鸡血藤总黄酮对大鼠肾缺血再灌注损伤氧化应激及炎症反应的影响

目的 探讨鸡血藤总黄酮对大鼠肾缺血再灌注损伤氧化应激及炎症反应的影响。方法 SD大鼠分为假手术组、模型组及鸡血藤总黄酮低、中、高剂量组(40、80、160 mg/kg),连续灌胃给药7 d后,通过夹闭双侧肾蒂法复制肾缺血再灌注损伤模型,尿素酶-谷氨酸脱氢酶法、肌氨酸氧化酶法检测BUN及Scr水平,HE染色法观察肾组织病理变化,酶联免疫吸附法检测氧化应激指标及炎症反应指标,Western blot法检测肾组织NF-κB p65、Nrf2及HO-1蛋白表达。结果 与模型组比较,鸡血藤总黄酮组大鼠血清BUN、Scr水平降低(P<0.05,P<0.01),肾组织病理损伤缓解,血清及肾组织MDA、TNF-α、IL-6水平降低(P<0.05,P<0.01),CAT、SOD活性及IL-10水平升高(P<0.05,P<0.01),肾组织Nrf2、HO-1和细胞浆NF-κB p65蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),细胞核NF-κB p65蛋白表达降低(P<0.01)。结论 鸡血藤总黄酮具有保护大鼠肾缺血再灌注损伤作用,该作用与活化Nrf2/HO-1信号通路,阻止NF-κB p65核转位,进而降低氧化应激水平及抑制炎症反应有关。

鸡血藤总黄酮对血虚小鼠抗贫血作用及机理研究

目的观察鸡血藤总黄酮(STF)对化学因素所致的血虚小鼠外周血象及血清白细胞介素-3(IL-3),促红细胞生成素(EPO)水平的影响。方法采用盐酸苯肼(APH)、环磷酰胺(CTX)复合造模,建立血虚小鼠模型,检测外周血象RBC,HGB,HCT及血清IL-3,EPO水平。结果与正常对照相比,模型小鼠的外周血象RBC,HGB,HCT,血清中的IL-3降低,而EPO升高(P<0.01),鸡血藤总黄酮各剂量组的外周血象RBC,HGB,HCT,IL-3水平高于模型对照组(P<0.05)、EPO水平显著低于模型对照组(P<0.01)。结论鸡血藤总黄酮具有抗贫血作用,其作用机理可能与促进机体分泌IL-3、调节EPO水平,促进红系造血有关。

鸡血藤总黄酮对酒精性肝损伤的保护作用及机制

目的观察鸡血藤总黄酮对乙醇所致肝损伤小鼠的保护作用,并初步探讨其抗肝损伤作用机制。方法健康昆明种小鼠60只,随机分组法分为5组:空白组,模型组、鸡血藤总黄酮低、中、高剂量组。除空白组给予生理盐水20 ml/kg,灌胃给药外,其余各组于实验首日开始,给予鸡血藤总黄酮低(0.1 g/kg)、中(0.2 g/kg)、高(0.4 g/kg),1次/d,连续7 d,末次给药1 h后,模型组和鸡血藤总黄酮低、中、高剂量组一次性给予56度红星二锅头10 ml/kg,空白组予等量生理盐水后,测定小鼠的耐受酒精时间和醉酒时间、脏器系数、肝功改善情况、氧化应激指标、肝组织病理改变及对肝线粒体膜电位(Δψm)和呼吸链的影响。结果鸡血藤总黄酮可显著减轻小鼠醉酒症状;且高剂量组药物对肝脏保护作用效果高于低剂量组;高、中剂量组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TB)活性均明显低于模型组(P<0.05);鸡血藤总黄酮高、中剂量组可明显提高肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,降低丙二醛(MDA)含量,与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05),低剂量组作用则不明显;高剂量组还可明显减轻由乙醇所致肝组织病理学损伤;鸡血藤总黄酮高、中剂量组能肝脏线粒体膜电位,提高线粒体呼吸链酶的活性。结论鸡血藤总黄酮能明显改善乙醇所致肝损伤,抑制氧化应激、减轻线粒体损伤是其抗肝损伤主要作用机制。

