鸡胚尿囊液对小鼠免疫功能与抗应激作用的影响

用 10日龄鸡胚的尿囊液 ,以不同剂量给小鼠灌胃 ,连用 10d ,进行免疫学指标测定和抗应激试验。结果表明 ,鸡胚尿囊液能提高小鼠T淋巴细胞酯酶染色率、巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数 ,能使小鼠脾指数增加 ,对小鼠游泳时间有所延长 ,但对小鼠耐常压缺氧时间影响不明显。试验说明 ,鸡胚尿囊液能显著提高小鼠的免疫功能 ,对小鼠抗应激能力也有一定提高。

孵化温湿度对鸡胚尿囊液的影响

在疫苗生产中常用鸡胚培养毒株。鸡胚中尿囊液量的多少直接影响着疫苗生产的数量和经济效益。生产实践早已证明,胚胎对湿度的适应范围比较广,不像温度那么严格,湿度有良好的导热作用,可以使孵化初期的胚胎受热良好,有利胚胎后期生理散热及胚胎发育。现有研究报道,关于孵化的湿度研究较多,却未见关于获得最大量尿囊液的湿度的研究,而实际生产中,尿囊液量的多少直接影响着疫苗的产量和经济效益。因此本试验的目的是研究湿度、温度两个因素对鸡胚孵化过程中（0～11 d）尿囊液量的影响。

种毒接种剂量与鸡胚尿囊液量的相关性研究

对分成3组而同机孵化的180个9日龄罗曼蛋鸡鸡胚分别尿囊腔接种NDVLasota种毒液0.1mL／个，0.15mL／个和0.20mL／个。结果：尿囊液的收集量与种毒接种量呈显著负相关，而血凝价受接种剂量的影响不显著。

鸡胚尿囊液量与种毒接种日龄及接种剂量的相关性研究

选择9、10、11日龄非免疫的罗曼蛋鸡胚各180个,随机分成9组,每组60个,分别接种NDVLasota种毒液0.05、0.10、0.20ml/个于鸡胚尿囊腔中。试验结果表明:所采收的尿囊液量与不同的接种剂量及接种日龄有很大的联系。

悬浮培养和鸡胚尿囊液抗原制备的H9亚型禽流感疫苗免疫效力比较试验

为了探讨悬浮培养和鸡胚尿囊液培养得到的H9亚型禽流感病毒（AIV）抗原制备的疫苗的免疫效力，试验用3株H9亚型AIV株分别接种微载体悬浮培养的MDCK细胞制备3种悬浮培养的细胞疫苗抗原，以3株H9亚型AIV株接种10日龄SPF鸡胚制备3种鸡胚尿囊液抗原，测定6种抗原液HA效价和鸡胚半数感染量（EID50）；分别使用6种抗原液制备灭活疫苗，免疫21日龄SPF鸡，并在免疫后第21天采血测定HI抗体水平，采血后进行攻毒并在攻毒后第5天进行病毒分离试验。结果表明：两种方式制备的AIV抗原HA效价为7—9lb，鸡胚半数感染量为1×10^6.9-7.9 EID50疫苗免疫后第21天用同源毒株作为工作抗原测定的免疫鸡HI效价差异不大，用异源毒株测定时有一定差异；两种方法得到的抗原制备的疫苗均能获得很好攻毒保护。

接种甲型H1N1流感病毒的鸡胚尿囊液中细菌内毒素的检测

甲型H1N1流感病毒[A／H1N1（2009）]是近年发现的新型流感病毒，该病毒由包括猪流感、禽流感和人流感病毒3种来源基因节段构成，且可能为近期重配并进入人群造成感染和流行。自2009年4月份世界卫生组织首次报道出现甲型H1N1流感病例后，该病毒在全球迅速蔓延，至今我国疫情已相当严重；因此，迫切需要疫苗的研制和生产。

