鸡胚免疫新城疫疫苗后宿主法氏囊转录组学分析

【目的】通过转录组学分析鸡胚免疫新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)TS09-C株后宿主法氏囊内免疫关键基因及信号通路分子转录差异,探究免疫后宿主法氏囊内免疫相关分子的调控反应。【方法】将60只18胚龄SPF鸡胚随机分为免疫组和对照组,30枚/组,免疫组将NDV TS09-C株通过羊膜腔接种鸡胚,剂量为103.0 EID 50/枚,注射体积为0.1 mL,对照组以同样的方法接种等体积PBS。检测免疫后不同时间点肺脏、胸腺、脾脏和法氏囊组织的病毒载量。选取病毒载量最高的法氏囊组织进行转录组学测序后,筛选免疫相关差异表达基因并分析其参与的主要功能及通路。【结果】免疫后1 d法氏囊组织中即可监测到病毒,免疫后3 d病毒载量达到最高。将免疫后3 d的法氏囊进行转录组学分析,与对照组相比,免疫组有453个基因上调、98个基因下调,其中免疫相关基因有36个上调、10个下调。免疫相关差异表达基因主要富集于自噬和细胞因子-细胞因子受体相互作用的免疫相关通路。差异表达基因蛋白互作分析显示,自噬通路中富集的BCL2与其他免疫相关基因有较多互作关系,且在B细胞活化、分化、免疫系统发育等功能注释中均有参与。【结论】本研究结果揭示了鸡胚免疫NDV TS09-C株后法氏囊内调控B细胞活化、分化的潜在靶向基因及通路,为进一步研究该毒株鸡胚免疫后B淋巴细胞调控的分子机制提供新的信息。

鸡胚免疫系统器官组织学变化观察

鸡胚免疫系统器官组织学变化观察鲍恩东，陈万芳（南京农业大学动物医学院２１００９５）鸡胚孵化至后期，其免疫系统器官已基本成熟，因而进行鸡胚免疫是可行的。有关鸡胚免疫的研究多见于血凝抑制（ＨＩ）抗体滴度的测定及免疫保护率的试验。本项研究旨在通过对孵化１０...

鸡新城疫弱毒苗对18天龄鸡胚免疫的探索

对鸡新城疫（ＮＤ）疫苗接种１８天龄鸡胚的安全性和免疫抗体产生情况等进行了初步探讨试验结果表明，多种ＮＤ疫苗接种１８天龄鸡胚均能诱导出壳雏鸡产生较高的血凝抑制抗体（ＨＩ），但疫苗对鸡胚有较强的致病性。

新城疫鸡胚免疫的研究

本文应用鸡新城疫（ＮＤ）Ⅱ系和Ｖ４弱毒疫苗分别气室接种不同孵化日龄鸡胚，出雏后计算其孵化率并在不同日龄测定血清ＨＩ抗体效价，结果表明，ＮＤⅡ系和Ｖ４疫苗１∶１０稀释，于１８、１９胚龄气室接种，对孵化率无显著影响（Ｐ＞００５），两种疫苗间也无明显差异（Ｐ＞００５），均能产生良好的免疫保护力。

鸡新城疫病毒分离鉴定及鸡胚免疫的方法研究

为了研究本地NDV毒力情况以及建立鸡胚免疫的方法,通过在山西地区采集病料,对病料通过PCR鉴定后应用SPF鸡胚繁殖,而后对其毒力相关的F基因进行扩增和序列分析。对其进行生物学毒力测定,并进行了动物回归试验。测定病毒效价,并将其稀释至不同的效价水平,接种于SPF鸡胚,进行鸡胚免疫方法的研究。结果,成功分离到1株NDV。其与Clone30、La Sota等株的同源性较高,与VG/GA、Clone30和La Sota等毒株位于同一个分支,亲缘关系最近,属于Ⅱ型弱毒株病毒。生物学毒力测定结果MDT、IVPI、ICPI分别为92.5、0.2、0,确定分离株为弱毒株。动物回归试验表明分离病毒具有致病性。鸡胚免疫方法研究结果表明接种的最佳病毒效价为22,无鸡胚死亡且孵出的雏鸡可检测到较高的抗体水平。说明可以用新城疫分离毒株来进行鸡胚免疫,有针对性的防控养殖场发生新城疫。

