辅助鸡IL-18重组蛋白的复性,以提高鸡IL-18重组蛋白复性率,获得更多具有良好活性的蛋白。方法:将重组原核表达质粒pGEX-mChIL-18转化宿主细胞大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG于37℃诱导培养获得表达。表达产物主要以包涵体的形式存在。包涵体经超声波破碎、洗涤后以6mol/L的盐酸胍溶解,使蛋白彻底变性,然后利用人工分子伴侣系统辅助蛋白复性。复性产物经透析纯化后,利用淋巴细胞增殖试验来检测其活性。结果:经SDS-PAGE分析表明,表达产物是与ChIL-18重组蛋白相符的Mr约44000的蛋白条带。利用人工分子伴侣系统辅助复性,鸡IL-18重组蛋白获得了42·54%复性率。鸡淋巴细胞增殖试验表明,表达产物对鸡淋巴细胞具有明显诱导增殖作用。结论:人工分子伴侣系统能够较好地辅助鸡IL-18重组蛋白复性,获得较高的复性率。其产物具有良好的生物学活性,为下一步鸡IL-18重组蛋白的应用研究奠定了试验基础。 展开更多
关键词 人工分子伴侣系统 白细胞介素18重组蛋白 Β-环糊精 复性 表面活性剂
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鸡白细胞介素-18基因的原核表达及多克隆抗血清的制备 被引量:11
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作者 刘胜旺 潘蔚绮 +2 位作者 孔宪刚 李广兴 夏春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期427-430,共4页
将编码鸡白细胞介素 - 18(interleukin- 18,IL- 18)成熟蛋白的基因亚克隆至原核表达载体 p PROEXTMHT中 ,构建重组质粒并进行确证性序列测定。然后将重组质粒转化大肠杆菌 DH5α并用 IPTG于 37℃诱导培养。表达的融合蛋白主要以包涵体... 将编码鸡白细胞介素 - 18(interleukin- 18,IL- 18)成熟蛋白的基因亚克隆至原核表达载体 p PROEXTMHT中 ,构建重组质粒并进行确证性序列测定。然后将重组质粒转化大肠杆菌 DH5α并用 IPTG于 37℃诱导培养。表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在 ,目的蛋白表达量占菌体蛋白的 30 %。 SDS- PAGE和 Western blot分析显示 ,表达的鸡 IL-18融合蛋白相对分子质量约为 2 30 0 0。包涵体被 6 mol/ L 盐酸胍裂解后 ,通过镍离子亲和树脂进行了纯化。用所获得的重组鸡 IL- 18融合蛋白及其纯化产物经 3次肌肉注射豚鼠 ,制备豚鼠抗鸡 IL- 18多克隆抗血清 ,并用琼脂扩散试验多克隆抗血清进行了证明。本试验成功的原核表达、纯化了鸡 IL- 18融合蛋白 ,并制备了抗鸡 IL- 18多克隆抗血清 ,为下一阶段关于鸡 IL - 展开更多
关键词 白细胞介素-18基因 原核表达 多克隆抗血清 重组蛋白 制备 细胞因子
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鸡白细胞介素2增强传染性法氏囊病病毒多聚蛋白DNA疫苗免疫原性的研究 被引量:36
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作者 于涟 李建荣 +2 位作者 黄耀伟 梁雪芽 孟松树 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期652-657,共6页