鸡血藤总黄酮对大鼠急性心肌缺血的保护作用

目的观察鸡血藤总黄酮对实验性急性心肌缺血大鼠的保护作用。方法采用结扎左冠状动脉前降支方法复制大鼠急性心肌缺血模型,观察鸡血藤总黄酮对大鼠不同时间点心电图及心肌组织形态学的影响,然后生化分析法检测血清中谷草转氨酶(GOT)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性和心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的水平。结果与模型组比较,鸡血藤总黄酮40和80 mg/kg剂量组均能显著降低血清中GOT、CK、LDH活性和心肌组织中MDA水平,升高心肌组织中SOD活性,并可显著抑制心电图ST段的抬高幅度以及明显改善心肌组织的病理改变。结论鸡血藤总黄酮对结扎左冠状动脉前降支所致大鼠急性心肌缺血具有明显的保护作用,其机制可能与清除自由基和抗脂质过氧化有关。

鸡血藤总黄酮对血虚小鼠IL-3、EPO影响的实验研究

目的:观察鸡血藤总黄酮(STF)对化学因素所致的血虚小鼠血清IL-3、EPO水平的影响。方法:采用盐酸苯肼(APH)、环磷酰胺(CTX)复合造模,建立血虚模型小鼠,检测外周血及血清IL-3、EPO水平。结果:与正常对照相比,模型小鼠的外周血、IL-3降低,而血清EPO升高(P<0.01),鸡血藤总黄酮各剂量组的外周血、IL-3水平高于模型对照组(P<0.05),EPO水平显著低于模型对照组(P<0.05)。结论:鸡血藤总黄酮可以通过促进机体分泌IL-3促进红系造血,与EPO水平无关。

鸡血藤总黄酮对大肠杆菌败血症的治疗作用

为研究鸡血藤总黄酮对小鼠大肠杆菌败血症的治疗作用,本研究采用腹腔注射大肠杆菌菌液的方法建立小鼠大肠杆菌败血症模型,1 h后灌胃给予不同剂量鸡血藤总黄酮,12 h后观察小鼠临床表现并进行评分,然后剖杀小鼠,比较肝脏、胸腺和脾脏的外观、脏器指数和肝脏病理切片结果,检测各项血液常规指标,分析血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)及乳酸脱氢酶(LDH)水平,测定血清中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-2、IL-6、IL-10及肿瘤坏死因子α(TNF-α)等炎性细胞因子的水平。结果发现,腹腔注射大肠杆菌后引起小鼠被毛粗乱、精神沉郁、眼睛红肿、眼部分泌物增加且呼吸急促等症状,部分严重的小鼠出现抽搐、休克现象,肝脏、胸腺、脾脏出现萎缩、变小的现象,且脏器指数下降。肝脏病理切片可观察到肝索紊乱、肝窦增大、细胞边缘不清晰、部分区域炎性细胞浸润。血液中白细胞(WBC)、淋巴细胞(LYM)、血红蛋白(HGB)、红细胞(RBC)和血小板(PLT)等指标水平发生显著改变(P<0.05),且血清中ALT、AST、LDH及炎性细胞因子等水平显著升高(P<0.05)。而鸡血藤总黄酮和阿米卡星处理可改善上述临床表现,抑制相关指标的改变,使其趋于与对照组相似水平。以上结果表明,鸡血藤总黄酮可通过提高机体免疫水平及抑制炎性反应减轻大肠杆菌败血症引起的机体损伤。

鸡血藤总黄酮乙酸乙酯部位对大肠杆菌脂多糖(LPS)刺激RAW264.7免疫细胞氧化应激的调节作用

通过观察鸡血藤总黄酮乙酸乙酯部位(FEA)预处理和后处理对大肠杆菌脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞所致氧化应激的影响,探讨其抗应激活性。试验将细胞分为空白对照组、LPS刺激组、LPS+阳性药物组(维生素C)、LPS+不同浓度FEA组(25、50、100、200μg/m L)。试验1的细胞先用药物预处理12 h,再用LPS进行刺激;试验2则先用LPS刺激2 h后,再用药物进行处理。分别采用Griess法和荧光探针法检测NO分泌和活性氧(ROS)水平。结果发现,FEA预处理和后处理均能显著抑制LPS刺激引起的NO和ROS水平的升高(P<0.05),且后处理效果更明显。因此,FEA具有良好的抗氧化应激活性,且作为治疗药物比作为预防药物效果更佳。

