亚抑菌浓度山奈酚对鼠伤寒沙门氏菌侵袭鸡肠道上皮细胞的抑制作用研究

为研究亚抑菌浓度山奈酚对鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)侵袭鸡肠道上皮细胞的作用,本研究首先通过二倍稀释法确定山奈酚的最小抑菌浓度(MIC)及其亚抑菌浓度,然后利用亚抑菌浓度山奈酚处理S.typhimurium后检测其SPI-1毒力基因表达水平及其对鸡肠道上皮细胞的侵袭变化规律和对雏鸡的致病性。结果显示,山奈酚对S.typhimurium CVCC542和SL1344株的MIC均>200μg/m L。亚抑菌浓度山奈酚能显著抑制S.typhimurium SPI-1毒力基因sip A、sop B、sop E2、hil A、hil C和hil D的基因表达,并显著降低S.typhimurium对鸡肠道上皮细胞侵袭数目,抑制S.typhimurium诱导鸡肠道上皮细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性升高和F-actin骨架重排,并延长雏鸡存活时间。上述结果表明,亚抑菌浓度山奈酚能够抑制S.typhimurium侵袭鸡肠道上皮细胞,并降低其对雏鸡的致病性,为山奈酚应用于防治S.typhimurium感染提供了实验依据。

基于饲养层细胞培养鸡小肠上皮细胞及紫锥菊提取物对其增殖的影响研究

该研究为了探究鸡肠道成纤维细胞作为饲养层细胞培养鸡肠道上皮细胞(IEC)的可能性及紫锥菊提取物对IEC的增殖影响。试验首先通过IV型胶原酶消化法得到鸡肠道成纤维细胞,并采用丝裂霉素C将其制备成饲养层细胞与分离的鸡肠道上皮细胞共培养。通过细胞免疫荧光鉴定鸡IEC角蛋白的表达、细胞计数试剂(CCK-8)法检测其细胞增殖能力及紫锥菊提取物对其增殖的影响。结果表明:分离的鸡肠道上皮细胞表达角蛋白,与饲养层细胞共培养增殖能力良好,体外存活达14 d;此外31.25-2000μg/mL的紫锥菊提取物能有效促进受损的鸡肠道上皮细胞增殖,其中浓度为500μg/mL效果最为显著(P<0.01)。因此,鸡肠道成纤维细胞可以作为饲养层细胞培养鸡肠道上皮细胞,且紫锥菊提取物对其增殖有促进作用。