铝对体外培养鸡脾淋巴细胞IC_(50)的测定

铝（Aluminum，Al）是地球上蕴藏量最多的金属元素，铝的免疫毒性作用近来已受到国内外学者的关注，已明确高剂量铝对实验动物的免疫功能有明显抑制。Synzynys^[1]研究表明，氯化铝具有明显的免疫毒性。铝暴露对鸡大脑组织钙稳态将产生失调影响^[2]。目前，国内外铝对体外培养鸡脾淋巴细胞毒性作用的研究未见有文献。本试验以体外培养的鸡脾脏淋巴细胞为试验对象，研究不同浓度铝对免疫细胞毒性作用。

玉屏风散对鸡脾脏淋巴细胞体外增殖的影响

将不同浓度的玉屏风散加入到鸡脾脏淋巴细胞中,培养24、48、72 h,采用MTT法观察其对鸡脾脏淋巴细胞增殖的影响。结果表明,不同浓度的玉屏风散均能协同ConA促进鸡脾脏淋巴细胞增殖的作用,并以500 mg/mL的玉屏风散培养48 h增殖作用最强。

表达鸡白细胞介素1β基因重组鸡痘病毒的构建

从伴刀豆球蛋白 (ConA)刺激的鸡脾细胞中扩增出鸡白细胞介素 1β(ChIL 1β)编码区基因 ,通过与GenBank上登录的ChIL 1β序列 (Y15 0 0 6 )进行比较。结果显示 ,在ChIL 1β基因编码区的 10 4位、30 6位、387位和 4 32位的核苷酸发生了变化 ;相应的氨基酸在 35位也发生了变化。虽然 30 6位、387位和 4 32位的核苷酸发生了变化 ,但没有引起氨基酸变化 ,说明这一区域的氨基酸具有一定的保守性。从氨基酸的性质上看 ,35位 (Asp→Ala)由酸性氨基酸变为中性氨基酸 ,这可能是同一种属的不同品种间的正常变化。以鸡痘病毒 (FPV )为活载体 ,构建了表达ChIL 1β的重组鸡痘病毒rFPV IL 1β。应用XTT/PMS方法检测rFPV IL 1β感染的成纤维细胞 72h后表达ChIL 1β的生物活性 ,效价为 1.0× 10 5U /mL ,证明FPV能有效地表达ChIL 1β。

MTT法测定自制多糖注射剂对鸡胚成纤维细胞和鸡脾淋巴细胞增殖的最适浓度

为探讨自制多糖注射剂（板蓝根、黄芪、淫羊藿的混合多糖注射剂）促进鸡胚成纤维细胞和鸡脾淋巴细胞增殖的最适浓度，用MTT法分别检测加入不同浓度的混提多糖注射剂的鸡胚成纤维细胞和鸡脾淋巴细胞的OD值。结果表明，自制多糖注射剂促进鸡胚成纤维细胞和鸡脾淋巴细胞增殖的最适浓度分别是25μg／ml、50μg／ml。

镉对体外培养鸡脾淋巴细胞膜蛋白组分影响的研究

以分组对比的方法(加镉组、对照组)研究镉对体外培养的鸡脾淋巴细胞膜蛋白组分的影响。通过体外分离培养鸡脾淋巴细胞,加镉组在培养体系中加入终度为10μmoL/L氯化镉,而对照组加入同体积10.0mmoL/L的PBS,分别培养12、24、36、48和72h后收集细胞,提取膜蛋白,用SDS-PAGE的方法对膜蛋白组分进行分析。结果表明:区带Ⅲ、Ⅳ、Ⅶ蛋白的百分含量变化不明显;区带Ⅰ和区带Ⅷ蛋白的百分含量呈增加趋势,区带Ⅱ、区带Ⅴ和区带Ⅸ蛋白的百分含量降低,而且在48和72h加镉组的电泳图前沿出现了高分子聚合物,分子量为70900.00。可以得出镉对体外培养的鸡脾淋巴细胞的膜蛋白组分产生损伤的结论。