ELISA法检测鸡胚中抗生素残留量的研究及其应用

用ELISA法测定氨苄青霉素、氯霉素在流感疫苗生产用海兰白鸡鸡胚中的残留。实验通过比较空白组0d龄全鸡胚和给药组0d龄全鸡胚中氨苄青霉素、氯霉素的残留量,说明了饮水给药的方法能够建立抗生素残留的动物模型。通过比较10d龄鸡胚尿囊液、卵黄中氨苄青霉素、氯霉素的残留量,说明尿囊液中的残留量明显高于卵黄。通过绘制残留曲线,可以看出氨苄青霉素、氯霉素在海兰白鸡体内蓄积迅速,却消除缓慢。通过实验初步摸索出了氨苄青霉素和氯霉素在鸡胚中的分布、代谢及残留规律,获得了部分生产用鸡胚尿囊液的抗生素残留量数据,为进一步控制流感疫苗生产用鸡胚质量提供技术保障。

鸡传染性支气管炎病毒弱毒株ZZ-V_(35)在鸡胚中的增殖规律

为了研究鸡传染性支气管炎病毒弱毒株(IBV ZZ-V35)在鸡胚中的增殖规律,用尿囊腔接种法给11日龄的SPF鸡胚接种IBV ZZ-V35弱毒,并构建了阳性质粒,采用Taq Man探针实时定量PCR(real-time PCR)法建立了标准曲线,分别检测感染鸡胚尿囊液中36、48、52、56、60、64、68、72、76、80、88、96、120、144h的病毒含量。结果显示,在鸡胚发育不同的时间点IBV ZZ-V35弱毒的拷贝数分别为1.416×106、1.791×106、2.056×106、3.027×106、3.664×106、1.854×106、1.380×106、1.109×106、7.976×105、5.408×105、2.958×105、2.512×105、4.365×104、1.130×104。研究发现,IBV ZZ-V35弱毒的拷贝数在60h达到最高值,即3.664×106。这为IBV ZZ-V35弱毒株疫苗的研究提供了新的依据。

家鸡胚胎发育早期性别鉴定方法的建立

德国莱比锡大学的科研人员研制一种孵化前鉴别家鸡性别的新方法，在家鸡7-10日胚龄时，采用酶免疫测定分析750只褐壳蛋鸡鸡胚尿囊液中的雌二醇、雌酮硫酸盐和睾酮含量，以检测其性别差异。结果显示，测定9日胚龄鸡胚尿囊液的雌酮硫酸盐含量为胚胎发育早期鉴定家鸡性别的可靠方法；

鸡传染性腺胃炎病原的分离与鉴定

自泰安地区的腺胃炎病鸡群中分离到TA毒株,在SPF鸡胚稳定传至第6代,病毒具有致鸡胚规律性死亡和典型致胚胎病变特征。TA株感染鸡胚尿囊液提纯的病毒经负染后电镜观察:病毒粒子大小为80 nm^160 nm,有囊膜,表面有纤突,呈典型冠状病毒形态。病毒无直接血凝性,但经10 g/L胰酶处理后能凝集鸡红细胞。对病毒进行了ELD50测定、对NDV的干扰试验和致病性试验。结果表明,病毒均呈现冠状病毒的特性和与自然病例相似的病理症状。

禽副粘病毒型鹅源分离株YG_(97)和鸡源分离株Y_(98)在体外培养细胞中的形态发生

用禽副粘病毒型鹅源分离株YG97和鸡源分离株Y98的鸡胚尿囊液毒感染原代CEF,制作超薄切片,运用透射电镜观察,结果显示,2株病毒引起CEF细胞器肿胀等轻微的超微结构改变,但不引起细胞的皱缩和裂解。结果表明鹅源YG97分离株和鸡源Y98分离株与NDV强毒株F48E8在致细胞病变特性上的差异。透射电镜观察结果还表明鹅源分离株YG97、鸡源分离株Y98在培养细胞上的形态发生与鸡新城疫病毒F48E8强毒株相似,是由细胞核复制的“纤丝样”结构出核孔在细胞浆内发育而成的。

鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定

一、实验方法1.病毒分离与增殖。从黑龙江省阿城市疑似IB发病鸡群中无菌采集肿大的肾脏、腺胃以及气管等组织样品,将病料和PBS按1:4比例加入PBS缓冲液,研磨成乳状,反复冻融3次后,8000rpm离心30min,取上清加入适量的灭菌生理盐水,上清中加入100IU/ml的青霉素和100μg/ml的链霉素。

鸡传染性鼻炎和鸡新城疫二联灭活疫苗简介

本疫苗系用副鸡嗜血杆菌接种于适宜培养基培养,收获的培养物浓缩灭活后,与灭活的鸡新城疫病毒Ⅳ系弱毒株感染的鸡胚尿囊液混合,再与矿物油与乳化剂混合制成。

制备鸡新城疫病毒抗原的优化实验

本实验主要以NDV弱毒株为实验对象探讨了几种培养因素对鸡胚尿囊液收量和血凝效价的影响。实验选择9、10、11日龄非免疫鸡胚以三个接种剂量分别接种NDVLasota株病毒液于鸡胚尿囊腔中。实验结果表明选用10日龄鸡胚接种,接种剂量为0.1ml/枚时获得尿囊液量和血凝效价为最高。

鸡新城疫病毒抗原制备参数优化相关性研究

本试验主要以NDV弱毒株为试验对象探讨了几种培养因素对鸡胚尿囊液收量和血凝效价的影响。试验选择9、10、11日龄非免疫鸡胚以3个接种剂量分别接种NDV Lasota株病毒液于鸡胚尿囊腔中。结果表明,选用10日龄鸡胚接种剂量为0.1ml/枚时获得尿囊液量和血凝效价为最高。

禽霍乱-新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究(Ⅳ报)——疫苗的田间试验(英文)

1材料与方法 1．1二联营的制备与质量检验 1．1．1毒株来源与二联苗的制备。禽A型为杀性巴氏杆菌（APM）效力检验用强毒为C48．1株，鸡新城疫病毒（NDV）效力检验用强毒为北京株、APM1502株和NDVLaSota株，均购自中国兽药监察所。将APM强毒1502株培养菌液与NDV弱毒LaSota株感染鸡胚尿囊液混合，经甲醛溶液灭活后，按马闻天等的方法制备5批二联油乳剂灭活疫苗（批号05-1—05-5）。

禽腺联病毒的分离及其基因组鉴定

为了获得用于重组载体构建的禽腺联病毒(AAAV),用无菌处理后的鸡粪便样品与鸡胚致死孤儿病毒同时接种SPF鸡胚,根据已发表的AAAV基因序列设计引物,用PCR对致死鸡胚的尿囊液进行检测,结果从1份样品接种的鸡胚尿囊液中扩增到预期大小的AAAVRep和Cap基因片段;对纯化后的PCR产物进行序列测定,将所获序列与已发表的AAAVRep和Cap基因进行比较,其核苷酸序列同源性分别为97.1%和94.6%;将PCR检测阳性的尿囊液进行鸡胚传代,用PCR对不同时间死亡鸡胚的尿囊液进行再次检测,结果均扩增到预期大小的基因片段;提取病毒核酸,电泳观察到约4.7kb的AAAV基因组。说明已成功地从鸡粪便样品中分离到1株AAAV,为重组AAAV载体的构建打下了基础。

大量繁殖流感病毒的实验经验

目的 大量增殖流感病毒 ,收集鸡胚尿囊液 ,满足微生物学病毒实验教学需要。 方法 对无菌的流感病毒毒种液进行一系列稀释 ,接种于 9～ 1 1d龄的鸡胚确定产生流感病毒血凝效价的最佳接种浓度。 结果 效价 1∶640的毒种浓度稀释 40～ 80倍接种鸡胚收获的尿囊液鸡红细胞凝集效价最高。