座滴法制备鸡蛋白溶菌酶晶体与生长因素探究

蛋白质晶体学的不断发展,使得蛋白质晶体的结晶方法也日趋增多。首次采用了座滴法结晶法,探究不同浓度鸡蛋白溶菌酶溶液,不同温度、NaCl浓度,是否添加mPEG对晶体形貌尺寸的影响。通过显微镜以及扫描电镜观察蛋白质晶体形貌特征,不同条件下的晶体形貌变化,最终获得晶体生长的最适温度以及浓度条件。

DMSO对鸡蛋白溶菌酶溶液变性的影响(英文)

利用差示扫描量热(DSC)和温度调制差示扫描量热(MDSC)研究了鸡蛋白溶菌酶在纯水及二甲基亚砜(DMSO)/水混合溶剂中的热变性过程,探讨了酶的浓度、扫描速率和共溶剂的含量对热变性行为的影响规律.在纯水溶液中,溶菌酶的变性焓("Hm)随酶浓度的增大而增大.而在DMSO/水混合溶剂中,变性温度(Tm)随DMSO体积分数的增大向低温方向移动,变性峰变低变宽;当DMSO体积分数达到70%后,热变性曲线变成了一条光滑的直线.另外,在纯水溶液中溶菌酶的MDSC图除了出现DSC中可观察到的主吸热峰(I)外,在峰(I)的前面还出现一个小而对称的吸热峰(II),并且当体系中有DMSO存在时也未能观察到此峰.当溶菌酶浓度增大时,Tm(II)移向低温,"Hm(II)减小,Tm(I)与Tm(II)之间的距离变长.吸热峰(II)的出现被认为是由于水溶液中溶菌酶二聚体的可逆离解造成的.

空间生长的溶菌酶晶体的结构研究

作为一种酶,动物溶菌酶能选择性地切断细菌胞壁肽聚精中N-乙酰葡糖肢的某种糖苷键.鸡蛋清溶菌酶由含129个氨基酸的肽键构成,并含有4个二硫键.该酶是最早被测定三维结构的酶,目前已知三斜、单斜、正交和四方等几种晶型鸡蛋清溶菌酶的晶体结构,近年来还解得了与底物类似物复合物的1.5(?)分辨率的结构。