鸡胚免疫疫苗的研究现状及展望

鸡胚免疫技术是指对孵化后期的鸡胚接种活疫苗,使雏鸡出壳时,或出壳几天内就可获得主动免疫力。与传统免疫方式相比,鸡胚免疫具有填补免疫空白期、免疫效果均一确实、高通量自动化接种、节省人力成本等优点。目前,鸡胚免疫的最适接种日龄和接种方式为对18日龄鸡胚采用羊膜腔途径接种。鸡胚免疫技术已经在30多个国家得到应用,在美国已有80%肉鸡采用鸡胚免疫预防马立克氏病。除马立克氏病和鸡传染性法氏囊疫苗外,其余禽病的鸡胚接种疫苗尚处研发阶段。本研究论述了影响鸡胚接种的因素、鸡胚免疫的优缺点及国内外鸡胚疫苗的研发进展等,展示了鸡胚免疫疫苗的良好应用前景。

新城疫疫苗鸡胚免疫接种的效果观察

首次用火鸡疱疹病毒疫苗鸡胚免疫接种的成功,给其他疾病的胚胎免疫接种带来十分有益的启示。现就新城疫疫苗鸡胚免疫接种的效果报告如下。

鸡马立克氏病疫苗鸡胚免疫技术的应用

目的:通过不同的马立克氏病(Marek’s disease,MD)疫苗接种方法的比较,得出获得最佳免疫效果的免疫方法。方法:选取孵化示范基地,孵化5组试验鸡群,每组100羽,试验组分别采取出生1日龄免疫、18日龄鸡胚免疫、出生免疫+17日龄二免、鸡胚免疫+出生二免、空白对照,自60日龄起对试验鸡群抽样开展体液免疫检测、细胞免疫检测、病理检测等试验室检测工作。结果:与对照组相比,4个疫苗免疫组的血清抗体效价、IFN-γ、IL-4水平均显著升高,同时MD的发病率显著下降,其中,以18日龄鸡胚免疫和鸡胚免疫+出生免疫效果最为显著。结论:鸡胚免疫技术能有效提高鸡马立克氏病疫苗的免疫效果。

鸡胚接种毒害艾美耳球虫Eimeria necatrix的免疫研究

给15、17、19日胚龄的鸡胚经羊膜腔分别接种不同剂量的毒害艾美耳球虫Eimeria necatrix孢子化卵囊、孢子囊或子孢子,出雏后在无球虫环境中笼养,收集2～7日龄间全部粪便,以饱和盐水漂浮法检查卵囊的产生,并于17日龄时以1.2×105个/鸡的同源孢子化卵囊攻虫,以相对增重率(RWG)、病变计分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)评价免疫保护效果.结果表明,孢子化卵囊、孢子囊或子孢子经羊膜腔免疫接种后对鸡胚的孵化率无明显影响,所有接种组在出雏后2～7日龄间均能检获后代卵囊,攻虫后各免疫组的相对增重率由攻虫对照的38%～42.9%提高到73.2%～90.5%,病变计分减少率达50%～74.9%,相对卵囊产量为攻虫对照组的28.1%～60.2%,表明以一定剂量的E. necatrix孢子化卵囊、孢子囊或子孢子经羊膜腔免疫接种鸡胚,可诱导鸡在出雏后笼养条件下对同源艾美耳球虫的免疫保护力;比较不同剂量、不同胚龄的免疫效果,发现在试验设定条件下于17日胚龄接种8×104个子孢子/胚的效果最好.

胚期接种IBD疫苗对雏鸡ND常规免疫效果之影响

为探明用 IBD 疫苗进行鸡胚免疫的可行性,探讨了胚期接种 IBD 疫苗对雏鸡 ND 常规免疫接种效果的影响.将 IBD 中等毒力疫苗接种 18 日龄鸡胚,出壳后按常规免疫方法进行 ND 免疫,检测抗体水平、免疫细胞数量及功能和免疫保护力等.结果表明,胚期接种 IBD 中等毒力疫苗对雏鸡 ND 常规免疫具有免疫抑制作用.