鸡血藤总黄酮对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的研究鸡血藤总黄酮对四氯化碳诱导小鼠肝损伤的保护作用。方法 60只雄性小鼠随机分为6组,每组10只。除正常组外,其余各组均腹腔注射0.2%的CCl4橄榄油溶液诱导小鼠急性肝损伤,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肝组织超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)的含量,HE染色观察肝组织病理学变化。结果鸡血藤总黄酮明显抑制CCl4致血清ALT、AST活性的升高和肝组织SOD、GSH-Px活性的降低及MDA水平的升高。肝组织形态学观察显示鸡血藤总黄酮能显著改善肝组织的病理变化。结论鸡血藤总黄酮对CCl4诱导小鼠急性肝损伤具有一定的保护作用。

鸡血藤总黄酮对大鼠脑缺血的保护作用及机制研究

目的研究鸡血藤总黄酮对大鼠脑缺血的保护作用及其作用机制。方法采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血模型,观察鸡血藤总黄酮对局灶性脑缺血大鼠行为障碍、脑梗死面积的影响;采用结扎双侧颈总动脉法制备大鼠急性脑缺血再灌注模型,观察鸡血藤总黄酮对急性脑缺血大鼠脑含水量以及脑组织SOD、GSH-Px酶活性和MDA含量的影响。结果鸡血藤总黄酮(40 mg/kg、80 mg/kg)灌胃给药明显改善大脑中动脉栓塞致脑缺血大鼠的行为障碍,减少缺血区面积,同时能减轻急性脑缺血再灌注损伤引起的大鼠脑水肿,抑制缺血致脑组织SOD、GSH-Px活性的降低和MDA水平的升高。结论鸡血藤总黄酮对大鼠实验性脑缺血具有一定的保护作用,其机制可能与通过提高机体抗氧化能力有关。

基于HepG2、SMMC-7721肝癌细胞生长抑制的鸡血藤总黄酮纯化前后药效对比研究

目的:探讨鸡血藤总黄酮纯化前后对HepG2和SMMC-7721肝癌细胞药效对比的影响;明确鸡血藤抗肝癌作用的物质基础。方法:以肝癌细胞抑制率为评价指标,将纯化前后不同剂量的鸡血藤总黄酮分别作用于HepG2和SMMC-7721两株肝癌细胞24h、36h、48h后,采用MTT法检测其对两株肝癌细胞抑制情况。结果:鸡血藤纯化前后的总黄酮均能够显著抑制肝癌HepG2和SMMC-7721肝癌细胞的增殖。相同给药时间内,纯化后的鸡血藤总黄酮对肝癌细胞的抑制率均大于未纯化的鸡血藤黄酮抑制率。此外,无论纯化前与后,其抗肝癌作用随着时间和剂量的增加而增强,呈现显著的时-效、量-效关系(P<0.05)。结论:通过体外药效学比较,显示鸡血藤总黄酮纯化后药效优于纯化前药效,表明鸡血藤总黄酮是鸡血藤抗肝癌的主要物质基础,为鸡血藤在治疗肝癌方面的发展及临床合理利用奠定基础。

鸡血藤总黄酮对HeLa细胞周期和凋亡及相关因子VEGF-A、Caspase-3表达的影响

目的:评价鸡血藤总黄酮对宫颈癌细胞HeLa细胞周期和凋亡及VEGF-A、Caspase-3含量的影响,为鸡血藤用于抗子宫癌提供实验依据。方法:设定不同浓度的鸡血藤总黄酮,用MTT法筛选出合适的给药浓度以及给药时间。运用流式细胞仪将不同浓度的鸡血藤总黄酮作用于HeLa细胞,测定细胞周期与凋亡。运用ELISA试剂盒,测定鸡血藤总黄酮对HeLa细胞分泌Caspase-3、VEGF-A的影响。结果:通过MTT法最终选定药物浓度为2.00、1.45、0.70 mg/m L为最佳浓度,36 h为最佳时间。与空白对照组比较,鸡血藤总黄酮各组细胞G0/G1期、S期比例及早凋与晚凋比例显著升高,VEGF-A分泌量显著降低,Caspase-3分泌量显著升高。结论:鸡血藤总黄酮对宫颈癌细胞HeLa有显著的增殖抑制作用。