鸡白细胞介素 2 (IL 2 )基因是新近被确定的非哺乳类IL 2基因。将鸡白细胞介素 2 (IL 2 )基因和传染性法氏囊病病毒 (IBDV)多聚蛋白基因 (VP2 VP4 VP3 )分别插入真核表达载体pCI的CMV启动子下游 ,制备DNA疫苗 ,免疫 14日龄SPF鸡 ,14d... 鸡白细胞介素 2 (IL 2 )基因是新近被确定的非哺乳类IL 2基因。将鸡白细胞介素 2 (IL 2 )基因和传染性法氏囊病病毒 (IBDV)多聚蛋白基因 (VP2 VP4 VP3 )分别插入真核表达载体pCI的CMV启动子下游 ,制备DNA疫苗 ,免疫 14日龄SPF鸡 ,14d后二免 ,二免后 3d攻击标准强毒株。结果表明共注射鸡IL 2质粒能明显增强DNA疫苗对强毒攻击 ,保护率达 80 % ;能增强DNA疫苗诱导的中和抗体效价 (P <0 0 5 ) ;能显著促进鸡胸腺、脾脏和外周血液T淋巴细胞及法氏囊B淋巴细胞增殖反应 (P <0 0 5 )。这些结果提示鸡IL 2能明显增强IBDV多聚蛋白DNA疫苗的免疫原性 ,是一种优良的禽类DNA疫苗佐剂。 展开更多
关键词 白细胞介素2 IL-2 传染性法氏囊病病毒 多聚蛋白基因 DNA疫苗 免疫原性
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重组鸡白细胞介素18(rChIL-18)对MDV感染SPF鸡细胞免疫的影响 被引量:9
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作者 李宏梅 胡敬东 +4 位作者 郭慧君 郑玉姝 刘翠艳 田兆菊 赵宏坤 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期624-627,共4页
用马立克氏病病毒(MDV)感染5日龄SPF鸡后,取21日龄和35日龄鸡的淋巴细胞,运用3H-TdR掺入法检测T淋巴细胞对ConA和重组鸡白细胞介素18(rChIL-18)的反应,并用MTT法检测NK细胞和CTL对MD肿瘤细胞系CU147的杀伤活性及rChIL-18和IFN-γ对它们... 用马立克氏病病毒(MDV)感染5日龄SPF鸡后,取21日龄和35日龄鸡的淋巴细胞,运用3H-TdR掺入法检测T淋巴细胞对ConA和重组鸡白细胞介素18(rChIL-18)的反应,并用MTT法检测NK细胞和CTL对MD肿瘤细胞系CU147的杀伤活性及rChIL-18和IFN-γ对它们的作用。结果显示,SPF鸡感染MDV后淋转水平显著下降,NK细胞、CTL杀伤活性在感染后21日龄时升高,而在35日龄时NK细胞杀伤活性显著下降。rChIL-18对对照组和感染组SPF鸡的淋转水平和杀伤活性均有提高作用,同样IFN-γ也具有提高NK细胞和CTL杀伤活性的作用。 展开更多
关键词 重组白细胞介素-18(rChIL-18) 细胞杀伤活性 马立克氏病病毒 细胞免疫 SPF
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白细胞介素18和鸡白细胞介素18 被引量:12
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作者 潘蔚绮 李广兴 刘胜旺 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第1期123-128,共6页
白细胞介素 18是一种新发现的细胞因子 ,主要由单核巨噬细胞系统的细胞分泌。目前在分子水平上已经证明 ,人、哺乳动物和某些鸟类中都有 IL- 18存在。IL- 18在结构上属于 IL- 1家族 ,在功能上它与 IL- 12相似 ,且二者有协同效应。 IL- 1... 白细胞介素 18是一种新发现的细胞因子 ,主要由单核巨噬细胞系统的细胞分泌。目前在分子水平上已经证明 ,人、哺乳动物和某些鸟类中都有 IL- 18存在。IL- 18在结构上属于 IL- 1家族 ,在功能上它与 IL- 12相似 ,且二者有协同效应。 IL- 18具有多种生物学功能 ,它不仅可以增强 Th1型免疫反应 ,而且在 Th2型免疫反应中也发挥一定的作用。人类医学研究证明 IL- 18在抗微生物感染、抗肿瘤免疫中具有应用潜力。在集约化畜禽养殖业中 ,包括白细胞介素 18在内的细胞因子作为天然的免疫调节剂 ,目前已被公认为是一种可以替代传统疗法的新型治疗剂。鸡 IL- 18基因是最近才被发现的 ,由于它具有与人和哺乳动物相似的生物学功能 ,因而鸡 IL- 18在比较免疫学研究和禽病治疗中具有重要意义。 展开更多
关键词 白细胞介素18 白细胞介素18 细胞因子 免疫调节剂 分布 分子结构 受体 生物学功能
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