鸡胚绒毛尿囊膜试验(HET-CAM)评价化妆品原料舒缓功效的创新方法建立和应用

通过对经典的鸡胚绒毛尿囊膜试验(HET-CAM)进行创新改良,并对其评估化妆品原料的舒缓功效方面进行了初步应用。将0.05%浓度的SDS溶液滴加到鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)表面,建立SDS刺激模型,作为阳性对照。将SDS溶液分别与不同浓度的舒缓原料配置成受试溶液,滴加到CAM表面,记录5 min内CAM开始出现出血、血管溶解、凝血的时间,通过计算IS值,评价受试溶液的刺激性。结果表明,0.05%的SDS能引起CAM的中度刺激性,而不同舒缓原料能够不同程度地减轻或完全拮抗0.05%SDS的刺激性。因此,本研究建立了CAM试验评价原料舒缓功效的方法,通过比较IS值大小,可判断不同原料拮抗SDS刺激性的程度,从而对原料的舒缓功效进行评价。

鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型在中药研究中应用方法探讨

本文对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型 (鸡胚CAM )进行改良 ,尝试用中药血清药理学方法、组织匀浆、中药多糖及生药等给药方式 ,将本血管活性整体模型引入中医药研究中。

人卵巢癌鸡胚尿囊膜血管生成模型的建立

目的 :研究人卵巢癌鸡胚尿囊膜血管生成模型的建立方法。方法 :在鸡胚尿囊膜上接种卵巢肿瘤细胞株 ,根据接种细胞株的种类分为HO8910PM、TYK、SKOV3等 3组 ,每组根据接种细胞数量的不同分为 8个亚组 ,阴性对照组、1× 10 4 、1× 10 5、1× 10 6 、1×10 7、1× 10 8、1× 10 9、1× 10 10 组 ,每一亚组 10只 10日龄鸡胚 ,根据分组在鸡胚尿囊膜上接种相应的细胞数。孵育 3d后观察比较血管生成与接种细胞种类、数量的关系。结果 :将细胞株HO8910PM、TYK、SKOV3接种于鸡胚尿囊膜上后 ,随着接种细胞数量的增多 ,血管生成逐渐增强 ,与阴性对照PBS相比 ,细胞株HO8910PM、TYK、SKOV3引起血管显著生成的细胞数每只鸡胚分别为 1× 10 6 ,1× 10 7,1× 10 7;能使血管生成达到高峰的接种细胞数量分别为每只鸡胚 1× 10 8、1× 10 9、1× 10 9。结论 :应用人卵巢肿瘤细胞株接种鸡胚尿囊膜建立肿瘤血管生成模型 ,适宜的接种细胞数为每只鸡胚 1× 10 8～ 1× 10 9。

三氧化二砷对鸡胚尿囊膜血管形成的抑制作用

背景与目的:三氧化二砷(As2O3)注射液,临床对肝癌等实体瘤的治疗具有一定的疗效,其作用机制有待阐明。本研究探讨三氧化二砷注射液对鸡胚尿囊膜(ch ick embryo chorioallantoic m embrane,CAM)血管生成的影响。方法:应用CAM模型和计算机图像分析技术,观察三氧化二砷注射液对血管形成的影响。结果:三氧化二砷注射液10、20和40μg/m l作用3 d后,CAM上的血管面积分别为(25.7±4.2)%、(24.7±2.5)%和(21.5±6.7)%,与生理盐水对照组[血管面积为(30.7±4.6]%]相比,差异有显著性(P<0.05,P<0.01,P<0.01);不同剂量组间比较,差异无显著性(P>0.05)。结论:三氧化二砷注射液对于CAM血管形成具有较强的抑制作用,可以研究试用于抗肿瘤血管形成治疗。

人大肠癌鸡胚尿囊膜移植模型的建立及血管生成特征的观察

目的研究人大肠癌腺癌细胞株HT-29鸡胚尿囊膜移植模型建立的方法,观察和分析其血管生成的特征。方法将不同浓度的人大肠癌腺癌细胞株HT-29接种于鸡胚尿囊膜(chick embryo chorioallantoic membrane,CAM),观察影响大肠癌鸡胚移植模型瘤体成活的因素、瘤体生长特征和血管生成情况。结果建立了人大肠癌CAM移植模型。移植模型瘤体易于生长,具有较强的血管生成作用。结论该模型易于复制,能动态观察大肠癌的血管生成过程,可用于大肠癌的生物学行为、药物筛选等领域的研究。