鸡血藤总黄酮对猪圆环病毒2型感染小鼠脾脏氧化应激的影响

试验旨在探讨鸡血藤总黄酮(TFSD)对猪圆环病毒2型(PCV2)感染小鼠脾脏氧化应激的影响。将70只昆明小鼠随机分为7组,对照组、TFSD组(100mg/kg体重)、PCV2组、PCV2+维生素C(VC)组、PCV2+不同浓度TFSD(25、50和100mg/kg体重)组,每组10只,连续3d采用灌胃和腹腔注射PCV2病毒液的方法建立小鼠氧化应激模型,第4~6天每天按上述分别灌胃给予生理盐水、VC或TFSD。第7天剖杀小鼠,取脾脏分析黄嘌呤氧化酶(XOD)、髓过氧化物酶(MPO)和超氧化物歧化酶(SOD)活力,并检测还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)水平,计算GSH/GSSH。结果显示,PCV2感染小鼠后,脾脏中XOD与MPO的活力及GSSG水平显著上升(P<0.05),SOD活力、GSH水平及GSH/GSSG显著下降(P<0.05)。TFSD处理小鼠脾脏的SOD活力、GSH水平和GSH/GSSG比值均显著高于PCV2组(P<0.05),而XOD、MPO活力和GSSG水平则显著低于PCV2组(P<0.05),对PCV2引起的氧化应激相关酶活力与相关分子水平变化的抑制作用优于VC。结果表明,鸡血藤总黄酮对PCV2诱导的小鼠脾脏氧化应激有良好的调节作用。

鸡血藤总黄酮对环磷酰胺所致小鼠肝损伤的保护作用

[目的]研究鸡血藤总黄酮对环磷酰胺所致小鼠肝损伤的保护作用。[方法]将60只昆明系小鼠随机分为6组,每组10只,试验周期为7 d。对照组小鼠试验全程给予生理盐水。环磷酰胺(CTX)组小鼠1~4 d灌胃给予生理盐水;5~7 d腹腔注射80 mg/(kg·BW)CTX,每天给药1次。鸡血藤总黄酮(TFSD)100组、CTX+TFSD25组、CTX+TFSD50组、CTX+TFSD100组小鼠1~7 d分别灌胃给予100、25、50、100 mg/(kg·BW)TFSD,每天给药1次;试验5~7 d除TFSD100组小鼠腹腔注射生理盐水外,其余试验组腹腔注射80 mg/(kg·BW)CTX,每天给药1次。试验结束后对各组小鼠进行眼球采血及剖检;检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)、黄嘌呤氧化酶(XOD)以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,测定血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALP)活力,检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和白介素-1β(IL-1β)含量。[结果]环磷酰胺可显著(P<0.05)降低小鼠肝脏中SOD、GSH-Px以及血清中ALT活力,显著(P<0.05)升高肝脏中XOD与MPO活力、血清中ALP活力以及炎症细胞因子IL-1β和IL-6释放水平。25、50、100 mg/(kg·BW)的TFSD处理均可显著(P<0.05)抑制由CTX引起的SOD活力降低,25 mg/(kg·BW)的TFSD处理可显著(P<0.05)提高CTX处理小鼠的GSH-Px活力;50 mg/(kg·BW)的TFSD处理可显著(P<0.05)抑制由CTX引起的XOD和MPO活力升高,且可显著(P<0.05)降低CTX处理小鼠血清中的AST活力;25、50、100 mg/(kg·BW)的TFSD处理可显著(P<0.05)抑制由CTX引起的血清中ALP活力升高,同时降低ALT活力。25、50、100 mg/(kg·BW)的TFSD处理均可显著(P<0.05)抑制由CTX引起的IL-1β水平升高。[结论]鸡血藤总黄酮可通过调节小鼠炎症因子释放以及肝组织中氧化还原酶水平对环磷酰胺所致肝损伤提供保护,推荐剂量为25 mg/(kg·BW)。

