鸭绒鸡绒鸽绒三级红外光谱研究

为了准确鉴定鸭绒、鸡绒及鸽绒,对其一维红外光谱、二阶导数红外光谱和同步二维红外光谱进行了研究。研究发现:鸭绒、鸡绒及鸽绒同时存在着—CH3不对称及对称伸缩振动模式、—CH2不对称及对称伸缩振动模式、酰胺Ⅰ带C=O伸缩振动模式、酰胺Ⅱ带C—N伸缩振动和N—H弯曲振动组合吸收模式、酰胺Ⅲ带C—N伸缩振动和N—H弯曲振动组合吸收模式,C—O伸缩振动模式和S—O弯曲振动模式等。认为在3 000cm-1~1 000cm-1频率区间内,采用传统的一维和二阶导数红外光谱法不能有效区分鸭绒、鸡绒及鸽绒,而同步二维红外光谱在1 100cm-1~1 000cm-1频率范围内可以区分鸭绒、鸡绒及鸽绒。

鸡绒加工方法

1．选料：要挑选含有事密绒丝的鸡毛．按鸡的部位来划分，胸腹部位的鸡毛是最适合于加工鸡绒的原料。

应用鸡胚尿囊绒膜锥虫蓝吸收法评价化学物质的眼刺激性

背景:传统多采用兔眼刺激实验(Draize实验)评价化学物质眼刺激性,即将化学物涂进兔眼睛后观察其变化,这种方法费时,费力,且给动物带来很大痛苦。各国实验室都在寻找动物替代实验的方法。目的:采用鸡胚尿囊绒膜-锥虫蓝吸收实验作为兔眼刺激实验替代方法评价化学物眼刺激性的可行性。设计、时间及地点:观察实验,于2008-05/09在中国检验检疫科学研究院毒理学实验室完成。材料:无特定病原体级受精鸡卵,9日龄,购于北京梅里亚通实验动物技术有限公司。方法:将1g/L的锥虫蓝溶液滴加在受化学物质刺激损伤的鸡胚尿囊绒膜上,通过计算鸡胚尿囊绒膜受损伤后吸收锥虫蓝的量,半定量测定化学物质对鸡胚尿囊绒膜的刺激性,并将所得结果与体内兔眼刺激实验评分结果进行比对,作相关性分析。同时预测了5种常见有机溶剂的眼刺激性。主要观察指标:鸡胚尿囊绒膜受刺激损伤后吸收锥虫蓝的量。结果:鸡胚尿囊绒膜-锥虫蓝吸收法与体内兔眼刺激实验评分结果相关性很好(R2=0.9259)。5种常见有机溶剂未稀释时,甘油无眼刺激性,丙酮、乙醇、二甲基亚砜、甲醇均有较高刺激性。当稀释为1%后,丙酮、乙醇、二甲基亚砜无眼刺激性,但甲醇刺激性仍然较高。结论:鸡胚尿囊绒膜-锥虫蓝吸收法可以代替兔眼刺激试验对化学物质眼刺激性进行评价。

受精鸡卵尿囊绒膜试验作为眼刺激试验替代方法的研究

目的 探讨受精鸡卵尿囊绒膜试验 (HET CAM)是否可作为体内眼刺激试验 (Draizetest)的一种替代方法。方法 用HET CAM的两种方法 ,即显微镜观察 (HET CAMscore)和台盼蓝染色法 (CAM TB)对 14种化学物的眼刺激性进行检测 ,并与Draizetest两种评分标准 ,即最大平均值 (MAS)和 2 4h作用值 (S2 4 )结果进行相关性比较。结果 HET CAMscore与MAS和S2 4的相关系数分别是 0 84 7和 0 779,CAM TB与MAS和S2 4分别是 0 86 2和 0 831。结论 HET CAM可用于替代Draizetest。

鸡胚尿囊绒膜试验检测化妆品的刺激性

目的 研究鸡胚尿囊绒膜 -苔盼蓝吸收 (CAM -TB)试验作为体内眼刺激试验 (Draizetest)的替代方法检测化妆品产品时眼刺激性的可行性。方法 用该方法对 17种化妆品的刺激性进行检测 ,与Draizetest的结果进行比较 ,作相关性分析。结果 CAM -TB与Draizetest的相关系数为 0 9375。结论 CAM -TB试验可作为Draizetest眼刺激试验的一种替代方法 ,用于评价化妆品对眼刺激性。

人内皮抑素部分序列——Es-2的生物活性研究

目的:检测人工合成多肽Es-2抑制血管生成活性及其对肿瘤生长的影响。方法:采用MTT法和鸡胚给药实验,观察Es-2对肿瘤细胞和鸡胚尿囊绒膜(CAM)上血管生成的抑制情况。建立C57BL/6黑色素瘤(B16F10)小鼠模型,以不同剂量皮下注射给药,测量各组小鼠皮下移植肿瘤体积变化和抑瘤率。结果:Es-2对肿瘤细胞无抑制现象;在CAM实验中,新生血管生长受到明显的抑制。C57BL/6小鼠给药10 d后治疗组与对照组相比,Es-2 20 mg/kg组对小鼠黑色素瘤生长有一定抑制作用,其效果相当于10 mg/kg内皮抑素的治疗效果(P<0.05)。结论:Es-2具有开发成抗肿瘤药物的前景。

