五种化妆品的皮肤刺激性:平皿法鸡胚试验评价

背景:评价化妆品皮肤刺激性,传统多采用兔皮肤刺激实验,即将化学物涂抹在动物背部去毛的皮肤上,观察其变化,这些方法费时,费力,且给动物带来很大痛苦。各国实验室都在寻找动物替代实验的方法。目的:采用平皿法鸡胚试验方法作为替代方法评价化妆品引起人体皮肤不良反应潜在可能的可行性。设计、时间及地点:动物替代实验,于2008-03/05在中国检验检疫科学研究院毒理学实验室完成。材料:无特定病原体级受精鸡卵,购于北京梅里亚通实验动物技术有限公司。方法:将鸡胚置于平皿中,孵育第8天用于试验,记录出现出血,血管裂解及凝血的鸡胚数目,得出刺激因子X,以判断待测物质是否具有人体皮肤不良反应潜在可能。并与人体斑贴试验结果进行比较。主要观察指标:刺激因子X。结果:5种化妆品中2种有人体皮肤不良反应潜在可能,刺激因子X>5。与人体斑贴试验结果经校正χ2检验比较,差异无显著性意义,其灵敏度、特异度、阳性预测价值、阴性预测价值均为1。结论:平皿法鸡胚试验和人体斑贴试验的结果一致,该方法可以用来评价化妆品的皮肤刺激性。

中草药抗禽流感病毒鸡胚试验研究

为了筛选出高效的抗禽流感病毒(AIV)中草药,采用鸡胚试验,对常用清热解毒中草药的体外抗AIV效果进行了测定。结果表明,矮地茶、半边莲、白花败酱草、侧柏叶、大黄、虎杖、菊花、商陆、夏枯草、地锦草、贯众、诃子、仙鹤草对禽流感病毒在体外具有较好的灭活作用。

鸡胚绒毛尿囊膜试验(HET-CAM)评价化妆品原料舒缓功效的创新方法建立和应用

通过对经典的鸡胚绒毛尿囊膜试验(HET-CAM)进行创新改良,并对其评估化妆品原料的舒缓功效方面进行了初步应用。将0.05%浓度的SDS溶液滴加到鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)表面,建立SDS刺激模型,作为阳性对照。将SDS溶液分别与不同浓度的舒缓原料配置成受试溶液,滴加到CAM表面,记录5 min内CAM开始出现出血、血管溶解、凝血的时间,通过计算IS值,评价受试溶液的刺激性。结果表明,0.05%的SDS能引起CAM的中度刺激性,而不同舒缓原料能够不同程度地减轻或完全拮抗0.05%SDS的刺激性。因此,本研究建立了CAM试验评价原料舒缓功效的方法,通过比较IS值大小,可判断不同原料拮抗SDS刺激性的程度,从而对原料的舒缓功效进行评价。

应用鸡胚接种试验研究中草药的抗新城疫病毒作用

为了筛选出高效的抗新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)中草药,采用鸡胚接种试验测定了常用清热解毒中草药的体外抗NDV作用。结果表明矮地茶、侧柏叶、贯众、诃子、虎杖、白蔹、夏枯草、黄连对新城疫病毒具有较好的杀灭作用。

鸡胚尿囊膜(HET-CAM)眼刺激替代试验对产品及原料评价的比较

目的比较鸡胚尿囊膜试验(HET-CAM)作为一种眼刺激替代方法对产品或原料的评价。方法采用HET-CAM和兔眼Draize试验方法,对19种原料和23种化妆品及家用洗涤产品眼刺激性进行检测,对体内体外试验的结果进行统计比较。结果比较体内体外试验,原料和产品的kappa系数分别为0.826,0.531;灵敏度分别为100%,81.8%;特异度分别为85.7%,77.8%。结论 HET-CAM可作为Draize试验的替代试验,HET-CAM系统更适合对单纯化学品原料进行眼刺激试验。

鸡胚绒毛尿囊膜试验评估氨基酸表面活性剂与常规表面活性剂的眼刺激性

通过鸡胚绒毛尿囊膜试验(Het-Cam Test)研究氨基酸表面活性剂与常规表面活性剂对眼的刺激性。分别配制质量分数为1%的被测溶液,取0.3 m L滴加在鸡胚绒毛尿囊膜上反应5 min,对试验过程录影并拍照,根据刺激评分(IS)法测评结果。由试验结果可知,IS(椰油酰甘氨酸)=4.93,IS(月桂酸肌氨酸钠)=4.95,IS(椰油酰丙氨酸钠)=4.96,IS(月桂醇硫酸酯铵)=9.59,IS(月桂醇聚醚硫酸酯钠)=9.25,IS(月桂酰两性基乙酸钠)=9.10,IS(烷基糖苷)=4.82。除烷基糖苷外,氨基酸表面活性剂较其他被测常规表面活性剂温和。