鸡胚尿囊膜模型血管生成定量指标的研究

目的 :确定鸡胚尿囊膜模型血管生成指标 .方法 :3 0只发育良好的 1 0日龄鸡胚分为 3组 (每组 1 0只 ) :rbFGF,kringle 5和NS组 .分别吸取rbFGF ,kringle5 ,NS液 1 0 μL于甲基纤维素膜上 ,加于鸡胚CAM上 .用计算机图像分析系统对鸡胚CAM血管生成的血管数目 (VN)、血管平均管径 (VD)、血管面积 (VA)、血管面积 /鸡胚CAM面积之比值 (VA/CAM)四项指标进行定量 .结果 :Kringle 5组的VN ,VA ,VA/CAM值显著低于生理盐水 (NS)对照组 (P <0 0 5 ) .rbFGF组的VN ,VA ,VA/CAM值显著高于NS对照组 (P <0 0 5 ) ,各组间VD无显著差异 (P >0 0 5 ) .血管定量指标VN和VA ,VA/CAM值之间的相关系数分别为 :0 967,0 973 (P <0 0 1 ) ;回归系数分别为0 947,0 93 5 (P <0 0 1 ) .结论 :与常规定量指标VA相比 ,VA/CAM值更为客观有效 .

数字图像分析技术在鸡胚卵黄囊膜血管形成模型中的应用

目的应用数字图像处理技术客观、准确和快速地对鸡胚卵黄囊膜(chick embryo yolk sac membrane,YSM)血管图像进行定量分析,为促血管和抗血管生成药物的评价和筛选提供有效可靠的技术支持。方法应用OPTPRO2007图像采集系统和Image-proplus6.0图像分析软件对鸡胚卵黄囊膜血管图像背景处理和血管面积及血管密度等参数进行客观、准确地测量。结果建立了有效的鸡胚卵黄囊膜数字图像血管自动分析方法和步骤并通过药物实验对鸡胚卵黄囊膜血管图像进行了参数检测和统计分析。结论应用OPTPRO2007图像采集系统和Image-proplus6.0图像处理分析软件对鸡胚卵黄囊膜图像血管进行自动分析的方法不仅操作简便而且可较准确、快速、客观地反映鸡胚血管新生情况,优于鸡胚尿囊膜血管发生模型的常规人工目测血管计数方法。

鸡胚绒毛尿膜囊模型在肿瘤血管形成研究中的应用

鸡胚绒毛尿膜囊（CAM）模型作为研究血管形成及抗血管形成影响因素的体内模型已被广泛应用,尤其在肿瘤血管形成方面的研究,近年来成为研究热点之一。本文综述了CAM模型肿瘤血管形成方面的研究,提出血管形成在肿瘤生长和转移中的重要性、CAM模型研究肿瘤血管形成的优势及应用。

人肝癌鸡胚尿囊膜移植瘤模型的建立及血管生成特征的观察

目的:研究人肝癌细胞株Bel-7402鸡胚尿囊膜移植瘤模型建立的方法,观察和分析其血管生成的特征。方法:将不同浓度的人肝癌细胞株Bel-7402接种于鸡胚尿囊膜(chick embryo chorioallantoic membrane,CAM),观察影响肝癌鸡胚尿囊膜移植瘤模型瘤体成活的因素、瘤体生长特征和血管生成情况。结果:建立了人肝癌细胞CAM移植瘤模型。移植瘤模型瘤体易于生长,具有较强的血管生成作用。结论:该移植瘤模型易于复制,能动态观察肝癌的血管生成过程,可用于肝癌的生物学行为、药物筛选等领域的研究。

巴戟天寡糖促鸡胚绒毛尿囊膜及大鼠心肌梗死模型血管生成的研究

目的：观察应用巴戟天寡糖后CAM与大鼠AMI后缺血心肌血管生成及其作用机制。方法：制备巴戟天寡糖含药血清，采用鸡胚绒毛尿囊膜（chorioallantoic membrane，CAM）模型及大鼠急性心肌梗死（AMI）模型，以空白血清、假结扎、AMI模型、麝香保心丸为对照，观察巴戟天寡糖对治疗心血管再生的作用。结果：1．巴戟天寡糖含药血清组和bFGF组主干血管向载体物靠拢，中小血管明显增生，尤其是小血管以载体为中心呈辐射状生长显著。2．巴戟天寡糖大、中、小剂量组使一、二级血管数目显著增加，但低于bFGF组。3．心肌组织切片一般彤态学改变：假结扎组毛细血管增生不明显；模型组可见少量毛细血管增生；大剂量组和麝香保心丸组可见显著增生的毛细血管。4．AMI后大鼠缺血心肌MVD显著增多，说明心梗后心肌可发生代偿性的血管新生。与模型组相比，巴戟天寡糖中、大剂量组能显著增加MVD但作用弱于麝香保心丸组；小剂量组MVD与模型组，无显著性差别。5．AMI后大鼠缺血心肌VEGF、bFGF蛋白显著增高，巴戟天寡糖中、大剂量组能显著增加VEGF、bFGF光密度值，但作用均弱于麝香保心丸组；小剂量组VEGF、bFGF光密度值与模型组无显著性差异。结论：1．巴戟天寡糖可促进鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成。2．巴戟天寡糖可促进AMI后大鼠缺血心肌的血管生成，改善缺血心肌局部的侧支循环，其促血管生成作用与其可促进AMI后缺血心肌VEGF、bFGF蛋白的表达有关。相关机制还需进一步深入探讨。

鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型的应用

本文综述了鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型在药物促血管生成和抑制血管生成作用研究中的应用，对药物载体的选择及药物置入时间的选择等进行了介绍。

鸡胚绒毛尿囊膜在抗血管形成研究中的应用

鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)是研究血管形成与抗血管形成的理想体内模型。鸡胚血管网到第8d发育成毛细血管丛,快速增长持续到第11d,而此时机体的免疫系统尚未完全建立,对异物的刺激不产生排异反应,便于观察诱导剂及抑制剂对机体免疫的影响。CAM已广泛的应用于肿瘤的研究中,包括对血管形成及抗血管形成的研究。目前CAM用于研究血管形成在子宫内膜异位症(EMs)发病中的作用机制,是理想的研究EMs发病原因的体内模型。

纤维母细胞生长因子10对鸡胚尿囊膜血管形成的作用

目的探讨纤维母细胞生长因子10(FGF10)对鸡胚尿囊膜血管生长作用。方法应用胶原蛋白共培养方法,分别于培养液中加入100ng·mL-1的FGF10(FGF10组)、100ng·mL-1 FGF10和20μmol·L-1 SU5402(SU5402组)作用于鸡胚尿囊膜血管内皮细胞组织块,同时设立空白对照组,观察3组新生血管的形成状况。结果与空白对照组比较:FGF10组新生血管形成面积显著增加(P<0.001);SU5402组中SU5402可抑制FGF10的作用,其新生血管形成面积显著下降(P<0.001)。结论 FGF10能促进鸡胚尿囊膜新生血管的形成。

魟鱼骨素对鸡胚绒毛尿囊膜血管形成的影响

观察鱼骨素对鸡胚绒毛尿囊膜血管形成的影响。采用两种鸡胚绒毛尿囊膜技术 ,分别观察与检测鱼骨素对血管形成的影响。结果表明 ,鱼骨素对鸡胚绒毛尿囊膜血管形成具有显著的抑制作用。提示鱼骨素可能通过抑制肿瘤血管形成 。

生殖器官组织鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型的建立

生殖器官组织鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型的建立张树成王弘毅许如华程捷王介东血管生成是指从已存在的血管中生成新的毛细血管的过程。体内大部分血管一经发育完全后呈高度的稳定性，除创伤修复及一些疾病（如肿瘤）外，血管生成作用缓慢。但是，女性生殖器官是唯一例外，...

活血化瘀中药对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响

目的观察常用活血化瘀中药赤芍、当归、红花、川芎、丹参、黄芪及复方当归补血汤、血府逐瘀汤、芎芍胶囊等对鸡胚绒毛尿囊膜(chorioall antoic membrane,CAM)新生血管生成的影响。方法制备CAM模型,分别应用赤芍、当归、红花、川芎、丹参、黄芪及当归补血汤、血府逐瘀汤、芎芍胶囊的含药血清,观察CAM血管生成的情况,同时,设立生理盐水对照组、空白血清对照组、空白对照组及碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)阳性对照组。结果所选药物及bFGF皆有促进CAM新生血管生成的作用,其中,丹参及当归补血汤、血府逐瘀汤、芎芍胶囊等复方在血管生成及血管计数方面,均明显优于生理盐水对照组、空白血清对照组及空白对照组,与阳性对照药bFGF的作用相当;中药复方的作用优于丹参之外的其他单味中药。结论活血化瘀中药丹参及当归补血汤、血府逐瘀汤、芎芍胶囊具有较好的促进CAM新生血管生成的作用。本实验从一个侧面阐明了活血化瘀中药及方剂治疗缺血性疾病的作用机理,同时,研究也体现了中药复方应用的科学依据。

麝香保心丸对鸡胚绒毛尿囊膜及培养的血管内皮细胞的促血管生成作用

目的 :探讨麝香保心丸在鸡胚绒毛尿囊膜模型及培养的微血管内皮细胞系统中的促血管生成作用。方法 :分别以重组碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF ,贝复济 )和生理盐水为阳性和阴性对照 ,作用于绒毛尿囊膜 (chrioallantoicmembrane ,CAM) ,通过一级、二级血管计数 ,初步评价麝香保心丸的促血管生成活性 ;并通过观察它对培养的牛肾上腺微血管内皮细胞增殖及管腔结构形成的影响 ,验证其促血管生成效应 ;同时检测麝香保心丸作用于培养的人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子 (VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的mRNA表达及其上清液中VEGF、bFGF含量 ,初步探索其作用机理。结果 :麝香保心丸组CAM上血管数比生理盐水组明显增加 ;麝香保心丸组内皮细胞及管腔数目均较生理盐水组明显增多 ,前者细胞表达VEGF和bFGFmRNA明显增高 ,上清液中VEGF和bFGF含量明显增多。结论 :麝香保心丸能促进CAM及培养的微血管内皮细胞的血管生成。