鸡胚接种柔嫩艾美耳球虫和堆形艾美耳球虫活卵囊的免疫保护试验

给18日龄鸡胚接种一定剂量的柔嫩艾美耳球虫（Eimeria enella）和／或堆形艾美耳球虫（E．acervulina），孢子化卵囊，出雏后在无球虫环境中笼养，1～10日龄每天收集各组粪便样本，计数克粪便卵囊数（OPG），并于14日龄时以大剂量同源孢子化卵囊攻虫，以相对增重率（RWG）、饲料转化率（FCR）、相对卵囊产量（ROP）评价免疫保护效果。结果显示，以E．tenella或E．acervulina卵囊免疫18日龄鸡胚，其卵囊排出的潜隐期及达到峰值的时间与1日龄雏鸡接种组相一致，有相似的排卵囊曲线，提示其诱导免疫的建立是在出雏后开始建立的。攻虫后各免疫组的RWG由攻虫对照组的31．9％～51．7％提高到了76．5％～83．6％，RCR由攻虫对照组的4．11～4．89改善为2．72～2．96，ROP降至4．7％～23．5％。结果表明以一定剂量E．tenella和E．acervulina卵囊单独或混合经羊膜腔免疫18日龄鸡胚都可以建立起针对出雏后14日龄同源攻虫的良好免疫保护力。比较混合免疫Etenel／a和E．acervulina卵囊组与单一接种Etenella或E．aeervulina卵囊组的免疫效果发现，混合免疫组的各项指标均稍优于后者。

胚期接种IBD疫苗对雏鸡ND4倍剂量免疫接种效果之影响

为了研究用IBD疫苗进行鸡胚免疫的可行性,探讨了胚期接种IBD疫苗对雏鸡ND4倍剂量免疫接种效果的影响.将IBD中等毒力疫苗接种18日龄鸡胚,出壳后采用4倍剂量ND疫苗进行免疫,通过抗体水平、免疫细胞数量及功能和免疫保护力等的检测,结果表明胚期接种IBD中等毒力疫苗对雏鸡4倍剂量免疫仍具有免疫抑制作用.

鸡胚接种IBDV疫苗对SPF肉仔鸡的免疫抑制

通过鸡胚接种IBDV免疫复合物 (IBDV -Icx)和IBDV - 2 5 12两种疫苗 ,然后检测其对SPF肉仔鸡细胞免疫的影响。在胚内接种两种疫苗后的第 9、2 1天 ,均发生T细胞促有丝分裂反应减弱现象。但在免疫后第 15天 ,出现增强现象。IBDV - 2 5 12免疫鸡的T细胞反应性较低。除第 2 1天外 ,表达CT4 + CT8-和CT8+ CT4 -的淋巴细胞比例没有明显差异 ,在第 2 1天 ,接种IBDV - 2 5 12组二者的比例升高 (P <0 .0 5 ) ,接种IBDV -Icx组CT4 + CT8-百分比下降 ;两组免疫鸡的CT8+ CT4 -T细胞百分比均升高 (P <0 .0 5 ) ,而B细胞百分比均下降。试验结果表明 :尽管体液免疫抑制与B细胞损伤 (法氏囊萎缩 )有关 ,但这两种IBDV疫苗在SPF鸡中引起的细胞免疫抑制与辅助性T细胞TH(CT4 + CT8-)或细胞毒性T细胞TC(CT8+ CT4 -)亚群的变化无关。

新城疫病毒(NDV)在免疫鸡胚中增殖条件的优化

新城疫病毒 ( NDV)在鸡胚中的增殖受母源抗体、接种日龄、培养时间、接种剂量、种毒及其稀释倍数、孵化温度、孵化湿度等因素的影响。通过对 NDV在免疫鸡胚中增殖条件的优化配置 ,得出如下结果 :1 0日龄的免疫鸡胚 ,在母源抗体较高的情况下 ( 7log2～ 9log2 ) ,接种种毒的稀释倍数为 1 0 0 0～ 50 0 0倍 ,经过一定孵育时段 。

IBD疫苗胚胎免疫的安全性及其效果

最近,美国学者首次研究了三种常用IBD疫苗胚胎免疫的安全性及其效能。试验1和2为SPF肉鸡胚,试验3为具有母源抗体的商品肉鸡胚,免疫胚龄均为18天。当疫苗免疫1个剂量时,SPF鸡胚及出壳后1和3周雏鸡的死亡率均上升,出壳后1和3周鸡法氏囊也出现明显的病理变化。相反,当SPF鸡胚和商品肉鸡胚免疫半个剂量时。

重组火鸡疱疹病毒载体疫苗研究进展

养禽业对于世界经济非常重要,其中疫病的防制对养禽至关重要.采用传统方法制备的常规疫苗在疫病的防制中起了很大的作用,提高了家禽的健康水平.但是90年代以来,由于一些新的疾病出现,或者有些疾病以更强的毒力或新的临诊型出现,使得禽病的预防更加复杂.现在除了加强常规检疫和防疫之外,学者们将研究的方向转到新型疫苗上.