鸡血藤总黄酮对急性缺血性脑卒中大鼠肠道屏障功能、氧化应激及ERK基因表达与DNA甲基化的影响

【目的】探讨鸡血藤总黄酮对急性缺血性脑卒中大鼠的治疗作用及机制。【方法】将60只大鼠随机分为正常组,模型组,中药低、中、高剂量组和阿司匹林组,每组10只。除正常组,其余各组大鼠构建大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。造模成功后,中药低、中、高剂量组分别给予鸡血藤总黄酮100、200、400 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,阿司匹林组给予阿司匹林100 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,正常组与模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续给药4周。给药结束后,进行悬尾实验(TST)、强迫游泳实验(FST)、旷野实验等行为学观察,苏木素-伊红(HE)染色法观察海马组织病理学变化,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸水平,黄嘌呤氧化酶法检测海马组织超氧化物歧化酶(SOD)水平,硫代巴比妥酸法检测海马组织丙二醛(MDA)水平,实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测海马组织细胞外信号调节激酶(ERK)mRNA表达水平,采用Sequenom Mass Array飞行时间质谱法检测海马组织ERK DNA甲基化水平。【结果】与正常组比较,模型组大鼠TST不动时间缩短,FST不动时间和圈内保留时间延长,血清中DAO、D-乳酸含量升高,海马组织中SOD水平降低、MDA水平升高,海马组织中ERK mRNA表达水平降低、ERK DNA甲基化水平升高(均P<0.05),海马组织可见明显病理损伤;与模型组比较,中药中、高剂量组大鼠TST不动时间延长、FST不动时间和圈内保留时间缩短,血清中DAO、D-乳酸含量降低,海马组织中SOD水平升高、MDA水平降低,海马组织中ERK mRNA表达水平升高、ERK DNA甲基化水平降低(均P<0.05),海马病理学变化得到改善;中药中、高剂量组上述各指标的改善效果优于阿司匹林组,或与阿司匹林组相当。【结论】鸡血藤总黄酮可有效治疗急性缺血性脑卒中大鼠,其机制可能与调节肠道屏障功能、减轻海马组织氧化应激及促进ERK mRNA表达、抑制ERK DNA甲基化水平有关。

鸡血藤总黄酮对2型糖尿病模型大鼠血脂、血液流变学的影响

目的:观察鸡血藤总黄酮对2型糖尿病模型大鼠血脂、血液流变学的影响。方法:实验分为空白组,模型组,盐酸二甲双胍组(166 mg·kg^-1),鸡血藤总黄酮高剂量组、中剂量组、低剂量组(400 mg·kg^-1、200 mg·kg^-1、100 mg·kg^-1),每组各10只。除空白组外,其余各组高脂高糖饲料喂养6周,腹腔注射链脲佐菌素65 mg·kg^-1。随后,各组动物给予相应药物灌胃,连续给药4周,空白组及模型组给予同体积生理盐水。4周后动物腹主动脉取血,测定血液中血液流变学各项指标,血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triacylglycerol,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterin,LDL-C)水平。结果:与模型组比较,二甲双胍组及鸡血藤高剂量组、中剂量组、低剂量组大鼠全血黏度、血浆黏度、红细胞比容及血沉均显著降低,TC、TG、LDL-C水平均显著降低,HDL-C水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:鸡血藤总黄酮可明显改善2型糖尿病模型大鼠血脂代谢、血液流变学相关指标。

鸡血藤总黄酮抗炎活性的研究

为了探讨鸡血藤总黄酮的抗炎活性,试验采用二甲苯所致小鼠耳肿胀模型和大肠杆菌脂多糖刺激RAW264.7细胞炎症模型,测定鸡血藤总黄酮对小鼠耳肿胀及RAW264.7细胞炎性因子分泌水平的抑制作用。结果表明:体内鸡血藤总黄酮高剂量(100 mg/kg)和中剂量(50 mg/kg)组小鼠耳肿胀率显著低于空白对照组(P<0.05),体外鸡血藤总黄酮处理对LPS刺激RAW264.7细胞所致的一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)分泌水平的升高具有显著抑制作用(P<0.05)。说明鸡血藤总黄酮在体内和体外均具有良好的抗炎效果。

鸡血藤总黄酮对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖凋亡的影响及对Wnt/β-catenin通路的调控作用