鸡胚绒毛尿囊膜试验研究不同香波对眼的刺激强度

通过鸡胚绒毛尿囊膜试验(Het-Cam Test)研究6款香波对眼的刺激强度。分别配制质量分数1%的香波溶液,取0.3 m L溶液滴加在鸡胚绒毛尿囊膜上,反应5 min,对试验过程录影并拍照,并根据刺激评分(IS)法测评结果。结果发现:(1)由索芙特提供的焗油修复类型和氨基酸表活无硅类型香波为轻度刺激品,清爽去屑类型香波为中度刺激品,P品牌焗油护理香波为轻度刺激品,清爽去屑香波为中度刺激品,Z品牌无硅生姜香波为轻度刺激品;(2)去屑类香波的刺激性比其他品类略高;(3)在本试验所采用的香波样品中,含聚二甲基硅氧烷(PDMS)的香波和不含PDMS的香波都是轻度刺激品,但含PDMS的香波刺激评分(IS)比不含PDMS的香波低。

鸭病毒性肝炎实验室诊断方法-鸡胚中和试验的观察

鸭病毒性肝炎是由鸭肝炎病毒(DHV)引起的一种雏鸭高度致死性传染病;该病主要侵害4周龄以内的雏鸭,特别是不足一周龄的无母源抗体的雏鸭最易感,病鸭突然发病,病程短促,数小时即死亡,死亡率高达90%。DHV有三种血清型,无交叉保护作用。目前,I型呈世界性分布,II型和III型鸭病毒性肝炎分别局限于英国和美国,在国内,I型鸭病毒性肝炎有多次流行,鸭病毒性肝炎病毒(DHV)在鸡胚上增值,引起鸡胚规律死亡,所以鸡胚中和试验是常规方法,在该病的检测上仍有切实的应用价值,选择合适的鸡胚适应毒株对鸡胚中和试验是非常关键和重要的。通过一系列实验,筛选确定(DHV)的适用毒株,毒力适中,鸡胚死亡规律整齐,方便实验判断,几年来检测进境水禽6群,皆无鸭病毒性肝炎鸡胚中和母源抗体,检测免疫群鸡胚中和抗体滴度40～80倍,阳性对照血清中和保护滴度1 280倍,毒株稳定实验效果满意。

10种常用防晒剂的鸡胚绒毛尿囊膜试验和人体皮肤斑贴试验研究

根据使用频率选用了4-甲基苄亚基樟脑、甲氧基肉桂酸乙基己酯、奥克立林、水杨酸乙基己酯、胡莫柳酯、二甲基PABA乙基己酯、二苯酮-3、双-乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪、苯基苯并咪唑磺酸和丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷等具有代表性的10种有机防晒剂,通过鸡胚绒毛尿囊膜试验和人体皮肤斑贴试验分别对每种防晒剂的刺激性进行了评价。HET-CAM实验结果表明,苯基苯并咪唑磺酸和二苯酮-3具有强刺激性,其他8种防晒剂具有中度刺激性;人体皮肤斑贴试验结果显示,苯基苯并咪唑磺酸和二苯酮-3对皮肤有不良反应,其他8种防晒剂对皮肤无不良反应。

鸡胚绒毛尿囊膜试验评估常用防腐剂和助防腐剂的眼刺激性

通过鸡胚绒毛尿囊膜试验评价几种防腐剂或助防腐剂的眼刺激性。分别为:1%苯氧乙醇、5%1,2-戊二醇、0.15%甘油辛酸酯、1%1,2-己二醇、0.1%乙基己基甘油、0.5%K900、1%K940、0.5%K940、1.5%山梨坦辛酸酯、0.2%氯苯甘醚。由结果可知,IS(1%1,2-己二醇)=0.77、IS(0.1%乙基己基甘油)=0.93,刺激程度属于无刺激;IS(0.5%K900)=1.23、IS(0.5%K940)=1.77、IS(0.2%氯苯甘醚)=1.77、IS(0.15%甘油辛酸酯)=1.93、IS(1.5%山梨坦辛酸酯)=1.93、IS(5%1,2-戊二醇)=3.05、IS(1%苯氧乙醇)=3.27属于轻刺激;IS(1%K940)=8.07属于中等刺激。

用正交试验法分析四种表面活性剂的复配性能

用正交试验设计法研究月桂醇聚醚硫酸酯钠、十二烷基硫酸钠、椰油酰胺丙基甜菜碱和月桂酰肌氨酸钠复配的最佳使用比例,摸索四种表面活性剂对泡沫、洗后皮肤水分含量及刺激性的影响。结果显示,在给定的因素水平数里,泡沫高度的优方案为AES:13%,K12:4%,CAB:6%,LS30:5%;洗后皮肤水分含量的优方案为AES:14.5%,K12:3%,CAB:6%,LS30:2%;刺激性最小的优方案为AES:11.5%,K12:1%,CAB:6%,LS30:3%。通过试验数据分析可知,AES对泡沫高度和鸡胚试验评分有显著影响;K12对泡沫高度和洗后皮肤水分含量有显著影响;CAB对泡沫高度有影响;而LS30有助于降低鸡胚评分,在3%时效果最好。