改良CAM移植瘤模型的制备及其对肿瘤血管新生抑制药物的筛选效果

目的：以改良方法在鸡胚绒膜尿囊膜（chickchorioallantoicmembrane，CAM）上接种人成神经胶质瘤U87细胞制备移植瘤，验证改良模型筛选抗肿瘤血管新生药物的有效性和可行性。方法：将鸡胚种蛋随机分为2组，分别使用传统方法与改良方法建立CAM-U87移植瘤模型；改良方法在鸡胚孵育中增加9—16h的开窗适应期，再将特制的硅胶圈放置在CAM组织-级血管的半侧；硅胶圈内接种U87细胞建立CAM—U87移植瘤模型。模型的硅胶圈内分别加入经典抗血管新生药物沙利度胺（50、100、200μg／ml）和自主研发抗血管新药G386，以DMSO为对照；体视显微镜观察肿瘤形态，H—E染色法观察瘤组织新生微血管密度（microvesseldensity，MVO），原位杂交（insituhybridization，ISH）技术检测血管标记物VEGFR2的表达。结果：成功制备改良CAM—U87细胞移植瘤，改良模型不影响CAM本身的血管生成，其瘤细胞接种成功率较传统模型显著升高[（70．00±4．226）％vs（41．25±5．154）％；t=4．314，P=0．0007]，移植瘤体积显著增大[（60．20±6．012）vs（15．97±2．403）mm3；t=6．012，P〈0．0001]。沙利度胺和G386两药均能显著抑制移植瘤组织中的血管形成，使瘤组织中MVD显著降低[沙利度胺200μg／ml时（15．85±1．15）％vs（29．80±4．16）％；t=2．49，P=0．0474]、VEGFR2表达明显减少。结论：改良方法成功制备CAM—U87移植瘤模型，经沙利度胺和G386验证，该模型对抗肿瘤血管新生药物的筛选具有良好的有效性和可行性。

Effects of Taohong Siwu Decoction Ⅱ in the Chick Chorioallantoic Membrane (CAM) Assay and on B16 Melanoma in Mice and Endothelial Cells ECV304 Proliferation

To investigate the anti-angiogenesis action of Taohong Siwu Decoction Ⅱ(THSWD Ⅱ).Methods:The chick chorioallantoic membrane(CAM)assay was adopted to study the anti-angiogenesis action ofTHSWD Ⅱ;the MTT test was used to investigate its effect on proliferation of the human umbilical veinendothelial cells ECV304;and the immunohistochemical method was used to observe the effect of THSWDⅡ on the expression of kinase insert domain containing receptor/fetal liver kinase 1(KDR/FIk-1)and the.microvessel density(MVD)of B 16 melanoma in mice.Results:After treatment with THSWD Ⅱ,the bloodvessel index of CAM and the absorbency of ECV304 in the THSWD Ⅱ 1mg/ml group and the 2mg/mlgroup decreased significantly(P<0.01);the weight,the expression of KDR/Flk-1 and the MVD of B 16melanoma in mice reduced significantly in the THSWD Ⅱ 5g/kg group,the 10g/kg group and theTSHSWD10g/kg plus cyclophosphamide group(P<0.01).Conclusion:THSWD Ⅱ has the actions ofanti-angiogenesis,and inhibiting the proliferation of ECV304 cells and the growth of B16 melanoma.Theclinical anti-tumour mechanism is considered to be related possibly to its anti-angiogenesis action byinhibiting the expression of KDR/FIK-1.

骨涎蛋白单克隆抗体抑制亲骨转移人乳腺癌细胞血管侵袭机制的探讨

目的:探讨骨涎蛋白(BSP)单克隆抗体对亲骨转移人乳腺癌细胞株MDA-MB-231BO血管侵袭能力的影响。方法:MTT法检测BSP抗体对MDA-MB-231BO细胞的增殖作用;鸡胚尿囊绒膜(CAM)实验检测BSP抗体对MDA-MB-231BO细胞血管侵袭能力的影响。结果:BSP抗体对MDA-MB-231BO细胞的生长具有特异抑制作用,其抑制率和剂量呈正相关,BSP抗体浓度为100μg/mL时,抑制率为35.18%。BSP抗体能特异性抑制MDA-MB-231BO细胞穿透鸡胚血管内皮细胞和基底膜,抑制效应与抗体浓度呈正相关。100μg/mL的BSP抗体可以明显抑制MDA-MB-231BO细胞侵入鸡胚血管。结论:BSP抗体对MDA-MB-231BO细胞的血管侵袭能力具有特异抑制作用,提示BSP抗体可抑制乳腺癌靶向骨转移的进程。