目的:研究鸡血藤总黄酮通过调控Wnt/β-catenin通路对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖、迁移、凋亡等的影响。方法:将人乳腺癌细胞株MCF-7按每孔1×10~5个细胞接种到96孔板中,并分为阴性对照组、阳性对照组、鸡血藤总黄酮高、中、低剂量组共5组,培养48 h。MTT法检测MCF-7细胞增殖抑制率;TUNEL法检测MCF-7细胞凋亡指数;Transwell实验观察MCF-7细胞侵袭能力;细胞划痕实验观察MCF-7细胞迁移能力;RT-qPCR检测MCF-7细胞中Wnt1、β-catenin、CyclinD1、c-Myc及MMP-7 mRNA表达水平;Western Blot检测MCF-7细胞中Wnt1、β-catenin、CyclinD1、c-Myc和MMP-7蛋白表达水平及β-catenin磷酸化水平。结果:鸡血藤总黄酮显著抑制MCF-7细胞的增殖、侵袭及迁移(P<0.05),显著促进MCF-7细胞的凋亡(P<0.05);鸡血藤总黄酮显著下调Wnt1、β-catenin、cyclinD1、c-Myc和MMP-7的mRNA表达水平(P<0.05);鸡血藤总黄酮显著上调β-catenin磷酸化水平(P<0.05),显著下调Wnt1、β-catenin、cyclinD1、c-Myc和MMP-7蛋白的表达水平(P<0.05),且具有明显的剂量依赖性。结论:鸡血藤总黄酮可抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖、侵袭和转移能力,促进MCF-7细胞凋亡,机制可能与其调控Wnt/β-catenin信号通路有关。

鸡血藤总黄酮滴丸的制备工艺优选

目的优选鸡血藤总黄酮滴丸的制备工艺。方法以滴丸的外观质量、溶散时间、丸重差异作为考察指标,采用加权评分法综合评分,运用正交试验优选鸡血藤总黄酮滴丸的最佳制备工艺。结果制备鸡血藤总黄酮滴丸的最佳工艺为:以聚乙二醇(PEG)4000∶PEG6000为1∶7做混合基质,药物与基质按质量比例为1∶3投料,滴头内径为4.5 mm,滴距为10 cm,滴速为30滴/min,冷却剂温度为8℃。结论该制备工艺稳定、可行,产品质量较好,为鸡血藤总黄酮滴丸的制备生产提供了参考依据。

鸡血藤总黄酮对卒中大鼠Notch/NF-κB通路及吞咽功能障碍的影响

目的从果蝇双翅边缘缺刻同源基因(Notch)/核转录因子-κB(NF-κB)通路,分析鸡血藤总黄酮缓解卒中大鼠吞咽功能障碍的可能机制。方法取SD雄性大鼠,用线栓法短暂性阻塞大脑中动脉90 min建立卒中后吞咽困难模型,随机分为假手术组、模型组、鸡血藤总黄酮组(20 g/kg)、Notch通路激活剂(Jagged1)组(25 ng/kg)、鸡血藤总黄酮+Jagged1组(20 g/kg+25 ng/kg),每组12只。术后第2天开始给药,各组连续给药14 d,每天1次。末次给药30 min后,用生物信号采集系统记录大鼠吞咽次数及吞咽反应时间;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)水平;免疫组织化学法检测孤束核延髓组织SP阳性表达水平;TUNEL染色观察孤束核延髓组织神经细胞凋亡情况;Western blot检测孤束核延髓组织Notch、多毛/增强分裂因子(Hes1)、p-NF-κBp65、NF-κBp65、促凋亡基因(Bax)蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠吞咽中枢神经凋亡及损伤严重,吞咽次数减少,SP阳性表达、CGRP表达降低,脑梗死体积、吞咽反应时间增加,吞咽中枢神经组织中Notch/NF-κBp65活化介导的促凋亡活性升高(P<0.05)。鸡血藤总黄酮组大鼠可减轻吞咽中枢神经凋亡及损伤,抑制吞咽中枢神经组织中Notch/NF-κBp65活化介导的促凋亡活性升高,增加吞咽次数、SP阳性表达,缩短吞咽反应时间,改善吞咽功能障碍(P<0.05)。Notch通路激活剂-Jagged1处理可促进吞咽中枢神经组织中Notch/NF-κBp65活化介导的促凋亡反应进一步活化,加重吞咽中枢神经凋亡及损伤,减少吞咽次数及SP阳性表达,并减弱鸡血藤总黄酮发挥的上述作用(P<0.05)。结论鸡血藤总黄酮可抑制吞咽中枢神经凋亡及损伤,缓解卒中后吞咽困难障碍的发展,且其抑制作用可能与抑制Notch/NF-κB通路活化有关。