3种血清学试验检测鸡血清中新城疫抗体的比较研究

以鸡胚中和试验(NT)、血凝抑制试验(HI)和琼脂免疫扩散试验(AGID)分别检测相同36份鸡血清样品。将每个样品的抗体滴度转化为-logX后进行统计分析。对3种血清学试验所得到的3组数据进行方差分析及相关关系的检验。经方差分析,NT组与AGID组、HI组与AGID组之间差异极显著;NT组与HI组之间差异不显著。相关关系检验,NT组与HI组、NT组与AGID组、HI组与AGID组的相关系数分别为0.973 1、0.843 1、0.884 8,3组之间的差异均极显著。结果表明,免疫接种后一段时间内,鸡体内疫苗诱导的中和抗体滴度与HI抗体滴度基本相平行;AGID检出的抗体滴度与NT检出的中和抗体滴度及与HI试验检出的HI抗体滴度有密切的线性关系。AGID检测的NDV抗体平均滴度比NT、HI检测的分别低1.640 8(1/25.45)-1.471 1(1/24.89)、1.731 8(1/25.69)-1.509 5(1/25.01)。

鸡胚致死率作为检验鸡大肠埃希菌致病力指标的探讨

为探讨鸡胚致死率在检验鸡大肠埃希菌致病力方面的应用潜力，试验采用SPF级12日龄鸡胚和1日龄公雏鸡分别接种鸡大肠埃希菌菌株，检测20株鸡大肠埃希菌菌株对12日龄鸡胚和1日龄公雏鸡的致死率的相关性。结果显示，8株来源于患败血症鸡只的菌株致病力比较高，鸡胚致死率达到40％～70％；而来源于粪便的12株菌株中，10株菌株的致病力较低，其鸡胚致死率在0％～20％之间；雏鸡致死率与鸡胚致死率是相关的。表明鸡胚致死试验可反映出大肠埃希菌的毒力强弱，即鸡胚致死率可作为检验鸡大肠埃希菌致病力强弱的一种方法。

洗洁精对鸡胚绒毛尿囊膜血管的刺激性评价

目的探讨鸡胚尿囊膜试验(Het-Cam)在洗洁精刺激性评价中应用的可行性。方法将5款洗洁精样品配制成1.5%的水溶液,取100μL滴加在SPF级鸡胚尿囊膜上,参照出入境检验检疫行业标准SN/T 2329-2009《化妆品眼刺激性/腐蚀性的鸡胚尿囊膜试验》的标准刺激评分(IS)法,对样品的刺激性进行评分。结果样品C和B刺激性评分较高,分别为10.07和8.84,而样品A和D刺激性评分较低,分别为5.69,6.75。上述4个样品相应的总活性物含量也分别为28.21%、15.34%和16.37%、17.14%。结论洗洁精刺激性与洗洁精中总活性物含量具有一定的相关性。Het-Cam在洗洁精刺激性评价方面既具有可行性。

中药虎杖体外抗新城疫病毒活性试验

为了筛选出有效的防治新城疫的中草药,采用鸡胚接种试验,对虎杖煎煮液的体外抗新城疫病毒活性进行了测定,结果表明:中药虎杖在体外对新城疫病毒具有较好的抑制作用。

中药大黄体外抗新城疫病毒活性试验

为了筛选出有效的防治新城疫的中草药,采用鸡胚接种试验,对大黄煎煮液的体外抗新城疫病毒活性进行了测定,结果表明,中药大黄在体外对新城疫病毒具有较好的抑制作用。

中药“感新双煞”体外抗新城疫病毒试验

采用鸡胚接种试验,对中药方剂"感新双煞"的体外抗新城疫病毒效果进行了测定,结果表明该方剂在体外对新城疫病毒具有较好的杀灭作用。

副鸡嗜血杆菌的分离鉴定

副鸡嗜血杆菌(Haemophilus paragallinarum,HPG)是鸡传染性鼻炎的病原菌。近年来,北京、陕西、四川等地证明了该病的发生。为了了解该病在山东省的流行状况,从山东德州地区5个鸡场的20只疑似鸡传染性鼻炎鸡体内共分离到6株细菌,经细菌分离培养、生化试验、鸡胚接种试验和16s rDNA基因序列分析等方法鉴定为副鸡嗜血杆菌。并经玻片凝集试验、Dot-ELISA、血凝试验分型研究,证实6株分离菌株均为副猪嗜血杆菌A型。从而为以后鸡传染性鼻炎的免疫治疗提供理论依据。